Fabiana Maia Santos

Maria Sandra R. Queiroz

Micro-organismos
Surpreendente capacidade de
produzir substncias qumicas
com elevada potncia biolgica.

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fonte:https://hal.arch
ives-ouvertes.f

Penicilina-Penicillium
chrysogenum (ou P. notatum)

Menivolina- Aspergillus
terreus

Ergometrina- Claviceps
purpurea

Ciclosporina A-Tolypocladium
inflatum

Cefalosporina- Cephalosporiumacremonium

Micro-organismos endofticos

Virulncia

Sanidade vegetal;
Crescimento;
Resistncia a estresses.

Mecanismos
de defesa

Substncias bioativas
isoladas de fungos
endofticos

4-HidroximeleinaPenicillium sp
e Xylaria sp.

Xylarenona C- Camarops
sp

Citocolasina DXylaria sp

Taxol Taxus
brevifolia

Importncia na agricultura

Beauveria
felina

Estrutura base
destroxinas

Strobilurus tenacellus

Metarrhizium
anisopliae

Estrobilurina G

Proteo das plantas

Substncias e esquemas que a
planta adquire para proteg-la.

Juglona

Azadiraquitina- fagorepelente

Tcnicas hifenadas dentro do

novo contexto das pesquisas com
Produtos Naturais
O termo tcnicas hifenadas refere-se ao acoplamento entre
duas ou mais tcnicas analticas com o objetivo de obter uma
ferramenta analtica mais eficiente e rpida que as tcnicas
convencionais.

Extratos vegetais

CG-MS
CLAE-MS
CLAE MS/MS
CLAE-RMN

Misturas complexas
de diferentes metablitos

Seletividade e Sensibilidade
Informao estrutural
Dirigir isolamento
Economizar tempo

CLAE - Cromatografia Lquida de Alta Eficincia

Absoro Ultravioleta (UV)

Fluorescncia
ndice de Refrao
Espalhamento de Luz Evaporativo
(Light -Scattering)
Eletroqumico

Espectrometria de Massas

Analisadores de massas requerem os ons na fase gasosa

Baseia-se na medida da razo m/z
Tipos de Fontes de Ionizao
IE- Impacto de Eltrons
IQ Ionizao Qumica
ESI Ionizao por Electrospray
APCI- Ionizao Qumica a
presso Atmosfrica
APPI Foto ionizao a presso
atmosfrica
MALDI Matrix Assisted Laser
Dessorption Ionization

Tipo de Analisadores de Massas

Quadrupolo
on-Trap
Tempo de Vo
FT- ICR

GC-MS
Substncias apolares, volteis e
termicamente estveis.

Aplicao em produtos naturais

Indstria de essncias
Exemplo: o emprego no controle analtico do leo essencial de
Cordia verbencea, empregado na produo de um antiinflamatrio
tpico disponvel no mercado brasil.
Anlise de contaminantes em plantas medicinais.
Anlise de matria-prima empregada principalmente nas
indstrias do ramo farmacutico, alimentcio e cosmtico.

CLAE-MS
Source
Source
ionization
ionization

Skimmer

Collision
Collision
Cell
Cell

Detector

HPLC

Q2 Q
Q0 Q
Q1 Q
Q3
Q
2
0
1
3
TRIPLE QUADRUPOLE
MS/MS

CLAE-MS
No Brasil, a maioria dos instrumentos de CLAE-EM possui o ESI
como fonte geradora de ons.
Por se tratar de ionizao branda (assim como outras tcnicas
correlatas), no espectro de EM so observados apenas os ons
quasi moleculares [M+H]+ e [M+Na]+ .
No primeiro analisador ocorre a seleo do on de interesse. Este
on ento introduzido na clula de coliso onde colide com um
gs inerte (argnio, nitrognio, etc) levando sua fragmentao.
O quadrupolo-quadrupolo e suas variaes, o quadrupolo/tempo de
vo (Q-ToF) e o quadrupolo-ressonncia ciclotrnica de ons com
transformada de Fourier (FT-ICR) so alguns exemplos de
analisadores acoplados empregados no estudo de Produtos
Naturais.
O maior desenvolvimento e emprego das tcnicas de ionizao de
MALDI (ionizao por dessoro a laser com auxlio de matriz) e ESI
(ionizao por electrospray) no incio dos anos 90 possibilitou a
anlise de molculas termolbeis, complexos organo-metlicos e
molculas de elevada massa molecular incluindo polmeros e
protenas.

CLAE-RMN
O ncleo de certos elementos e istopos comportam-se como se
fossem ms girando em torno de um eixo. Tm esta propriedade
alguns ncleos como o do hidrognio comum e o docarbono 13.
Quando se coloca um composto contendo tomos de 1H ou de13C
num campo magntico muito forte e simultaneamente se irradia o
composto com energia eletromagntica, os ncleos podem absorver
energia num processo denominadoressonncia magntica.
A
radiao
utilizada
no
espectrmetro
de
RMN

aradiofrequncia(rf), de comprimento de onda altssimo (da ordem

de metros) e baixa energia (da ordem de 10-6kcal/mol). A absoro
desta radiao pelos ncleos desses elementos quantizada e produz
um espectro caracterstico.
Os aparelhos de RMN1H em geral utilizam ms supercondutores com
campos magnticos muito intensos e pulsos curtos de radiao de
radiofrequncia, que provocam a absoro de energia pelos ncleos
de1H, todos ao mesmo tempo, e ocorre ressonncia.

CLAE-RMN
(RMN)Tcnica mais poderosa para determinao estrutural de
substncias inditas com novos esqueletos e, principalmente em
misturas biologicamente ativas.
Baixa concentrao
manuteno.

e altssimo preo de solventes e custo de

Progressos em gradientes de pulso de campo

Supresso de solventes
Aparelhos de 750-800MHZ aliados a novas tcnicas de aquisio
de dados tem solucionado problemas de sensibilidade.
Dependendo da concentrao do analito e da sua estrutura a
aquisio pode ser em fluxo contnuo ou interrupo do fluxo.
Emprego da tcnica para um grande nmero de classe de
metablitos
secundrios
aromticos,
para
lactonas
sesquiterpnicas, esteroides, saponinas, e iridides de

Perspectiva da Qumica de
Produtos Naturais dentro da
era genmica
Perfil metablico de plantas da nossa biota de interesse
econmico com enfoque na genmica funcional de plantas.
Objetivo: Elucidao da rede regulatria e sinalizadora da
organizao e dinmica metablica pelo qual a vida de uma clula
processada.
Sequenciamento gentico de microorganismos patgenos como
Xyllela fastidiosa responsvel pela CVC (Clorose Variegada de Citrus)
e Cana de acar que deve levar a variedades mais produtivas e
resistentes.
Saccaharomyces cerevisiae
Caenorhahabditis elegans
Drosophila melanogaster
Arabidopsis thaliana cdigo gentico completamente decifrado.

Concluses
Espcie humana aproveita uma frao muito pequena
das plantas.
O domnio das plantas ser possvel quando as enzimas
forem melhor compreendida e as vias metablicas
conhecidas.
Expressar ou silenciar genes ser atividade rotineira na
biologia molecular
Em um futuro prximo a humanidade ter biofbricas
vegetais, onde cultivares de banana ou mamo
geneticamente modificadas substituiro as fbricas de
vacinas , no que ser conhecido como setor agrocutico.
Arroz e soja transgnicos, alm de resistentes as pragas,
sero vitaminados.