TCNICA HISTOLGICA

Conjunto
de
procedimientos
aplicados a un material biolgico
(animal o vegetal) con la finalidad de
prepararlo
y
conferirle
las
condiciones ptimas para poder
observar, examinar y analizar sus
componentes morfolgicos a travs
de los microscopios fotnicos y
electrnicos.

Observacin al
Estado Fresco
Procedimientos
inmediatos o
vitales

Coloracin
Intravital
Coloracin Vital
Coloracin
Supravital

Tcnica
Histolgic
a

Procedimient
os Mediatos o
Postvitales

* Toma de la muestra
* Fijacin
* Inclusin
*Microtoma
*Coloracin o Tincin
* Montaje de la muestra

PROCEDIMIENTOS MEDIATOS O
POSITIVALES

Tienen por finalidad separar

clulas,
tejidos
y
rganos
procedentes de seres en los que
los procesos vitales se han
detenido y es necesario
conservar la estructura que
tenan en vida.

FIJACIN
Detiene la vida de las clulas e
impide
futuros
procesos
autocatalticos,
manteniendo
la
estructura morfolgica sin que ocurran
cambios notables en ellos.

Inmoviliza las molculas proticas

e
inhibe
las
molculas
enzimticas
hacindolas
insolubles

Oxidantes

Reductores

Fijadores

Gaseosos

Alcohol etlico
absoluto: conserva el
glucgeno.
Bicloruro de mercurio:
Fibras colgenas
cido actico: Ncleos
Cloruro de calcio:
Lpidos

Formaldehdo

Lquidos

cido actico,
alcohol etlico y
acetona

Slidos

Cloruro de
Mercurio y
Dicromato de
Potasio

FORMOL O FORMALINA
Su accin fijadora se ejerce coagulando las
protenas.
Es un fijador que se introduce con rapidez en el
espesor de la muestra.
Fija hasta las porciones ms profundas de la
misma.
Facilita la coloracin.
Endurece bien las muestras.
Conserva las grasas.

INCLUSIN
Los tejidos fijados adquieren cierta dureza,
pero no la suficiente para obtener cortes
delgados para la observacin. Estos cortes
se consiguen cuando los tejidos se infiltran
con sustancias de inclusin
Las sustancias de inclusin tienen la propiedad de
incorporarse e infiltrarse en el interior de las
clulas y tejidos con la finalidad de servirles de
soporte, formando un bloque homogneo en
dureza y consistencia.

INCLUSIN EN PARAFINA
a) Deshidratacin: Las muestras se deshidratan
en
baos
sucesivos
de
soluciones
de
concentraciones crecientes de alcohol etlico para
eliminar el agua que contenga ya que la parafina
no es soluble en agua.
b) Aclaracin/Diafanizacin: Son solventes que
producen transparencia en los tejidos, adems de
solubilizar la parafina.
c) Inclusin y formacin del bloque de
parafina

Parafinas

Blandas

Para tejidos en los

que se detectan
antgenos

Semiduras

Para uso de
laboratorios donde
se realiza tcnica
histolgica

Duras

Se usan en
ambientes con
climas de
temperaturas altas

*La parafina diluida se coloca en dos

recipientes dentro de la estufa. El primero
recibir las muestras embebidas en xilol; la
parafina reemplazar al xilol de las muestras
y se inflitrar.
* El segundo servir para contener a las
muestras antes del proceso de formacin de
bloques.
* En el interior de la estufa debe existir otro
recipiente con parafina lquida pura, que se
emplear para la formacin de bloques.

MICROTOMA
Obtencin de cortes por medio de instrumentos
mecnicos, semiautomticos que seccionan el
bloque de parafina en cortes delgados y de
grosor uniforme.
>> Se realizan cortes sagitales en la primera
etapa para saber en que etapa del desarrollo
estn, y longitudinales para observar todas las
estructuras una vez que esta ms desarrollado el
embrin<<

TINCIN
Consiste en que una estructura celular o tisular
adquiera especficamente un color bajo la accin
de una sustancia colorante. Lo anterior se hace
con la finalidad de distinguirlas entre si y facilita
su observacin.