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Espectro de Radiao
Eletromagntica
Curto
Energia
Comprimento de
onda ()
Longo
Energia
NO APRESENTAM MOMENTO
GULAR
12 ASSOCIADO
16
NO EXIBEM PROPRIEDADES
GNTICAS
6
8
C O
AUSNCIA 32
DE SINAIS DETECTVEIS
R RMN
O SO APLICVEIS
ANLISES DE
16
N
H
13
6
C
Spi
Princpio
No Espectro de
RMN
Campo
baixo
Campo
alto
RMN
Onda pulsada
Onda
Principal vantagem: alta razo sinal/rudo para um mesmo
pulsada
tempo de medida
RMN no Domnio de Tempo (RMN-DT)
Utilizam ms permanentes de baixo campo
magntico (<60 MHz) e menos homogneos
Baixa resoluo
Intensidade x Tempo
RMN com Transformada de Fourier (RMNTF)
Utilizam ms oscilantes de alto campo
magntico
(>100 MHz), mais homogneos e estveis.
Alta resoluo
Interface LC-RMN
Dissoluo do
composto em
solvente delterado
Equipamento
de RMN
Tubo de RMN
(5mm)
Modo de Operao:
Continuous - Flow
Pr-requisitos
Instrumentao do HPLC;
Instrumentao da RMN;
Sonda de fluxo contnuo;
Vlvula instalada antes da sonda para registrar tanto o espectro no
modo stopped-flow quanto continuous flow.
Uso de solventes deuterados j na fase de separao por HPLC
LC-RMN
Tcnica hifenada;
Fornece informaes estruturais da molcula;
Tcnica com baixa sensibilidade;
Alto custo;
Condies de fase reversa
Mtodos de supresso de
solvente
Cuidados gerais
Amostras devem ser solveis em solventes deuterados
Ex. CDCl3,DMSO-d6,MeOH-d4,MeCN-d3,acetona-d6,benzeno-d6,D2O.
Quantidade ideal de amostra
RMN de H 5-10 mg
(amostras muito concentradas alargam as linhas do espectro)
Observaes:
As amostras devem ser filtradas, pois a presena de partculas insolveis pode
prejudicar o ajuste de homogeneidade do campo magntico.
Transferir a soluo para um tudo de RMN de 5 mm limpo, seco e isento de
trincas.
Aps a anlise, a amostra deve ser imediatamente retirada do tubo de RMN, pois
ela poder ficar parcialmente impregnada em sua parede, tornando com o tempo
inadequado para anlise de RMN.
Condies Cromatogrficas
- Coluna C18 250 mm x 4,6 mm
- Fase mvel : D2O com 1% cido Triclorofluoractico 80:20
Acetonitrila
- Fluxo 1 mL/min
- UV 254 nm
- HPLC acoplado a RMN stopped-flow
- Amostra um extrato metanlico diludo em D2O
Standard
20-hydroxyecdysone
2-deoxy-20-hydroxyecdysone
Resultado Cromatogrfico
(B) 2-deoxy-20hydroxyecdysone
(C) 2-deoxyecdysone
Estruturas Qumicas
(A) 20hydroxyecdysone
B) 2-deoxy-20hydroxyecdysone
(C) 2-deoxyecdysone
Concluso
Estes resultados demonstram claramente que
o HPLC-RMN eficientemente utilizvel para
a identificao dos ecdisterides presentes
neste extrato parcialmente purificado atravs
da
separao
realizada
no
HPLC
de Silene otite.
Referncias
ALBERT, KLAUS. Liquid chromatography-nuclear magnetic resonance
spectroscopy. Jounal of Chromatography A, v. 856, p. 199-211, 1999.
LUZYANIN, K.; ABRANTES, M. Ressonncia Magntica Nuclear - Ferramenta verstil
em Qumica Farmacutica e Imagiologia Mdica. Qumica, v. 117, p. 25-20, 2010.
PATEL, K. N.; PATEL, J. K.; PATEL, M. P. RAJPUT, G. C.; PATEL, H.Introduction to
hyphenated techniques and their application in pharmacy. Pharmaceutical
Methods., v. 1, n. 1, p. 2-13, 2010.
SARKER, S. D.; NAHAR, L. Hyphenated Techiques. In: SARKER, S. D.; LATIF, Z.;
GRAY, A.Natural Products Isolation.2. ed. Totowa, New Jersey: Humana Press Inc.,
2006, p.240-244.
SNYDER, L. R.; KIRKLAND, J. J.; DOLAN, J. W. Introduction Modern Liquid
Chromatography. 3.ed.Hoboken, New Jersey.John Wiley & Sons, Inc., 2010, p.192193.
TOKUNAGA, T; OKAMOTO, M. Recent Progress in LC-NMR.Sumitomo Kagaku, v.2, p.
1-10 2010.
WILSON, I. D.; MORGAN, E. D.; LAFONT, R.; WRIGHT, B. Hight-performance liquid
chromatography coupled to nuclear magnetic resonance spectroscopy: Application
to the ecdysteroids of Silene Oyite. Journal of Chromatography A, v. 799, p. 333336, 1998.