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COLETA, TRANSPORTE E PROCESSAMENTO

DE AMOSTRAS CLNICAS NO LABORATRIO DE


MICROBIOLOGIA:
NFASE EM SECREES

Profa. Cludia de Mendona Souza


Depto Patologia
Faculdade de Medicina
UFF

INTRODUO

1. QUAL O TEMPO MXIMO PERMITIDO


ENTRE A COLETA E O PROCESSAMENTO
INICIAL DE MATERIAIS COLETADOS
PARA EXAMES MICROBIOLGICOS?

A definio do tempo mximo permitido entre a


coleta e o processamento de um determinado
material clnico um fator importante para um
resultado confivel do exame.
A temperatura
importante.

de

transporte

outro

fator

A higiene e/ou anti-sepsia (lcool e iodo) do local


da coleta tambm interfere no resultado do exame.
Amostras de secrees do trato respiratrio
inferior, entre outras, so consideradas de
urgncia e devem ser processadas o mais rpido
possvel.

INTRODUO

2. Quais importncia da
refrigerao de materiais clnicos
aps a coleta?

Temperatura ambiente (TA) para o transporte e


armazenamento de amostras de 25oC
Reavaliar
conceito de TA, pois no Brasil, na maior parte do ano, a TA
pode ultrapassar esse valor.
Estudos recentes mostram que a viabilidade de bactrias
fastidiosas transportadas em swabs com meio de
transporte, foi melhor quando os swabs foram
armazenados refrigerados.
A refrigerao da amostra tem como finalidade manter a
viabilidade do agente a ser pesquisado e no permitir a
multiplicao de bactrias que fazem parte da microbiota
do stio de onde a amostra foi coletada.
Excees: lquor.

INTRODUO

3. O uso de swabs com meio de


transporte para coleta de materiais
clnicos pode ser utilizado em que
situaes?

A coleta apropriada e um sistema de transporte


eficiente so as etapas mais crticas da fase pranaltica do exame microbiolgico.
Vrios trabalhos mostram que a coleta de materiais
clnicos atravs de swabs menos adequada do
que aquela por aspirao (por exemplo: infeco
por anaerbios).
Swab com meio de transporte pode ser utilizado
para: secrees do trato genital, trato respiratrio
superior (orofaringe, nasofaringe), secreo ocular
e do trato digestrio (nus e reto).
No deve ser utilizado para secrees de feridas.

INTRODUO

4. Qual a sequncia correta de


semeadura de um material clnico
nos diferentes meios de cultura?

O processamento do material clnico no Laboratrio de


Microbiologia envolve dois principais exames: confeco de
esfregao corado pelo Gram e semeadura em meios de cultura.
Os meios de cultura so classificados basicamente em meios
seletivos e no-seletivos (ricos), de acordo com sua
composio.
Os meios ricos so livres de agentes inibidores e permitem o
crescimento da maioria dos microrganismos mais frequentes.
Os meios seletivos j possuem agentes inibitrios
(antibiticos, corantes, sais biliares, etc) favorecendo o
crescimento de alguns microrganismos e inibindo o de outros.
A semeadura deve ser realizada primeiramente no meio rico,
seguido do meio seletivo.
Realizar o esfregao para bacterioscopia, aps inoculao no
meio (se o material tiver sido coletado por swab).

MEIOS DE CULTURA

Agar sangue

Agar CLED

Agar MacConkey

Agar SS

INTRODUO

5. Quais as causas mais comuns de


rejeio de amostras
clnicas no laboratrio de microbiologia?

Amostras que foram coletadas ou transportadas sem as


condies adequadas no devem ser aceitas, pois a
qualidade do resultado pode ser prejudicada.

COLETA DE SECREES

COLETA DE SECREES
ABSCESSOS
Leso aberta:
Remover exsudato superficial, limpando com soluo
fisiolgica estril, as margens e a superfcie da leso.
Coletar a amostra na parte mais profunda da leso,
utilizando de preferncia, seringa e agulha. Ou, swab
com meio de transporte.

COLETA DE SECREES
ABSCESSOS
Abscesso fechado e ndulos:
No usar swab .
Fazer
anti-sepsia;
fisiolgica estril.

limpar

com

soluo

Aspirar o exsudato com agulha e seringa (meio


de transporte para anaerbios).

Quando for solicitada bacterioscopia e


cultura recomendado coletar dois
swabs: um para o esfregao corado pelo
Gram e o outro, para a cultura, que deve
ser colocado em meio de transporte.

Bacilos Gram negativos

Cocos Gram positivos

COLETA DE SECREES
LCERA DE DECBITO (ESCARAS)

Limpar

superfcie

com

salina

estril.

Se possvel, biopsiar (meio de transporte para


anaerbios); se no, aspirar com seringa e
agulha; em ltimo caso, colher com "swab" e
colocar em meio de transporte (Stuart).

COLETA DE SECREES
SECREO OCULAR
Conjuntiva: colher de ambos os olhos com
"swabs" umedecidos em salina ou caldo; semear
imediatamente em agar sangue e agar chocolate, ou
transportar em Stuart; passar os "swabs" j
semeados em lminas.
Transporte:

placas <15 min, T ambiente


"swabs" <2 h, T ambiente

COLETA DE SECREES
SECREES GENITAIS FEMININAS
Bartholin: desinfetar a pele com iodo;
aspirar o fluido e inocular em meio de transporte.
Crvix: Aps limpeza do muco/secreo com um
"swab", colher com outro swab material do canal
cervical, e incluir em meio de transporte.
Secreo vaginal: limpar o excesso de secreo,
colher com "swab", e colocar em meio de transporte
(Stuart). Um segundo "swab deve ser colhido e
passado em lmina, para pesquisa de Gardnerella
vaginalis.

COLETA DE SECREES
SECREES GENITAIS MASCULINAS
Prstata: tubo seco, estril, aps massagem
prosttica.
Uretra: "swab" urogenital no lmen uretral (2-4 cm
profundidade), rotativamente, colocando em meio de
transporte Stuart.

LESO ULCERADA MASCULINA OU FEMININA


Colher com "swab", aps limpeza e colocar em
meio de transporte (Stuart).

PROCESSAMENTO DE
SECREES

PROCESSAMENTO
Swab sem meio de transporte:
Suspender a amostra em volume pequeno de caldo
TSB ou soluo fisiolgica estril e homogeneizar.
Utilizar a soluo para inocular nos meios e fazer
lmina para o Gram.
Semear por esgotamento.
Swab com meio de transporte:

Rolar o swab numa parte do meio e semear por


esgotamento.

PROCESSAMENTO
Seringa
Inocular diretamente nos meios de cultura
slidos (esgotamento) e em caldo THIO ou
frasco de hemocultura.

COLETA DE SECREES
SECREES TRATO RESPIRATRIO SUPERIOR

Secreo de orofaringe

CULTURA EM AGAR SANGUE:


Streptococcus pyogenes
GRAM NO REALIZADO A
PARTIR DO MATERIAL CLNICO

Coleta de Secrees - TRI


O broncoscpio de fibra ptica flexvel
introduzido atravs da traquia at o bronquolos.
Possui quatro canais que consistem em dois, que
servem para iluminar, um de observao e um canal
aberto que acomoda instrumentos ou permite a
administrao de anestsico ou oxignio.
Lavado broncoalveolar: so injetados
aproximadamente
100mL
de
soluo
fisiolgica estril atravs do canal aberto.
Aps 3 a 5 minutos, recuperado, por
aspirao, no mnimo, 40% do volume
injetado. Este pode ser coletado em dois ou
mais frascos estreis.

Escovado brnquico: A escova enviada


para anlise dentro de um tubo contendo 1mL
de soluo fisiolgica estril, imediatamente
aps a colheita.

PROCESSAMENTO
SECREES TRATO RESPIRATRIO INFERIOR - TRI
Lavado broncoalveolar
Escovado
Aspirado traqueal

Cultura quantitativa!!

Escarro Anlise da qualidade da amostra (GRAM)


Bipsia pulmonar

Materiais no aceitveis:
- Saliva
- Escarro colhido durante 24 horas
- Swabs

Coleta de Secrees - TRI


Escarro Gram para avaliao da qualidade da amostra

Amostra adequada

Amostra inadequada

Amostra de boa qualidade:


>25 polimorfonucleares e <10 clulas descamativas, por
campo no aumento de 100 x (Murray & Washington, 1975)

PROCESSAMENTO: CULTURAS QUANTITATIVAS


Uso

de Ala Calibrada.

Critrios de Interpretao:

Escovado Protegido: 103 UFC/mL

Lavado Bronco-alveolar (LBA): 104 UFC/mL

Aspirado Traqueal: 106 UFC/mL