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v V max
S>>>Km
10 veces la Km
E01 V max 1
E02 V max 2
Km S
dS
S
V max V max
dt
S
dS
S
V max
dt
Km
v V max
Km S
S<<<<Km
A concentraciones 1/10 Km
dt
So S
0
Km
V max
ln St ln So
t
Km
So V max
ln
t
Obtener el valor de Vmax/Km
St
Km
St
St So e
V max
t
Km
v V max
S Km
1 So
ln
t St
1 So V max
1 ( So St )
ln
t St
Km
Km
t
1
m
Km
Km S
Vmax
( So St )
t
Linearizacin de la ecuacin
integrada de M-M a S Km
Vmax
v V max
[S]
v frente a [S]
Km S
1 S Km
v V max S
1
S
Km
v V max S V max S
Km
v
y
Vmax
=
Vmax
+
[S]
x
1/v
m =Km/Vmax
-Pendiente Km/Vmax
- 1/Km
-1/Km
1/Vmax
1/Vmax
1/[S]
1/v
1/[S])
1
1
Km 1
S
v V max V max S
Km
S
v
V max V max
La representacin de [S]/v frente a [S], da una recta:
S
v
Km
1
S
V max V max
y
=
b
+
m
x
- Esta representacin se conoce como representacin de
Hanes, representacin de Woolf o de Hanes-Woolf.
[S]/v
Pendiente = 1/Vmax
corta en el eje [S]/v en un punto = Km/Vmax,
corta en el eje [S] en un punto = - Km
m = tg = 1/Vmax
- Km
Km/Vmax
[S]
[S]/v
[S]
2.3.Representacin de Eadie-Hofstee.
1
1
Km 1
vV max
v V max V max S
Si multiplicamos ambos miembros de la ecuacin de inversos por v * Vmax
obtenemos,
v
v V max Km
S
y =
Vmax
m = tg = -Km
Vmax/Km
v/[S]
La representacin de v frente a v/[S] nos da una recta de:
- pendiente = -Km
- corte en el eje v = Vmax
- corte en el eje v/[S] = Vmax/Km
Aspectos Positivos
Aspectos Negativos
v/[S]
V max S
v
Km S
v Km S V max S
Km
V max
1
S
v
Reordenando,
V max Km
1
v
S
v1
-S1
Km
v2
v1
-S2
-S1
Km
v3
v2
v1
-S3 -S2
-S1
Km
(Km, Vmax)
v3
v2
v1
-S3 -S2
-S1
Km
Resumen
Estudiada la ecuacin de Michelis-Menten de acuerdo con el orden de reaccin podemos
encontrar las siguientes circunstanciasa)A concentraciones saturantes de substrato nos encontramos en el orden cero de reaccin
La comparacin de actividades enzimticas en ordn cero de reaccin puede servir para
comparar cantidades de una misma enzima en diferentes circunstancias metablicas.
b) A concentraciones de substrato menores que un dcimo de la constante de Michaelis, nos
encontramos en orden uno de reaccin.
c) A concentraciones de substrato del orden de la constante de Michaelis es posible obtener una
ecuacin a partir de la ecuacin integrada de Michaelis-Menten permite determinar graficamente
los parmetros dinticos Vmax y Km estudiando la curva del avance de una reaccin con
respecto al tiempo
La ecuacin de Michaelis-Menten es una cnica, hiprbola que pasa por el centro de coordenadas
v:S, cuya asintota paralela al eje de las abcisas representa la velocidad mxima.
Diferentes transformaciones algebricas permiten la linealizacin de la ecuacin de M-M para
una determinacin ms fcil de los parmetros Vmax y Km.
Entre estas se encuentran:
Representacin de dobles inversos o de Linenweaver-Burk.
Representacin de Hanes
Representacin de Eadie-Hofstee
Representacin lineal directa o representacin de Einsenthal y Cornish-Bowden