PRUEBAS BIOQUMICAS

PARA LA IDENTIFICACIN DE
Staphylococcus
Janet Salazar L
Bacteriloga
IUCMde A

1.catalasa:

Enzima catalasa, desdobla el perxido de

hidrogeno en agua y oxigeno
**desprendimiento de burbujas
Catalasa positivo: catalasa negativo:
Staphylococcus Streptococcus
Micrococcus Enterococcus
Planococcus Aerococcus
Stomacoccus Planococcus

Diferencia los
gneros:
Streptococcus (-) de
Micrococcus (+) y/o
Staphylococcus (+).

2. Coagulasa:
Enzima que estimula la conversion del fibrinogeno
en fibrina, comprueba la facultad de un MO de
coagular el plasma por accion de esta enzima
Coagulasa tubo: coagulasa libre: detectala
produccion de la enzima estafilocoagulasa
Coagulasa placa: detecta la produccion de una
proteina localizada en gran parte del Staphylococo

** recomendado plasma de
conejo con EDTA , no se debe
usar el plasma citratato por que
los Mos que pueden usar citrato
ej especies de Enterococcus
produciran resultados positivos
confundiendose con
staphylococcus
El plasma humano puede
contener anticuerpos
antiestafilococicos (material
vencido de bancos de sangre)

La prueba de la
coagulasa es
usada
especficamente
para diferenciar
las especies del
genero
staphylococccu

s:
S. aureus

Positiva

S. epidermidis

Negativa

**Diagnostico Microbiologico de Koneman 2008 pag 614

Placa: Una prueba positiva, usualmente ocurre entre 5-20 segundos.

La prueba
negativa
si la aglutinacin no ocurre dentro de 3-4 minutos.
Una prueba
positiva,
usualmente
ocurre entre 5-20 segundos.
La prueba negativa si la
aglutinacin no ocurre dentro de 3-4
minutos.
Tubo:
interpretacin
prueba positiva
coagulo completo
coagulo parcial, el coagulo no
abarca completamente la columna
del fluido.
prueba negativa:
no hay formacin de coagulo, la
suspensin permanece homognea

3. Oxidasa
Determinar la presencia de enzimas oxidasa
La reaccin de la oxidasa se debe a la presencia
de un sistema citocromooxidasa que activa la
oxidacin del citocromo que es reducido por el
oxgeno molecular que produce agua o perxido
de hidrgeno segn la especie bacteriana

Diferenciar los Staphylococcus de

Micrococcus:
Staphylococcus catalasa + oxidasaAerococcus
Stomacoccus
Micrococcus Catalasa + oxidasa+
Nota: los Staphylococcus mediante la prueba de
oxidasa y resistencia a la furazolidona

Prueba oxidasa

4. Prueba de resistencia a la Bacitracina:

Staphylococcus ( R) resistente a la bacitracina
Micrococcus y stomacoccus (S) sensibles a la
bacitracina

5. Prueba de resistencia a la furazolidona:

Micrococcus (r) a la FX ( halo 6-9 mm)
Staphylococcus (S) a FX halo >=15 mm

6. Prueba de la novobiocina
Staphylococcus saprophyticus:
(R )
Halo 6-12 mm
Otros Staphylococcus y S.
aureus: ( S)
Halo >=16 mm

7. manitol
La degradacion del Manitol
(carbohidrato) hace cambiar
de color al indicador Rojo de
Fenol a amarillo indicando la
acidificacion del medio
Manitol ( +) S. aureus
Manitol ( )S. epidermidis

Crecimiento en Agar manitol sal

Izquierda bacteria manitol negativo y
derecha manitol positivo

8. Agar DNAsa
para determinar actividad de
desoxirribonucleasa el cual es visualizado
agregando HCL 0.1
los que degradan DNA se observara
transparencia alrededor de la siembra y los que
no degradan DNA no se observara
transparencia la siembra debe ser puntos de
inoculacion de aproximadamente 5mm de
diametro
Util para S. aureus: DNAsa : positiva
hay otros estafilococos que dan reacciones

9. urea
Medio utilizado para diferenciar
microorganismos en base a la
actividad uresica
Se utiliza para estafilococos
Negativa/ positiva

IDENTIFICACIN DE LAS ESPECIES DE

STAPHYLOCOCCUS
COAGULASA NEGATIVO

Identifi
caci
n de
las
especi
es de
Staphy
lococc
us
coagul
asa
negativ
o
P
ESPEC
Y
IE
R
S.
capitis
S.
cohnii
S.
epider midis
S.homi
nis
S.

C
B P
Ure M Sac
Nov
oa
a ol
a an a
o3
1
2
g
c i
-

S S

-/ +/
+d +d

V S

S R

+ -/+ +L S S

SS

Diferenciacion de cocos coagulasa negativo,

PYR negativo, Novobiocina resistente
Diferenciaci
n de
cocos
coagulasa
negativo,
PYR
negativo,
Novobiocin
a resistente
ESPECIE Ure Oxi Fos Acido
asa da -Alc trealosa
sa
S.
+
+
saprophyticu
s
S. cohnii
+
subs cohnii
S. cohnii
+
+
+
subs.urealyti
cum
S. sciuri
+
+
+
subs.sciuri
S. hominis
+
subs.novobi

S. aureus:
Coco Gram positivo que se agrupa en

racimos
Catalasa positivo
Coagulasa positivo tanto en lamina como

en tubo
Oxidasa negativo
Fermenta el Manitol

Api Staph
Sistema estandarizado de
identificacion de los generos
Staphylococcus
Micrococcus
Kocuria
incluye test bioquimicos
estandarizados y miniaturados y
una base de datos especifica

identificacin
se obtiene a partir del perfil numrico
Determinacin del perfil numrico:
En la hoja de resultados, los tests estn separados
en grupos de 3 y se asigna para cada uno un valor
1, 2 4. Sumando en el interior de cada grupo los
nmeros
que corresponden a reacciones positivas, se
obtienen 7cifras que constituyen el perfil numrico.

identificacin:
Se realiza a partir de la base de datos
* Con la ayuda del Catlogo Analtico:
- Localizar el perfil numrico en la lista de los
perfiles.
* Por medio del software de identificacin apiweb
TM :
- Introducir manualmente por teclado el perfil
numrico de 7 cifras.
6 706 113 Staphylococcus epidermidis