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ANALISIS DE ALIMENTOS

LUIS ARTICA MALLQUI

Determinacin
de aminocidos
por
cromatografa de
capa fina

INTRODUCCION
El progreso de la ciencia en general y el
de la qumica en particular se acelera por
medio de la postulacin de hiptesis y de
teoras as como tambin mediante el
descubrimiento de nuevas sustancias o
reacciones y la innovacin de aparatos y
tcnicas de trabajo pertenecen a la
cromatografa.

MARCO TEORICO

HISTORIA
Mikhail Tswett (botnico ruso), Padre de la
cromatografa
Martin y Synge (l94l) mediante la
extraccin continua a contracorriente con
columnas de gel de slice, lograron separar
por reparto en la fase acuosa inmvil, los
componentes de una mezcla se aminocidos.

DEFINICION
Del griego:
chroma=color
graphos=escritura
Procedimiento fisicoqumico fundado en la
separacin de los componentes de una mezcla,
por
migracin
diferencial
de
solutos
transportados por una fase mvil, retenido por
una fase estacionaria

IMPORTANCIA
La CCf se haya convertido en un
elemento de trabajo indispensable en el
laboratorio moderno, tiene como principales
causas:Ahorro de tiempo, simplicidad de
sus mtodos, en comparacin con los
tradicionales.

PRINCIPIO
Basado en el principio de adsorcin, en el
equilibrio de acciones ejercidas por:
A.- La diferente adsorcin molecular entre el solvente
pulverizado (p.e. Silicagel) y las diferentes sustancias
a separar
B.- La accin de desplazamiento ejercida por el
eluyente sobre la sustancia adsorbida en el solvente
que depende de la polaridad del eluyente o fase mvil

PROCESO DE ADSORCION
La muestra aplicada en la capa es
adsorbida en la superficie del material por la
accin de fuerzas electrostticas. Luego , la
capa es expuesta a un flujo por accin capilar,
se inicia una competencia de enlaces entre los
sitios activos del adsorvente y la substancia
con el solvente

ADSORBENTES
Slica gel (80% de las separaciones)
Oxido de aluminio o Almina(cida, neutra
o bsica)
Tierra Silcea o Kieselguhr
Celulosa(Nativa o micro-cristalina)
poliamidas

DISOLVENTES EN LA CCF

Hexano
Tetracloruro de carbono
Benceno
Cloroformo
Eter etlico
Etanol
Metanol
Agua, etc.

TECNICA DE
DESARROLLO

PREPARACIN DE PLACAS

REALIZACION Y EXAMEN DE
LOS
CROMATOGRAMAS

APLICACIN DE LA MUESTRA

DETECCION O VISUALIZACION
(REVELADO)

EVALUACION DE LA CCF

ANALISIS CUALITATIVO:
.Medida de Rf

ANALISIS CUANTITATIVO
Densitometra
Espectrofotometra

APLICACIONES,
CONCLUSIONES Y
RECOMENDACIONES

APLICACIONES
En la separacin de aminocidos:
Arginina
Histidina
Lisina

CONCLUSIONES
Buena separacin de sustancias hidrofbicas e
hidroflicas
Requiere aplicacin especial del adsorvente
Muy til para seguir el progreso de una reaccin o
separacin de aminocidos.
Los aminocidos incoloros pueden ser separados e
identificados por CCF mediante el uso de un
revelador que los transforma en manchas de color
sobre la placa

RECOMENDACIONES
Evitar la inhalacin a el contacto con los agentes
cromgenos ya que la mayora son txicos y corrosivos
LA distribucin de la slica gel debe ser homognea en la
placa.
Las manchas deben tener de 1 a 3mm de dimetro y estos
separados por 1 a 2 cm
Lavarse las manos antes de tocar la placa porque los
aminocidos se encuentran en la transpiracin