ALGORITMO BACTERIANO

Dr. en C. Jaime Vargas Arzola, FCQ-UABJO.

vajcquabjo@hotmail.com

2016.

Factores de multiplicacin
de los microorganismos

Factores Qumicos: NUTRIENTES

Factores Fsicos:
TEMPERATURA, pH, O2,
Agua

MEDIOS DE CULTIVO
Son las distintas mezclas de
sustancias nutritivas empleadas
en el laboratorio para el cultivo de
microorganismos.

Clasificacin / Fsicas.
Medio de cultivo lquido

Caldo
Tubo

Medio de cultivo slido

Agar
Placa de Petri

Componentes:
Fuente de Carbono
Fuente de Nitrgeno
Sales inorgnicas
Aminocidos

Componentes:
Agentes selectivos
Indicadores de pH
Indicadores qumicos
Vitaminas

Componentes:
Peptonas
Sustancias hidrosolubles.
Presentan composicin particular,
diferenciable

por

su

contenido

en

vitaminas e hidratos de carbono.

Se obtiene a partir de casena, carne,
gelatina y harina de soya.

Componentes:
Extractos
Son productos de maceracin en
solucin acuosa obtenidos por
calentamiento que se reducen a polvo
por evaporacin.
Son ricos carbohidratos, protenas de
bajo peso molecular y en factores de
cecimiento como las vitaminas.

Componentes:
Agar
Agente solidificante.
Funde a temperaturas superiores de
90C pero al enfriar permanece lquido
hasta una temperatura de 40C.
Es un extracto seco, obtenido de algas
rojas, principalmente de las especies
Gelidium.
10-15 g de agar/L. preparacin de
medios slidos

Componentes:
Indicadores de pH
Se utilizan para detectar cambios
metablicos.
Detectan la produccin de cido a
partir de hidratos de carbono contenidos
en el medio.
Detectan hidrlisis de aminocidos o
substratos especficos.
Rojo de fenol, Azul de bromotimol y
Rojo Neutro

Componentes:
Indicadores redox.

Reacciones de reduccin.
Indican la presencia ausencia de
oxgeno.
Azul de metileno y resazurina.

Componentes:

Colorantes
Inhibir crecimiento de algunas
bacterias.
Cristal violeta, verde de metilo.

Componentes:
Antibiticos
Inhibir crecimiento de algunas
bacterias.
Antibiticos termoestables.
Cloranfenicol, Cicloheximida y
sulfamidas.

Componentes:
Otras sustancias
Cloruro y citrato sdico, sales biliares y
selenito de sodio.

Seleccin

microorganismos.

diferenciacin

de

Componentes:
Otras sustancias que favorecen el
crecimiento de microorganismos exigentes.
Lquidos corporales de animales:
Sangre: carnero, conejo, caballo
Suero de caballo

Criterios para la seleccin

de los medios de cultivo
para el procesamiento de
las muestras.

Medios de cultivo.
El aislamiento y la identificacin de
m.o.

medio de cultivo.

Muestra:
coleccin
transporte
almacenamiento
preparacin.

Medios de cultivo.
Medios de transporte.
Medios de aislamiento.
Medios de identificacin.
Medios para pruebas de suceptibilidad.

Aislamiento.
Medios de de cultivo primarios.
Medios selectivos.
Medios diferenciales.
Medios enriquecidos.
Medios especiales.

Identificacin.
Medios selectivos / diferenciales.
Medios / pruebas bioqumicas.

Pruebas de suceptibilidad.

Agar Mueller Hinton.

Agar Mueller Hinton / sangre.
Agar HTM.
Agar gelosa chocolate.

Almacenamiento de medios
de cultivo.

Medios de cultivo.
Deshidratados.
Preparados:
Caseros
Comerciales
Tipo:
Agar
Caldo

Medios de cultivo
deshidratados
Higroscpicos.
Lbiles:
Humedad
Luz
Calor

Medios deshidratados

rea fresca y obscura.

Anotar la fecha en que se abre
Checar la fecha de caducidad

Medios deshidratados

No abrir otro frasco del mismo medio

hasta que se termine el medio modifique
sus caractersticas.
No guardar en refrigeracin, a menos que
se indique.

Medios preparados
Refrigeracin 2 - 8 C.
rea obscura.
Tubos:
Tapn de rosca.
Caducidad 6 semanas.

Almacenamiento de
medios preparados.
reas refrigeradas limpias y ordenadas.
Registrar la temperatura del equipo
(2-8 C).

Los

acuerdo

productos
con

las

deben
prcticas

entradas / primeras salidas.

utilizarse
de

de

primeras

Almacenamiento de
medios preparados.
Una vez abierto el empaque individual, es
recomendable se utilice en su totalidad; de
lo

contario,

mantener

en

refrigeracin

mximo 24 horas.
Realizar registros de almacenamiento
que incluyan un sistema de localizacin de
los productos.

Almacenamiento de
medios preparados.
Los registros deben incluir la siguiente
informacin:
Nombre del producto.
Marca comercial.
Fecha de recepcin.
Nmero de lote.
Caducidad.

Almacenamiento de
medios preparados.
No utilizar:

Placas con medios deshidratados con

exceso de agua de condensacin.
Tubos / medio lquido con exceso de agua
de condensacin.

Control de calidad de
medios preparados
caseros y comerciales.

Control de calidad
medios caseros.
Control de esterilidad.
Control microbiolgico.
Control de caducidad.

Control de esterilidad.
5% del lote preparado.
Bacterias:
48 horas.
35C.
Hongos:
5 das.
Temperatura ambiente

Control microbiolgico.
2 microorganismos control.
Medio selectivo:
Crecimiento.
Suprimir crecimiento.

Control microbiolgico.
Medio diferencial:
Control positivo.
Control negativo.
Pruebas bioqumicas:
Medio de cultivo.
Reactivos.

Control de caducidad.
Rotular cada placa.
Nombre del medio de cultivo.
Fecha de preparacin.
10 12 semanas. **

**Medio de cultivo.

Control de calidad.

Cepas control.
Cepas silvestres.
Muestras clnicas.

Control de calidad.
Suspensin bacteriana 0.5 Mc Farland.
Capacidad nutritiva:
1:100.
10 L o asa calibarada 0.01 mL.

Control de calidad.

Suspensin bacteriana 0.5 Mc Farland.

Capacidad inhibitoria / selectivo.
1:10
10 L o asa calibrada 0.01 mL.

Control de calidad.

Tiempo de incubacin:
18 a 24 horas a 35C.
Agar chocolate 5 a 10% CO2.
Anaerobios 48 horas.
Agar campylobacter 42C / 48 Horas.

Control de calidad.
Contaminacin:
Superficial.
Interna.
Agua de condensacin.
Recuperacin de microorganismo.
No inhibe los microorganismos
esperados.

Control de calidad.
Partculas extraas en el medio.
Hemlisis.
Deshidratacin.
Volmen inadecuado.
Homogeneizacin adecuada.

Control de calidad.
Placas rotas.
Huellas sobre la superficie.
Presencia de burbujas sobre la superficie.
Baja fuerza de gel.