CLASE

N2
MICROSCOPIO

El microscopio es un instrumento ptico de

precisin que proporciona la amplificacin de las
imgenes de los objetos, lo que hace posible,
ver con detalles y claridad sus estructuras
pequeas o invisibles a la vista humana,
facilitando de esta manera su estudio. Esta
integrado por tres sistemas; ptico, mecnico y
de iluminacin, a su vez cada sistema esta
constituido por varios componentes y cada uno
tiene funciones especificas, las que son
necesarias conocer para su buen
funcionamiento.

Los especimenes o
muestras que se
examinan con un
microscopio ptico,
son transparentes y
se observan con
una luz que los
atraviesa

El microscopio ptico (fotnico) compuesto, que puede

ser monocular o binocular, permite obtener aumentos
de 100 a 1500 veces.

Qu puede verse a travs del Microscopio ptico ?

Trichomonas vaginalis
a 100 aumentos

Closterium (alga)
a 600 aumentos

Amiba
a 250 aumentos

Clulas sanguneas Penicillium a 1500 aumentos

Alga dulceacucola
a 400 aumentos

Bacterias
a 1500
aumentos

Partes del microscopio

Parte ptica: objetivos, oculares
Parte mecnica: base, brazo, platina,

tubo, botn micromtrico, botn

macromtrico, revlver.
Parte de iluminacin: diafragma,
condensador, lmpara o fuente de luz

La platina
Es una placa metlica, suele ser cuadrada y se halla en un plano normal al eje del
tubo. El portaobjetos con la preparacin que se desea observar se coloca encima de
la platina, junto a unos encajes que tiene para esto, quedando sujeta mediante una
pieza curva (carro) o por las pinzas En el centro lleva una perforacin por cual pasa
la luz. La preparacin se desplaza sobre la platina mediante dos tornillos. A veces
posee 2 reglillas con escalas que permiten orientar a otros en la observacin de
algn elemento en especial

La cremallera
Los tornillos, asociados al carro de la
platina y al condensador, permiten el
movimiento de estos.
La accin del tornillo del condensadores de
subir o bajar.
Los tornillos asociados al carro mueven la
preparacin, hacia los lados o hacia delante y
atrs.
Estos tornillos auxilian en el enfoque de la
imagen o a localizar la muestra o especimen.

Tornillo Macromtrico: Mueve, tambin la platina, se

usa para localizar el enfoque grueso de la
preparacin

Tornillo micromtrico. Permite movimientos muy cortos en un

ajuste fino del enfoque para lograr una observacin precisa

COMPONENTES PTICOS
Comprende a los lentes oculares, a los lentes objetivos

Las lentes de los microscopios se encuentran dispuestas

de forma tal, que el objetivo se encuentre en el punto focal
del ocular

OCULARES
El

ocular examina y amplifica la imagen producida por el objetivo.

Generalmente se presenta, en los oculares de Microscopios compuestos,

el ocular izquierdo con correccin de dioptras (para enfocar se le puede subir o bajar)

Lentes

El ocular se compone de dos lentes. La lente

inferior recoge la imagen del objetivo, la
reduce y la reforma dentro del ocular a nivel
del limitador del campo visual. La lente
superior forma una imagen virtual aumentada
para ser vista. El aumento de los oculares
puede ser de X4, X10,X12 y X15.

El Objetivo
Es importante para producir una imagen clara de alta resolucin, utilizar la
lente adecuada

El objetivo est compuesto de varios tipos

de lentes que crean una imagen real
aumentada del objeto examinado, controla el
aumento posible y la claridad de la imagen.
Estos, con diferentes aumentos estn
colocados en el revlver y pueden ser de 4X
10X 40X o lentes secos y el de 100X o
lente de inmersin.

La amplificacin de un objeto se logra

multiplicando el aumento del lente objetivo por
el aumento de la lente ocular. Por ejemplo:
Aumento = 40 X 10 = 400 aumentos

Lente objetivo de 40X

Lente ocular de 10 aumentos

FORMACIN
DE
LA IMGEN

POR QU SE INVIERTE LA IMAGEN

AL PASAR POR LA LENTE
CONVERGENTE?

 Dos lentes convexas bastan para construir

un microscopio. Cada lente hace

converger los rayos luminosos que la
atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo,
se sita cerca del objeto que se quiere
estudiar. El objetivo forma una imagen
real aumentada e invertida.

Se dice que la imagen es real porque los rayos

luminosos pasan realmente por el lugar de la
imagen. La imagen es observada por la
segunda lente, llamada ocular, que acta
sencillamente como una lupa. El ocular est
situado de modo que no forma una segunda
imagen real, sino que hacen diverger los rayos
luminosos, que al entrar en el ojo del
observador parecen proceder de una gran
imagen invertida situada ms all del objetivo.
Como los rayos luminosos no pasan realmente
por ese lugar, se dice que la imagen es virtual.

cuando mueves la platina hacia la derecha

"parece" que la imagen se desplazara hacia la
izquierda porque es el efecto que causan los
lentes convergentes sobre la retina del ojo
humano( es por eso que tambin se les puede
decir lentes que "no acompaan) pero en
realidad no es lo que sucede.
El "efecto de no acompaar" se debe a que son
lentes que se obtienen de la unin de 2 prismas
de cristal que se unen por su vrtice que tienden
a hacer diverger (disipar) los rayos luminosos
hacia la base de la lente de manera que tu
percibes la desviacin luminosa siempre en la
misma direccin lo que hace que se invierta el
sentido del desplazamiento de la platina...

 La IMAGEN sale INVERTIDA o al revs

debido al aumento del OBJETIVO y

vuelve a ser aumentada por el OCULAR,
obteniendo una imagen definitiva, que es
INVERTIDA respecto de la original, y
resulta de MULTIPLICAR el aumento del
Objetivo por el aumento del Ocular.
Las imgenes se forman con los RAYOS
DE LUZ que llegan a los sistemas de
lentes luego de atravesar la preparacin.

FUENTE DE LUZ

Lmparas elctricas
Se les puede ajustar
la intensidad de luz

Espejo

Fuente de Luz: Proporciona la luz que llega hasta el objeto a estudiar y el

sistema ptico del microscopio: Puede ser por un espejo (plano por un lado y
cncavo por el otro) o luz incorporada (un foco de luz elctrica ocupando el
sitio del espejo.)

La potencia amplificadora de un microscopio ptico est limitada por la longitud

de onda de la luz visible.

El condensador
El condensador es la lente que concentra el haz luminoso hacia la
preparacin. Ilumina la lente del objetivo, su abertura numrica debe
ser suficientemente alta para suministrar el cono de luz requerido.
Posee, en su parte inferior, un anillo para alojar filtros de
colores o de luz natural.

DIAFRAGMA
En la parte inferior del condensador hay una abertura regulable, o diafragmairis controlado por una palanca lateral.
La apertura y el cierre del diafragma regula la cantidad de luz que ingresa
hacia la preparacin

Muchas de las estructuras y eventos biolgicos ms interesantes son ms

pequeos de lo que podemos ver. El ojo humano tiene una resolucin de
cerca de 100 m. En el cuadro de abajo se puede ver que de todas las
estructuras listadas, solo la clula vegetal est escasamente dentro de
nuestro poder resolutivo

MAYOR O MENOR PODER

DE RESOLUCIN?
En microscopa resolver se refiere a separar. As, el poder
de resolucin implica la capacidad de separar o discernir
entre dos objetos muy cercanos entre s.

Poder de resolucin (PR):

Eslacapacidaddelaslentesdedistinguiror
e s o l v e r (mostrar separados) con nitidez dos puntos
situados muy prximos entre s. Se expresa como la distancia
mnima que permite dar una imagen bien definida de dos
puntos, en vez de verlos como uno solo.
Cuanto mayor es el poder de resolucin (PR), menor es la
distancia que separa los puntos entre s sin que estos se
confundan. En consecuencia, cuanto mayor sea el poder
resolutivo del objetivo, ms finos sern los
detalles de la preparacin que puedan distinguirse. Puede
determinarse en base a la longitud de onda de la luz
utilizada () y directamente proporcional a la apertura
numrica
(AN) . El valor de AN varia con cada objetivo y esta inscripto
con nmeros decimales pequeos en cada uno de ellos. El PR
se puede estimar indirectamente calculando el limite de
resolucin.

AS, DOS OBJETOS MUY CERCANOS SE PUEDEN VER COMO UNO SOLO
SI LOS LENTES DEL MICROSCOPIO TIENEN UN BAJO PODER DE
RESOLUCIN

Menor poder de resolucin

Mayor poder de resolucin

--

++

1.
2.
3.

4.

5.

CARACTERISTICAS DE LOS OBJETIVOS:

PODER DEFINIDOR: es la capacidad del objetivo de

formar imgenes de contornos ntidos.
PODER DE RESOLUCIN: es la capacidad de mostrar
la imagen en sus detalles ms finos.
PODER DE PENETRACIN: es la propiedad de permitir
la observacin simultnea de varios planos del
preparado.
DISTANCIA FRONTAL: es la distancia de la lente frontal
al preparado colocado en la platina, cuando est
enfocado. Disminuye cuando aumenta la escala de
reproduccin del objetivo.
AUMENTO TOTAL: Debemos notar que el ocular
tambin tiene un aumento, por lo tanto el aumento total
de la imagen que observamos es el producto entre el
aumento del objetivo y el del ocular. Ejemplo: si
tenemos colocado el objetivo cuya escala de
reproduccin es 40 y nuestro ocular tiene un aumento
de 10x, entonces el aumento total ser 40 x 10 = 400.

Partes de un microscopio ptico

MANEJO DEL MICROSCOPIO

PTICO
Colocar el objetivo de menor aumento
en posicin de empleo y bajar la platina
completamente. Si el microscopio se
recogi correctamente en el uso anterior,
ya debera estar en esas condiciones.
Colocar la preparacin sobre la platina
sujetndola con las pinzas metlicas.

Comenzar la observacin con el objetivo de 4x

(ya est en posicin) o colocar el de 10
aumentos (10x) si la preparacin es de
bacterias.
Para realizar el enfoque:

Acercar al mximo la lente del objetivo a la

preparacin, empleando el tornillo macromtrico.
Esto debe hacerse mirando directamente y no a
travs del ocular, ya que se corre el riesgo de
incrustar el objetivo en la preparacin pudindose
daar alguno de ellos o ambos.
Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir
separando lentamente el objetivo de la preparacin
con el macromtrico y, cuando se observe algo
ntida la muestra, girar el micromtrico hasta
obtener un enfoque fino.

Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera

estar ya casi enfocada y suele ser suficiente
con mover un poco el micromtrico para lograr
el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se
perdi por completo la imagen, es preferible
volver a enfocar con el objetivo anterior y
repetir la operacin desde el paso 3. El
objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia
de la preparacin y por ello es fcil que
ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en
la preparacin si se descuidan las
precauciones anteriores y mancharlo con
aceite de inmersin si se observa una
preparacin que ya se enfoc con el objetivo
de inmersin.

Empleo del objetivo de inmersin:

Girar el revlver hacia el objetivo de

inmersin dejndolo a medio camino entre
ste y el de x40.
Colocar una gota mnima de aceite de
inmersin sobre el crculo de luz.
Terminar de girar suavemente el revlver
hasta la posicin del objetivo de inmersin.
Enfocar cuidadosamente con el
micromtrico.
Una vez se haya puesto aceite de inmersin
sobre la preparacin, ya no se puede volver
a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues
se manchara de aceite.

MANTENIMIENTO Y
PRECAUCIONES

Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el

objetivo de menor aumento en posicin de
observacin, asegurarse de que la parte
mecnica de la platina no sobresale del borde
de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
Nunca hay que tocar las lentes con las manos.
Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente
con un papel de filtro o, mejor, con un papel de
ptica.
No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina
si no se est utilizando el microscopio.

Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que

limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos
especiales para ptica o con papel de filtro (menos
recomendable). En cualquier caso se pasar el papel
por la lente en un solo sentido y con suavidad. El
cambio de objetivo se hace girando el revlver y
dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para
prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar
nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni
hacerlo mientras se est observando a travs del
ocular.
Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se
derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao.
Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao
humedecido en xilol.
Es conveniente limpiar y revisar siempre los
microscopios al finalizar la sesin prctica y, al acabar
el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin
general de los mismos.

 Procedimientos
Observar al microscopio con lentes de 10

X y 40 X suspensiones de
microorganismos
Observar diferentes objetos con los
diferentes objetivos segn la gua