Alumno:

Jos Pedromiguel Calle Angulo

Definiciones
Urocultivo:

Es el
anlisis que se le
realiza a la orina para
detectar
con
exactitud y presin
cual es el agente
microbiano que esta
causando
una
infeccin
en
un
organismo.

Principios generales
La muestra ideal es la de la maana debido a que la cuenta

bacteriana es mayor.
Se requiere de 3 a 5ml de orina en un frasco estril, tambin se
puede obtener mediante una sonda uretral, suprapbica o
permanencia.
La muestras para urocultivo no se toman de bolsas recolectoras
de orina que forman parte de un sistema de drenaje a travs de
una sonda.
Se lleva la muestra al laboratorio y se examina lo ms pronto
posible, de no ser as, la orina se puede refrigerar hasta dos
horas antes de someterla a cultivo.
Para establecer bacteriuria, se toman 2 muestras de chorro
medio.
Las muestras deben de obtenerse antes de la administracin de
cualquier antibitico.
El personal de salud debe instruir al paciente respecto a la
tcnica adecuada para recolectar la muestra.

Coleccin de muestras

Catter

Puncin suprapbica

Recepcin de la muestra
Las muestras deben venir

acompaadas de su respectiva hoja

de pedido donde deben llenarse todos
los datos solicitados por el laboratorio:
Nombre y Apellido completo
N de Historia Clnica
edad
sexo
servicio y cama
tipo de muestra: catter, suprapbica,
etc.
recibi antibiticos en los ltimos 7
das, si es as anotar nombre del ATB y
dosis
control o sospecha de algn germen
anterior

Rechazo de la muestra
Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los

requisitos mnimos indispensables para su correcto

procesamiento el laboratorio deber rechazarlas,
algunos de los criterios a tomar en cuenta son:
Muestras que no evidencian ser refrigeradas + de 2
horas de coleccin.
Rechazar orinas de ms de 24 horas colectadas.
Rechazar muestras de Sonda foley.
Rechazar la orina de la bolsa de un paciente con
catter.
Si ha sido inadecuadamente colectada, transportada
y manipulada la muestra no debe ser recepcionada.

Microorganismos
observados

Organismos que son uropatgenos reconocidos y crecen bien en medios de

rutina en 24 hrs: Estos incluyen E.coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, y

Pseudomona aeruginosa. Estos patgenos constituyen la causa del 80% de los bacilos
gram negativos aislados. Enterobacter y Citrobacter son tambin comnmente
aislados. Enterococcus, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus y
Streptococcus agalactiae son los gram positivos ms frecuentemente aislados.

Organismos que son uropatgenos reconocidos y no crecen en medios de

rutina: Mycobacterium tuberculosis, Chlamidia trachomatis, Neisseriae gonorrhoeae
se desarrollla.

Organismos que pueden ser uropatgenos, pueden requerir medios

especiales y ms de 24 hrs: Corynebacterium urealyticum, Corynebacterium
seminale stos se desarrollan en A.Sangre CNA.; Haemophylus influenzae, H.
parainfluenzae, estos de desarrollan en A. chocolate Gardenella vaginalis en altos
recuentos se ha asociado a UTI ste se desarrolla en Human Blood Agar. Todos estos
medios especiales deben incubarse por 48 hrs. En CO2.

Organismos que no son uropatgenos pero pueden aislarse de uretra y

orina: Gran variedad de grmenes colonizan la uretra y el rea genitourinaria, estos
incluyen anaerobios, Actinomyces spp, Lactobacillus, Streptococcos alfa-hemolticos,
Staphylococcos coag-negativa, y pequeos nmeros de gram negativos.

Mtodos
Mtodo de conteo en placa o recuento de colonias

(Mtodo de Kass):

Se homogeniza la muestra mediante agitacin.

Se diluye la muestra al 1:100, colocando 0.1ml de orina en

9.9ml de caldo tripticasa o de suero fisiolgico estril.

Se preparan diluciones de 1:1000 y 1:10 000 a partir de la
dilucin 1:100.
Se deposita 1ml de cada dilucin en placas petri estriles que
contienen agar Tripticasa o medio CLED, Mediante rotacin
suave se favorece la distribucin homognea de la siembra.
Se incuban todas las muestras a 370C de 24 a 48 horas.
Para calcular el nmero de colonias se eligen las placas que
contengan de 30 a 300 colonias. Contadas estas basta
multiplicar su nmero por la dilucin respectiva para obtener la
cuenta total.

 Mtodo

del
asa
calibrada: Esta estimacin
cuantitativa consiste en
sembrar una placa con
medio de agar sangre o
medio
CLED
en
una
muestra de orina, sin
centrifugar, empleando un
asa de platino calibrada
(4mm.
De
dimetro).
Despus de incubar las
muestras a 370C durante
24 a 48 horas, se cuenta el
nmero
de
colonias
desarrolladas y el resultado
se multiplica por 100, ya
que el asa de platino
contiene 0.01ml de orina.

Procedimiento

Inoculacin
Usar

el

asa
calibrada, flamear,
dejar
enfriar,
mantener
en
posicin
vertical
introducir solo el
aro
debajo
del
nivel de la orina
previa mezcla de la
orina sin centrifugar.

Mtodo para introducir el

asa calibrada

Estriar en la placas de cultivo de la siguiente

manera:
Estriar de arriba hacia el centro de la placa y estriar la orina

en una serie de pasos de ngulo de 90 a travs del inculo

Sin flamear el asa estriar

atravesndola lnea del inoculo
en el sentido de las flechas.
Incubacin
Una vez sembradas las placas deben
incubarse durante 24 horas a 35 - 37
C.

Lectura
Los resultados del estudio cuantitativo se reportan de la siguiente

manera:

No hubo desarrollo bacteriano.

Menos de 10 000 colonias por ml.
Entre 10 000 y 100 000 colonias por ml.
Ms de 100 000 colonias por ml.
Cuando se obtienen dos recuentos sucesivos con ms de 100 000

colonias por ml., la probabilidad de infeccin es del 80%, cifra que

se eleva a 95% si el mismo resultado se obtiene en 3 recuentos
sucesivos.

Por lo general las muestran contaminadas tienden a mostrar

cuentas inferiores a 10 000 colonias por ml, cuando el recuento

revela valores intermedios, entre 10 000 y 100 000 colonias por ml,
el examen debe repetirse.

Mtodos cualitativos
Se usan para identificar que microorganismo

es el causante de la enfermedad. Se usan

medios de cultivo tanto enriquecidos como
selectivos.