Pruebas

Inmunolgicas en
Enfermedades
infecciosas
Dr. Carlos Daz Olachea
2005

Pruebas Inmunolgicas
en Enfermedades
infecciosas
Termino aplicado en Patologa Clnica a la
metodologa empleada en la deteccin de
enfermedades infecciosas pueden ser:
Deteccin de Antgenos directos
Deteccin de la respuesta inmune
(Anticuerpos clulas sensibilizadas) del
husped al antgeno especfico
Deteccin indirecta de respuesta inmune a
otros antgenos( Reaccin cruzada)

Pruebas Inmunolgicas en
Enfermedades infecciosas

Se describen ejemplos ms frecuentes:

ASLO
Diagnstico de EBV
Reacciones Febriles
Rotavirus
H. Pylori
Otras que se discutirn en la seccin especifica del programa
son:
Infecciones virales exantemticas
Hepatitis viral
TB
Hongos
Etc.

Antiestreptolisinas O
(ASLO)
Son anticuerpos contra estreptococo beta hemoltico
del grupo A
Indican solo exposicin al Estreptococo beta
hemoltico del gpo. A
Aparece a la semana de infeccin, pico mximo a las
3 semanas
Utilidad clnica asociada a complicaciones
secundarias del estreptococo como Escarlatina, F.
Reumtica, Glomrulo nefritis, Endocarditis
bacteriana.
NO es especfico

Antiestreptolisinas O
(ASLO)
tcnica:

Inhibicin de la hemoaglutinacin
Aglutinacin ltex
Valores de referencia:
Adultos
< 160 U/ml Todd
< de 2 aos
< 50
de 2 a 4 aos
< 160
de 4 a 12 aos
entre 160 300

Alterados por esteroides, uso de antibiticos y

beta lipoprotena
Substituida por pruebas rpidas

EBV
Manifestacin clnica primaria: Faringitis y Linfocitosis,
Esplenomegalia Hepatitis y Fiebre prolongada.
Normalmente en < de 10 aos, subclnica
Adolescencia MI (Fiebre glandular) 4-7 semanas de
incubacin, inicio insidioso, fiebre fluctuante, faringitis,
linfadenopata y hepato esplenomegalia.
Dura varias semanas, raro meses.
90% de adulto tienen Acs. Contra el
Reactivacin:
Eliminacin de virus en saliva
Linfoproliferacin B
Inmunosupresin y linfoproliferacin
Neumonitis y afectacin de SNC es raro.

BV Infeccin Latente
LCT

Replicacin

L NK
En inmunodepresin aparece:
Mononucleosis Infecciosa
Linfomas tipo Hodking,
Linfomas Inmunoblasticos
Linfomas Burkitts
CUCI
Etc.

EBV Diagnstico
Cuadro Clnico de presentacin
Citometria hematica con linfocitosis atpicos > 30%,
neutropenia y trombocitopenia ocasional
Enzimas hepticas elevadas
Acs. Heterofilos (monotest, mospot)
Acs. Que dan reaccin cruzada co GR de carnero y caballo.
Especificidad de 95%
Positiva en : 30% nios < 2 aos y > 2 a 4 aos 90% .
Japoneses negativa
Falsos positivos en Linfoma y enfermedades autoinmunes.

Ttulos de Acs. Especficos IgM

PCR

EBV Diagnstico
Componentes virales:
Antigeno del capside (VCA) IgG e IgM (+) en enfermedad
temprana
Antigeno temprano (EA) (+) en enfermedad temprana y
convalecencia
Antigeno nuclear (NA) (+) en convalecencia y reactivacin
crnica

El VCA es producido por linfos B infectados se

encuentra en citoplasma, el IgM se encuentra a las 4
7 das de infeccin a conc. Bajas desaparece a los 2
meses
Ideal PCR carga viral

Las Reacciones Febriles

Pruebas de laboratorio

Grupo de pruebas de aglutinacin de

antgenos bacterianos por anticuerpos
presentes en el suero de pacientes con
enfermedades infecciosas no relacionadas.
Reaccin de Widal
Reaccin de Hudleson
Reaccin de Weil Felix
Tularemia

Reacciones Febriles
Metodologa
Uso de suspensiones de bacterias tratadas (atenuadas)
previamente identificadas.
Suero de paciente
Placas tubos
Observacin de aglutinacin

Actualmente se agrega a algunas un medio de

identificacin macroscpica como el Rosa de Bengala

Reaccin de Widal
Diseadas para infecciones por Salmonella
S. Tiphy
S. Enteritidis
Antgenos
Tifico O Somtico
Tifico H
Flagelar
Vi
Paratifico A
Paratifico B
Antgeno C
Antgeno E
Sin embargo todos los antgenos dan reacciones cruzadas
en zonas endemicas.

Interpretacin
Ttulos de Tifico O de 1:160 mayores
Ttulos de Tifico O, H, Paratifico A B que
aumenten 3-4 veces el valor inicial en 2
ms determinaciones en el transcurso de la
enfermedad, en zonas endmicas.
Zona NO endmica cualquier ttulo es
positivo.

Reaccin de Widal
Falsas positivas
Inmunizacin previa con
vacuna tifoidica
Hepatitis aguda y crnica
Endocarditis
estreptococcica
Brucelosis
Infeccin por bacterias
Gram negativas
Salmonelosis

Falsas Negativas
Falta de respuesta
inmune en el 30% de
los casos
Uso de antibiticos que
inhibe la respuesta
inmune
Tiempo inadecuado
para la determinacin
(lo ms frecuente)
falta de estandarizacin
comercial de los
antgenos.
Error de laboratorio
( fenmeno de Zona)

Reaccin de Widal
Conclusiones

No substituye los cultivos

No es especfica
No estandarizada
Difcil interpretacin
La negatividad no descarta la
enfermedad

Reaccin de Hudleson
Despus del cultivo son las pruebas ms
especficas para el diagnstico de
Brucelosis.
De las reacciones febriles son las ms tiles
y confiables

Reaccin de Hudleson
Se utiliza una suspensin de Brucella
Abortus para la investigacin en suero del
paciente anticuerpos contra las tres especies
comunes de Brucella: Suis , Mellitensis y
Abortus.
Mtodos usados son: Aglutinacin en placa,
tubo, IEA, ELISA.

Reaccin de Hudleson
Interpretacin
Ttulos de 1:160 mayores son diagnsticos en
zonas endmicas
Para Banco de sangre en donadores sanguneos
cualquier ttulo es positivo.
Los ttulos ascendern en 2 ms determinaciones
durante la enfermedad.
Un resultado negativo no descarta el diagnstico.

Reaccin de Hudleson
Los anticuerpos aparecen en relacin a la
bacteremia y alcanzan ttulos altos (miles)
Al alcanzar el nivel mximo puede ocurrir:
Disminucin gradual con desaparicin en 6 meses a un
ao.
Normalizarse y luego ascender
Producir espigas intermitentes sin normalizacin
Negativizarse por bloqueo (zona)

Reaccin de Hudleson
Falsas positivas

Memoria
inmunologica
Reaccin cruzada
con otras
enfermedades
Idiopatica
Error de
laboratorio

falsas negativas

Respuesta inmune
inadecuada (30%)
Fenmeno de zona
Anticuerpos
bloqueadores
Uso de antibiticos
Defectos tcnicos

Reaccin de Weil Felix

Son pruebas de aglutinacin catalogadas
como NO especficas, porque la intencin
de la prueba es la bsqueda de anticuerpos
contra ciertas cepas de bacterias del tipo
del Proteus.
La reaccin clsica utiliza cepas de Proteus
OX19, Proteus OXK, Proteus OX2.

Reaccin de Weil Felix

En las Rikettsiosis los anticuerpos
aumentan en la 2da. Semana y alcanzan su
mximo en la 3a. Y 5ta semana y
desaparecen en 1 a 2 meses.
Aumentos de los ttulos de 2 a 4 veces en 4 a
7 das de diferencia es la base del
diagnstico.
Los ttulos siempre son altos > 1000

Reaccin de Weil Felix

Falsas Positivas
Infecciones por
Proteus,
predominantes en
vas urinarias .
Reaccin cruzada
con otras
enfermedades
infecciosas y auto
inmunes.

Falsas Negativas
Falta de respuesta
Inmune
Uso de Antibiticos

Rotavirus
Norwalk virus
Afecta ms de 130 millones de nios anualmente en el
mundo y produce una mortalidad de 1 millon. (ASM News
64, 1998)
La deteccin de antigenos en heces en nios de 2 meses a
3 aos causa ms comn de diarrea ( 30-40% de las GEV).
Contaminacin oro-fecal
Solo til en periodo agudo de diarrea inicio de sntomas 4
48h.
Em Mayores de 3 aos 90% tienen Acs. IgG.
Sensibilidad 100% y VPP amplio de 57.7 93.7 %
Journal of Clinical Microbiology, December 2001, p. 4532-4534, Vol. 39, No. 12
MMWR, 3/99, Vol. 48.
Pediatric Infectious Disease Journal. 22(9):808-814, September 2003

TABLE 1. Summary of results

No. of results that were:
NP
Sensit Specif
PP
V
Test
ivity icity
V
(%
Concorda Concorda False(%)False(%)
(%)
)
ntly
ntly
negat positi
positive negative
ive
ve
EM
14
378
1
0
93.3 100.0 99. 100
0
73 .00
Pathfind
15
367
0
11 100.0 79.10 10 57.
er
0
0.0 70
rotavirus
0
Ridascre
15
377
0
1
100.0 99.73 10 93.
en
0
0.0 74
rotavirus
0

Rotavirus
Prueba ( ICG )
inmunocromatografica
Positivo

Negativo

Sensilidad 100%
Especificidad 97.3%

Helicobacter Pylori
El Helicobater pylori (H.pylori) es una bacteria microaerfila, espiroidea,
que coloniza primeramente la mucosa gastrica antral, donde produce una
inflamacin aguda y crnica denominada gastritis crnica activa.
El nicho ecolgico en los seres humanos parece estar restrigido al
estmago y al duodeno.
Fue descubierto por Marshall y Warren hace ms de 20 aos y es
reconocido como uno de los patgenos ms comunes y mdicamente ms
importantes de todo el mundo.
El Helicobacter pylori es una infeccin comn, donde el 50% de los
adultos de mediana edad han sido infectados con ella. Tiende a
propagarse entre personas que viven juntas, que comparten la comida y
los baos.
Se diagnostica por exmenes de laboratorio como: * Anlisis de sangre.
*Anlisis de aliento de urea.
*Anlisis de heces.
*Endoscopa.

Helicobacter Pylori
Despus de infectarse con H.pylori la mayora de las
personas desarrolla gastritis, una inflamacin del
revestimiento del estmago. Sin embargo la mayora de las
personas nunca tienen sntomas o problemas relacionados
con la infeccin, cuando los sntomas estan presentes
pueden incluir:
Dolor sordo
Prdida de peso.
Prdida de apetito.
Pesadez de estmago.
Eructos.
Nuseas.
Vmitos

Pruebas inmunocromatografica
para Suero y heces

Pruebas inmunocromatografica
para Suero y heces

Pruebas inmunocromatografica
para Suero y heces

HELICOBACTER PYLORI EN
ALIENTO
Principio de la prueba
Consiste en administrar al paciente una cpsula conteniendo
urea marcada con Carbono (C 14) 14; en presencia de H. pylori
la urea marcada se convierte en amonio e in de bicarbonato,
el cual lleva el carbono marcado. Ms tarde pasa la circulacin
y es excretada a travs de los pulmones.
La prueba de aliento con urea implica le recoleccin de una
muestra de aliento 15 minutos despus de beber una solucin
con C 14. si H. pylori est presente, su enzima ureasa
hidrolizar la urea en CO2, que finalmente ser excretada en el
aliento. Pueden presentarse resultados negativos falsos si la
prueba se hace dentro de la semana siguiente de haber tomado
inhibridos de bomba de protones, bismuto o antibiticos, o
despus de una ciruga gstrica.

Comparacin de
mtodos
Espcime
n

Sensibilid
ad
%

Especificid
ad %

Heces

94.87

95.33

69.81 99.39 10.20

Suero

50

82.96

13.88 96.79 5.2

93.42

16.6

Aliento 9.09

VPP
%

VPN
%

Prevalenci
a
%

87.65 12.64

En Lab del HSJ-2005

Evaluacin de Artritis
Pcr VSG
Factor Reumatoide
Tipo de HLA
ANA
Pruebas para LES
Anti DNA y Sm
Complemento
Citometra Hematica
Qumica sanguinea

Artritis Reumatoide
La AR se caracteriza por ser
crnica, bilateral y simtrica,
erosin articular y periarticular,
ndulos subcutneos, vasculitis.
Asociacin con DR4 y DR1
Marcadores:

Factor reumatoide
Anticuerpo antiqueratina
Factor antiperinuclear
Anticuerpos asociados a antgeno
nuclear (RANA)
Anti RA33

Artritis Reumatoide
Inflamacin de tres ms articulaciones pos > 6
semanas
Inflamacin de muecas, cadera rodillas por > 6
semanas
Dolor e inflamacin matutina por una hora y por
>6 semanas
Cambios en manos y radiografas de AR ( erosin
y descalcificacin )
Ndulos reumatoides
Factor reumatoide positivo ( normal en 5 %)
Se requieren al menos 4 criterios.

Arnett et.al. Arth. Rheum 30:S17, 1987)

Artritis Reumatoide
Factor reumatoide (FR):

Ig tipo IgM(IgA IgG) anti fraccin Fc de

la IgG.
Deteccin por aglutinacin, Elisa,
Nefelometra.
FR se asemeja la protena A de
estafilococo aureus
Positivo en
50-90% de AR
75% de SS
60% MCTD
35% LES

Positivo

Negativo

Factor reumatoide por aglutinacin