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Control del ciclo

celular

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

El ciclo celular est controlado por


seales extracelulares y seales
intracelulares
Seales extracelulares: estado
nutricional, factores de crecimiento,
mitgenos etc.

Seales intracelulares:
Complejos Ciclinas-Cdks .

Seales extracelulares:
MITGENOS
Protenas secretadas que se unen a receptores
de la superficie celular para inducir
diferenciacin o proliferacin celular

Hormona de crecimiento
Interfern
Prolactina
Eritropoyetina
Interleucinas( IL-2, IL-4)
G-CSF ( factor estimulante de granulocitos)
PDGF (factor de crecimiento de plaquetas)
EGF (factor de crecimiento epidermal)
Dra Roxana Riviera

Seales extracelulares:
MITGENOS
MITGENO

COMO ACTUA

Prolactina

Diferenciacin de las clulas epiteliales a clulas acinares en glndula


mamaria

Eritropoyetina

Proliferacin de eritrocitos

Interleucinas

IL-2: proliferacin de clulas T del sistema inmune (destruyen clulas


infectadas)
IL-4: proliferacin de clulas B productoras de anticuerpos

G-CSF

Proliferacin y diferenciacin de granulocitos (globulos blancos que


inactivan bacterias y otros patgenos)

(factor estimulante de granulocitos)

PDGF (factor de crecimiento de plaquetas)


EGF (factor de crecimiento epidermal)

Actan en la proliferacin de un amplio rango de tipos celulares

Hormona de crecimiento

Participa en una amplia gama de factores que determinan crecimiento


y multiplicacin celular

Dra Roxana Riviera

Seales intracelulares: Complejos


ciclinas-Cdk
La activacin y la desactivacin de
proteincinasas (Cdk: parte cataltica del
complejo) depende de otras protenas, las
ciclinas
(parte
reguladora
del
complejo)

cinasas
dependientes de ciclina (Cdk ) no son
activas enzimticamente a menos que formen
un complejo con las ciclinas. Constituyen la
parte clave del sistema de control del ciclo
celular y se encuentran presentes durante todo
el ciclo celular en proliferacin.

Las

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

proteincinasas

Las ciclinas se llaman as porque sus


concentraciones varan durante el ciclo celular.

I. Requisitos para que se


lleve a cabo el paso en los
diferentes estados del ciclo
celular
Formacin de complejos ciclina-Cdks
especficos para cada estado.
Fosforilacin y desfosforilacin de Cdks
Degradacin de protenas (protelisis)

Formacin de complejos ciclina-Cdks especficos


para cada estado.

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Las concentraciones de ciclinas varan durante el ciclo celular por lo


que se activan y desactivan complejos ciclina-Cdk.

La entrada y salida de las etapas del ciclo


celular depende de la concentracin tanto de
ciclinas como de Cdks

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

La entrada y salida de las etapas del ciclo celular requiere de una


concentracin tanto de ciclinas como de Cdks especficas.
Ejemplo, los picos en la figura correspondientes al estado de la mitosis
corresponden la co-sntesis abrupta del complejo ciclina-Cdk mittico:
ciclina B y Cdk 1.

Efecto de Fosforilacin y
desfosforilacin en Cdks

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

La fosforilacin por proteincinasas y desfosforilacin por


proteinfosfatasas en sitios especficos de las Cdk
provocan que la actividad ciclina-Cdk se active o se
inhiba.

Diferentes Cdk se fosforilan/desfosforilan


a lo largo del Ciclo Celular

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Las diferentes Cdks deben ser fosforiladas y desfosforiladas para


actuar. A su vez, cada uno de stos complejos ciclina-Cdk activados
fosforilan protenas diana lo que desencadena la entrada a
diferentes etapas del ciclo celular.

La protelisis en el control del


ciclo celular

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

El progreso en el ciclo celular tambin depende de la degradacin


(protelisis) de ciclinas en proteosomas cuando han sido marcadas
con ubiquitina.
El Cdk que forma complejo con stas ciclinas degradadas es
automticamente inactivado.
Tanto la activacin como desactivacin de complejos ciclina-Cdk
desencadenan el progreso del ciclo celular.

La protelisis en el control del


ciclo celular
A lo largo del ciclo
celular, las Cdks se
asocian con diferentes
ciclinas
cuya
concentracin aumenta
o disminuye a travs
del ciclo celular.
La actividad de la Cdk
termina al degradarse
la ciclina. De esta
manera se regula el
ciclo.
Molecular Biology of the Cell. 4th edition.
Alberts B, Johnson A, Lewis J, et al.

II. Control del Ciclo


celular
En ste apartado se explican la accin
especfica de cada uno de los factores
mencionados en el apartado anterior (I) para el
paso a travs de las etapas del ciclo celular.

El ciclo celular avanza con la desactivacin y


activacin de complejos de ciclina-Cdk
*

Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular.


Ed. Mdica Panamericana. 5 Edicin. 2005

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

G1

MITGENOS
Activacin de va de sealizacin
MAP-cinasa (JAK)
Inducen
Transcripcin de genes de respuesta temprana
por activacin de factores de transcripcin
preexistentes.
Los genes de respuesta temprana codifican
los factores de transcripcin:

c-Fos, c-Jun y c-Myc


estimulan la
transcripcin de

Genes de expresin retardada


como
Primero: ciclinas tipo D : CDKs 4/6
Despus: ciclinas E/CDK2,
Incremento de la sntesis de factores
de transcripcin, como E2F

Molecular Biology of the Cell. 4th


edition. Alberts B, Johnson A,
Lewis J, et al.

Mitgenos y G1

En la mayora de las clulas animales los mitgenos estimulan la divisin


celular, fundamentalmente al contrarrestar los mecanismos intracelulares
de freno que tienden a bloquear la progresin a lo largo del ciclo.
Un mecanismo importante
de freno es la protena
retinoblastoma (Rb).
En ausencia de mitgenos,
Rb desfosforilada mantiene a
ciertos reguladores de
transcripcin (ejemplo: E2F)
en
estado
inactivo
impidiendo la estimulacin
de genes que participan la
proliferacin celular.
Los mitgenos actan en la fase G1 .

Fig 18-45-A pag 644

Mitgenos y G1
Los mitgenos
se unen a
receptores de la superficie
celular y activan las vas de
sealizacin intracelular
que
inducen la formacin
y
activacin de los complejos Cdk
de G1: Ciclina D-CDK4/ CDK6 y
G1/S : Ciclina E-CDK2.
Estos complejos fosforilan a la
protena Rb, desactivndola .
Los factores de transcripcin
pueden activar la transcripcin
de genes diana necesarios para
proseguir con la fase S.

Fig 18-45-B pag 644

Transicin de G1S

Control del paso de G1 a S:


presencia de mitgenos

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Si el medioambiente es desfavorable (ausencia de mitgenos) la clula


se detiene en un punto de control G1 y si la privacin persiste , la
clula abandonar el ciclo celular y puede ingresar en etapa Go ya sea en
forma temporal o permanentemente (ejemplo neuronas, clulas del
msculo esqueltico).
Si el medio ambiente es favorable (presencia de mitgenos) generalmente
la clula termina el ciclo celular pasando el punto de control G1.

G1
Tarda
Punto de restriccin:
Cuando la concentracin
de CiclinaE-CDK2
alcanza un umbral crtico,
se contina fosforilando Rb
an y cuando la ciclina DCDK4/6 se elimine por falta
de mitgenos

Por lo tanto, la fosforilacin


adicional de Rb se da
independientemente de la
presencia de mitgenos y la
clula est comprometida
a dividirse.

Ciclina E-CDK2
Fosforila mas pRB

Retroalimentacin
positiva
Se estimula
su transcripcin

por lo que se tienen niveles an


ms altos de E2F activa

Activan las transcripcin de


Ciclina A a medida que se
aproxima la transicin G1S
que forman

Complejos
Ciclina A-CDK2 inactivos

Cyclina A-CDK2

Activacin de complejos Ciclina A-CDK2


En G1 tarda los complejos
Ciclina A-CDK2
(ciclina y CDKs de la fase S)

estn inactivos
a causa de

Inhibicin del complejo


por un inhibidor (p27).
Se activan cuando
Figure 17-19
Molecular biology of the
cell / Bruce Alberts [et
al.].-- 5th ed. 2008

Ciclina A-CDK2
inactivos

Fosforilacin de p27 por


ciclina-Cdk de G1 y su
posterior degradacin en los
proteosomas.
Complejo Ciclina
A-CDK2 activo

Sntesis DNA

fosforilacin y activacin de los


complejos de pre-replicacin de ADN

Activacin de complejos de pre-replicacin

Fase G1

El ORC que permanece


unido durante todo el ciclo
celular a los orgenes de
replicacin,
permite la
unin
de
protenas
reguladoras
como
la
Cdc6
(que
aumenta
durante la G1) formando
el:
Complejo pre-replicativo

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Eventos
necesarios para
que se lleve a
cabo la transicin
G1 tarda-S

Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5


Edicin. 2005

El complejo proteico pre-replicativo se une a los orgenes de replicacin.


Los complejos de ciclina-Cdk de la fase G1

inactivan el gen Cdh1 (implicado en los procesos posteriores de telofase y citocinesis)


activan componentes de ciclina y CDKs de la fase S (ciclina A-Cdk2).
fosforilan e inactivan al inhibidor de la fase S: p27 (activo inhibe Cdk2 y Cdk4).
p27 se marca con ubiquitina y es degradado en proteosomas (SCF: S complex factor)

Se activa la fase S: Sntesis de DNA.

Etapa S

Replicacin del DNA


Duplicacin del centrosoma
Sntesis de cohesinas

Activacin de complejos de pre-replicacin

El ORC que permanece unido


durante todo el ciclo celular a los
orgenes de replicacin, permite la
unin de protenas reguladoras como
la Cdc6 (que aumenta durante la G1)
formando el:
Complejo pre-replicativo

Los Cdk activos de fase S


(ciclina A-CDK2) fosforilan a
Cdc6.

La fosforilacin de Cdc6 y la
liberacin de otras protenas del
complejo pre-replicativo permiten el
ensamblaje de la horquilla de
replicacin

Fase G1

Fase S

Sntesis de DNA
Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Es importante que el
DNA durante la fase S
se replique una vez
para evitar
mutaciones.

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

La fosforilacin de Cdc6 causa que sta y otras protenas


se disocien de ORC y que el DNA se replique una sola
vez.

Unin de cromtides hermanas y


cohesinas
Una vez duplicado el DNA, las
cohesinas mantienen las
cromtidas hermanas juntas
hasta el final de la mitosis

Genomes. 2nd edition.


Brown TA.
Oxford: Wiley-Liss; 2002.

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Duplicacin de centrosomas (un par de centrolos)

La duplicacin del centrosoma inicia en la


fase S y es activado por las mismas Cdks que
activan la replicacin del DNA: Cdk de G1/S y Cdk
de S.

Cuando comienza la mitosis, los dos centrosomas se


separan para nuclear cada uno un ster de microtbulos que
forman los polos del huso mittico.
Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

AQU VAMOS!!
Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5
Edicin. 2005

Transicin G2M

Activacin de Cdk de M

La acumulacin de la ciclina de la mitosis (ciclina B) induce la formacin de


los complejos Cdk de M (Ciclina B-Cdk1) que al principio estn inactivos.

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Fosfatasa Cdc25c: elimina los fosfatos


inhibitorios de los complejos mitticos

Los complejos Cdk de M se activan de dos formas:


Activacin de la cinasa (Cak) que fosforila a M-Cdk (fosfato activador ).
Activacin de la fosfatasa activadora Cdc25 que remueve el fosfato inhibitorio
de los complejos mitticos (previamente unido por la cinasa inhibitoria Wee1).

Activacin de Cdk de M

ciclina B-Cdk1

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

La proteinfosfatasa Cdc25 se inhibe si el DNA est


daado, por lo que junto con la p53 constituye otro
punto de control para el DNA daado.

Transicin
G2M

Retroalimentacin
positiva

FASE M
Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

El complejo activado de ciclina-Cdk de M (ciclina B-Cdk1) activa mas


Cdk de M al agregar un fosfato activador a Cdc25 por
retroalimentacin positiva.
El aumento explosivo de Cdk de M impulsa a la clula a pasar de G2 a
la fase M.

La activacin de las Cdks de M


desencadena:
Desintegracin de la envoltura
nuclear ( por fosforilacin de
laminas A,B y C).
La
condensacin
de
los
cromosomas replicados (con ayuda
de las condensinas) y su
sepreparacin para la segregacin,

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

El ensamblaje del huso mittico


para separar los cromosomas.
El anillo contrctil que separar
las clulas hijas.

MetafaseAnafase

Molecular biology of the cell / Bruce Alberts [et al.].-- 5th ed. 2008

Anafase: separacin de las cromtidas hermanas


El ciclo avanza a la anafase por efecto de la degradacin de cohesinas.

APC-cdc20

Pasos para degradacin de


cohesinas:
1. Se activa el APC-cdc20.
2. La securina se marca con ubiquitina
por el APC-cdc20 activo (anaphase
promoter complex) para su posterior
degradacin.

Molecular biology of the cell / Bruce Alberts [et al.].-- 5th ed.
2008

2. La separasa (proteasa que es


inhibida por la securina) libre,
degrada la cohesina.
3. Los cromosomas se separan
4. Se activa la anafase
Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Anafase Telofase
Cdh1

Al final de la anafase,
cuando los cromosomas han
alcanzado la ubicacin apropiada
en los polos opuestos

Se activa el APC-cdh1

las ciclinas mitticas son


marcadas con ubiquitina y
degradadas en el proteosoma

conduce

TELOFASE

cadena de
ubiquitina

APC-cdh1
activo

M-ciclinaCdk

Cdk de M

Telofase y
citocinesis
Los cromosomas se
descondensan.
La envoltura nuclear se
forma de nuevo alrededor
de los ncleos de las
clulas hijas.
El aparato de Golgi
vuelve a ensamblarse
durante la telofase.
El citoplasma se divide
durante la citocinesis, y se
forman las dos clulas
hijas.

Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5


Edicin. 2005

Prerrequisitos para iniciar un nuevo ciclo


celular
En G1 se re-ensamblan de
nuevo los complejos de prereplicacin en los orgenes de
replicacin, y se preparan para
la prxima fase S (paso 1 en
figura).
Se activan complejos G1
ciclina-Cdks por mitgenos.
Se fosforila e inactiva Cdh 1
por los complejos ciclina G1CDK al final de G1.
Se inicia otro ciclo si el
medioambiente es favorable.

Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5


Edicin. 2005

APC-cdh1 inactiv a ls ciclinas mitticas

El pasaje por las transiciones crticas del ciclo


celular, G1-fase S, metafase-anafase, anafasetelofase y citocinesis, son irreversibles

Porque stas transiciones se desencadenan por la


degradacin regulada de protenas.
Como consecuencia, las clulas estn obligadas a
realizar el ciclo celular slo en una direccin.

PUNTOS DE CONTROL
DEL
CICLO CELULAR
CHECK POINTS

Puntos de control del ciclo celular


En que consisten:

Cascadas de fosforilaciones de determinadas


protenas que alteran su actividad, estabilidad,
o localizacin lo que conducen a una detencin o
arresto del ciclo en determinada fase.

Funcin:

Aseguran que los cromosomas estn intactos y


que cada estadio del ciclo celular se complete
antes de comenzar el siguiente.

Punto de control de dao al DNA:


G1, S y G2
Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

en G1 y S se impiden que se copien mutaciones


que se perpetuaran en el genoma
en G2 se reparan los daos de doble cadena
antes de mitosis

Punto de control de dao al DNA:


G1, S y G2
Participan las protenas supresoras
de tumores:
ATM/ATR
Chk1/2
p53 p21

Bloquea la progresin a travs del ciclo


hasta que el dao se repara.

Punto de control de dao al DNA

G1, S y G2

Dao en ADN
Se activa

proteincinasas
ATM / ATR
(supresora tumor)
Puede desencadenar dos vas

Chk1/Chk2

Va p53-p21

Fosforilan
e inactivan

Cdc25
Bloqueo en G1-S

Detencin prolongada en
G1, S y G2
hasta que se repare DNA

Chk: check point cinasa


Cdc25 es la encargada de eliminar el fosfato inhibidor de CDK2 para dar inicio a la fase S.

CLUSULA MDICA:
Los pacientes con mutaciones
en ambas copias de ATM o Chk2
desarrollan cnceres con
frecuencia mucho mayor que lo
normal.
Ambas son proteincinasas
supresores de tumores.

Modo de accin del gen p53 cuando hay dao


en el DNA

Modern Genetic Analysis.


Griffiths AJF, Gelbart WM, Miller JH, et al.

Modo de accin del gen p53 cuando hay dao


en el DNA

P53 es una protena supresora de tumor


que normalmente se encuentra en bajas
concentraciones en la clula, ya que en gran
medida es degradado por proteosomas.

El dao al DNA induce la actividad de


ATM/ATR que fosforilan a p53 en un sitio
de unin con MDm2 (una ligasa de ubiquitina
que marca p53 para su degradacin)
incrementan las concentracin de p53 y
como
consecuencia,
se
estimula
la
transcripcin de la protena p21.

La protena p21 inhibe los complejos


ciclinas-Cdks (1,2,4 y 6) y la subunidad de
la DNA polimerasa (PCNA)

Se detiene el ciclo en G1 hasta que se


repare el dao al DNA

inactiva a

Modo de accin del gen p53 cuando hay dao


en el DNA
Si el dao es muy severo,
p53 induce a la clula a
apoptosis.
Si el p53 est mutado el ciclo
celular prosigue resultando el
DNA en mutaciones que
frecuentemente culminan en
cncer.

Introduccin a la Biologa Celular. 2010. Albert et al.

Clusula Mdica
Casi todas las clulas
cancerosas tienen
mutaciones en ambos
alelos del gen p53.
Las mutaciones en p53,
ATM y Chk1 pueden
causar cncer.

El punto de control del DNA incompletamente


replicado impide la entrada a la mitosis

Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5


Edicin. 2005

Punto de control de DNA no replicado en G2

Controla la progresin
del ciclo en la fase G2
Como acta?

Replicacin completa

DNA no replicado o daado

Hay protenas que reconocen


regiones del ADN no
replicado check point proteins, va
ATR/Chk1
Cuando hay dao, la proteincinasa
Chk1 se activa y fosforila a la
fosfatasa Cdc25C inactivandola
Cdc25 inactiva no puede eliminar
el fosfato inhibidor de las Cdk
mitticas

Se bloquea la mitosis
El ATR contina iniciando sta
cascada de proteincinasas hasta
que se completan la replicacin
del DNA.

Chk1 inactiva

Remueve fosfato
inhibitorio

MPF = Factor promotor


de la mitosis

** MPF en
mamferos
involucra: Ciclina
B-CDK1

El punto de control del ensamble del uso impide la


Anafase

Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5


Edicin. 2005

Punto de control del ensamblaje del uso

Impide la iniciacin prematura de

la anafase, cuando algn cinetocoro


no est asociado con los microtbulos
del uso.

Cmo acta?

Mad2 y otras protenas, se


asocian con los cinetocoros que no
estn unidos a microtbulos e inhiben
la activacin de APC-Cdc20 (factor de
especificidad del APC para segurina)

No se lleva a cabo la Anafase

APC-Cdc20

Mad2
cinetocoro
No unido a
microtbulo

No se activa APC, por lo que no


se digiere la cohesina que une a
las cromatidas hermanas

APC es el complejo promotor de la anafase que poliubiquitinisa la securina, lo que


libera a la separasa, que es la encargada de degradar a la cohesina que mantiene unidos a los cromosomas;
y que Cdc20 dirige APC hacia la securina.

Punto de control de separacin NO equitativa de los cromosomas

Impide la telofase y citocinesis hasta

que los cromosomas hijos se separen

adecuadamente.

Factor importante

cdc14

Durante interfase y mitosis, se encuentra

inactivada
en el nuclelo, pero es necesario su liberacin para
la salida de la mitosis.

( activa a
Cdh1)
Cual es el mecanismo?
Como acta el cdc14?

Por qu se bloquea la telofase?

CDC14 permite la degradacin de las ciclinas mitticas


Si los cromosomas
no se separan
adecuadamente

Cdc14 NO se libera
del nuclelo

se bloquea
activacin
del Cdh1

no se degradan
las ciclinas mitticas

Cdh1
Funcin normal:
Cdc14 es la fosfatasa
que desfosforila a Cdh1
activndolo.

NO hay

Cdh1 es el factor de
especificidad del APC que
dirige APC hacia las Ciclinas
mitticas para su
posterior degradacin.

Telofase

Cuando la separacin de los


cromosmas NO es equitativaNO
se libera cdc14 por lo que NO
se activa Cdh1 NO
poliubiquitina a las ciclinas
mitticas No prosigue la
telofase

Cdc14
en el nuclelo

Cuando la
separacin de los
cromosomas
es equitativa, el
cdc14 se libera del
nuclelo

Cuando la
separacin de los
cromosomas NO
es equitativa, el
cdc14 permanece
en el nuclelo .

Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5


Edicin. 2005

Bibliografa
Alberts, Bruce, et al. Introduccin a la
Biologa Celular. Ed. Mdica
Panamericana. 3 Edicin. 2011
Lodish, Harvey, et al. Biologa Celular y
Molecular. Ed. Mdica Panamericana. 5
Edicin. 2005