Anlisis

microbiolgico de
agua
Rodrigo Prez Rivera
Jos Roberto Acono Carbajal
Gabriel Cordero Martnez
Juanita Tlalmis Corona

ANLISIS MICROBIOLGICO DEL

AGUA

Se
puede
definir
el
anlisis
microbiolgico como el conjunto de
operaciones encaminadas a determinar
los microorganismos presentes en una
muestra problema de AGUA.

ANLISIS MICROBIOLGICO DEL

AGUA

El inters se centra
en
los
microorganismos
patgenos, que son
los diferentes tipos
de bacterias, virus,
protozoos y otros
organismos,
que
transmiten
enfermedades

ENFERMEDAD

AGENTE

ORIGEN BACATERIANO
Fiebres tifoideas
y paratifoideas

Salmonella typhi,
Salmonella
Paratyphi A y B

Disentera bacilar Shigella

clera

Vibrio cholerae

Gastroenteritis
agudas y
diarreas

Escherichia coli.
Campylobacter
Yersiniae
nterocolitica
Salmonella sp
Shigellas

Microorganismos indicadores de la
calidad del agua
En el anlisis rutinario de aguas no se aslan
patgenos
Podran
no aparecer en muestras de
laboratorio pues:
Tienen acceso en forma espordica
No sobreviven
en el agua por mucho
tiempo
Necesitan mucho tiempo para detectarse
Si estn en nmero muy pequeo no se
pueden detectar por mtodos de laboratorio

Se usan microorganismos
indicadores:

Su presencia en el
agua prueba que
est polucionada
con material fecal
de personas o
animales de sangre
caliente

Se encuentran slo
en aguas
polucionadas
Y cuando estn
presentes en el
agua indican que
hay patgenos

TOMA DE MUESTRAS PARA ANLISIS MICROBIOLGICO

Las muestras que se tomarn para el anlisis deben ser

representativas para poder determinar as su calidad
microbiolgica.

Su anlisis debe comenzar antes de que hayan

transcurrido 6 horas desde el momento de la toma de
muestras.

En circunstancias excepcionales, las muestras pueden

conservarse a una temperatura de 4C durante un
periodo mximo de 24 h antes de su anlisis.

Para su muestreo debe utilizarse frascos estriles y debe

recolectarse cantidades comprendidas entre 500 y 1000
ml.

Cuando se estime probable que el agua a analizar

contenga trazas de cloro, cloramina u ozono, ser
necesario neutralizar su efecto bactericida en el
momento del muestreo.

Se aadir una cantidad suficiente de tiosulfato sdico.

- Para un volumen de 250 ml son suficientes 0,2 ml de una
solucin acuosa al 3% de tiosulfato sdico

ANLISIS MICROBIOLGICO: BACTERIAS COLIFORMES

FUNDAMENTO:

Los

coliformes

reagrupan

ciertas

especies bacterianas pertenecientes a la familia

Enterobacteriaceae,

de

morfologa

bacilar,

Gram

negativas, aerobias o anaerobias facultativas, oxidasa

negativa, no esporuladas y que fermentan la lactosa
con produccin de cido a 37Cen 24-48 horas

ANLISIS MICROBIOLGICO: BACTERIAS COLIFORMES

El mtodo consiste en desarrollar solo una

prueba presuntiva en el que una reaccin
negativa excluye la presencia del grupo
coliforme.

Colimetra

Prueba Presuntiva

Inoculacin en caldo lactosado

Produccin de gas +

No produccin de gas

Fin de la prueba

Prueba Confirmativa

Resiembra a partir de los tubos positivos caldo

lactosado
Siembra de muestras + en EMB
Colonias pequeas, con centro
oscuro y brillo metlico +

O Siembra en tubos con

CLVBB
Produccin de gas +

Terminacin de la prueba

Colonias ms tpicas de siembra por estra

EMB
Coloracin de Gram: Bacilos Gram - no
esporulados

PROCEDIMIENTO. Inocular caldo de

peptona con diluciones decimales de la
muestra de agua, expresados en 10-1, 102, 10-3. Inocular 3 tubos de lactosa bilis
verde brillante (a los que se les aade un
tubo de Durham invertido) con 1 ml de
cada dilucin. Incubar a 37C (+/-1C)
durante 24 48h.

Mtodo de determinacin del nmero

de patgenos
Nmero de patgenos

Nmero de unidades formadoras de

colonias totales o de una especie
determinada en un gr o en 1 ml de
material investigado bajo condiciones
de cultivo definidas

Mtodos de determinacin del nmero

de grmenes:

Mtodos del nmero ms

probable (NMP).
Mtodo de filtro de membrana
Mtodo de la placa vertida
Mtodo de ttulo

Mtodo del nmero ms probable

Paralelamente
varias series
decimales de
dilucin (mnimo
tres) en medio de
cultivo lquido.

Nmero de tubos
con crecimiento
NMP, tablas de
McRady, 100 ml
de muestra

Mtodo de filtro de membrana

Filtro estril sobre unidad de filtracin de
0.45
Se filtra cierto volumen de agua: bacterias
quedan retenidas
El filtro se coloca sobre soporte
absorbente saturado con el medio
adecuado. Incubar en cajas de petri
especiales que permiten acomodar el
soporte y el medio adecuado
Desarrollo de colonias sobre el filtro

Ventajas:
Examinar grandes volmenes de
agua
Ms rpidas que tcnicas de tubo
Estimacin cuantitativa de tipos de
bacterias (coliformes, etc.)
Limitacin
Aguas con muchos slidos disueltos o
suspendidos
NMP = #coliformes x 100/ vol filtrado

Referencias
Manual de ANALISIS BACTERIOLOGICO DEL AGUA,
Fuentes de agua y agua potable, Blga. Margarita Aurazo
de Zumaeta
http://bvs.per.paho.org/texcom/cd048437/aurazoan.pdf
Anlisis microbiolgico del agua, Universidad Politcnica de
Cartagena
http://www.upct.es/~minaeees/analisis_microbiologico_aguas.p
df
NOM-127-SSA1-1994, Salud ambiental. Agua para uso y
consumo humano. Lmites permisibles de calidad y
tratamientos a que debe someterse el agua para su
potabilizacin.

Anexos Norma
4. Lmites permisibles de calidad del agua
4.1 Lmites permisibles de caractersticas bacteriolgicas
El contenido de organismos resultante del examen de una muestra simple de
agua, debe ajustarse a lo establecido en la Tabla 1.
Bajo situaciones de emergencia, las autoridades competentes deben establecer
los agentes biolgicos nocivos a la salud a investigar.
TABLA 1
CARACTERISTICA

LIMITE
PERMISIBLE

Organismos coliformes 2 NMP/100 ml

totales
2 UFC/100 ml
Organismos coliformes No detectable
fecales
NMP/100 ml
Cero UFC/100 ml