Antibiticos

Professora: Marilia Gonalves Magalhes

Ana Paula Resende

Eduardo Bonetti
Raissa Fernanda Soares Costa
Ricardo da Silva Coelho
Richard Santiago
Universidade de So Joo del Rei
Engenharia Bioqumica
Junho/2015

Sumario

Introduo

Grupos microbianos que produzem antibiticos

Classificao

Aplicao

Antibiticos -Lactmicos

Estrutura qumica

Produo

Meio de cultivo

Condies de fermentao

Cintica de produo

Processo de separao/purificao

Concluso

Referncias bibliogrficas

Introduo

So substncias produzidas pelos microrganismo, com

capacidade de inibir o crescimento e at de destruir outros
microrganismos mediante a ao de quantidades muito
pequenas

So produtos do metabolismo secundrio de microrganismo

Exemplos de antibitico: penicilina, estreptocina e seus

derivados, diidroestreptomicina, Ilotycin (eritromicina) e outros

Figura 1: Ilustrao de Antibiticos

Introduo

Penicilina, Alexander Fleming1929

Importncia na Segunda Guerra Mundial

Figura 2: Alexander Fleming e a Penicilina

Grupos microbianos que produzem

antibiticos

Bactrias

Actinomicetos

Fungos

Tabela 1 : Nmero de Antibiticos produzidos pelo seus principais grupos

Grupo taxonmico

Nmero de Antibiticos

Bactrias diferentes de
actinomicetos

950

Actinomicetos

4600

Fungos

1600

Classificao
Pode ser classificados de acordo com:

Mecanismo de ao

Cepa produtora

Forma de biossnteses

Estrutura qumica

Espectro antimicrobiano

Aplicaes

Agentes teraputicos/Quimioterapia
Antibiticos de amplo espectro
Antibiticos de espectro reduzido

Antibiticos antitumorais

Contra doenas de plantas

Preservantes dos alimentos

Estimuladores de crescimento animal e na medicina veterinria

Ferramenta na bioqumica e na biologia molecular

Antibiticos -Lactmicos
Os antibiticos -lactmicos podem se dividir em cinco classes
Penicilinas

Monolactam
as

Cefalosporin
as

Carbapenens

Oxapenens

Figura 3: Classe de antibiticos -lactmicos

Antibiticos -Lactmicos

As penicilinas e cefalosporinas pertencem aos mais eficazes de

todos os agentes teraputicos para controle das enfermidades;

Desenvolvimento de substncias -Lactmicas semi-sintticas

baseadas nos anis -Lactmicos;

Nos ltimos anos tm sido desenvolvidos sistemas de anis Lactmicos novos utilizando mtodos modernos;

Figura 4: Exemplos de anis -lactmicos

10

Antibiticos -Lactmicos

Figura 5: Estruturas bsicas dos antibiticos -lactmicos

11

Produo de Penicilina

As penicilinas naturais so eficazes contra numerosas bactrias

gram-positivas;

Devido a sua baixa toxicidade, podem ser utilizadas grandes

doses de penicilina,somente (0,5-2%) de pacientes desenvolvem
alergia;

Os antibiticos -lactmicos so inibidores especficos

sntese da parede celular bacteriana (peptidoglicano);

Figura 6: Stios de ao -lactmicos

Figura 7: Lise da clula por ao de

da

12

Estrutura Qumica

A estrutura bsica da
aminopenicilmico (6-APA);

penicilina

Figura 8: Estrutura Bsica da Penicilina

Anel -lactmico fundido a um anel tiazolidnico.;

Grupo carboxlico na posio 3;

Parte varivel acilada na posio 6;

cido

6-

13

Estrutura Qumica

Se a fermentao da penicilina conduzida sem adio de

precursores da cadeia lateral, produzem-se as penicilinas
naturais;

Somente a Benzil penicilina til terapeuticamente;

Figura 9: Estrutura das Penicilinas Naturas

Estrutura Qumica

14

A fermentao pode ser melhor controlada , adicionando um

precursor de cadeia lateral, de forma que produza somente uma
penicilina desejada;

Penicilinas biossintticas;

Nos processos comerciais, somente a penicilina G e a penicilina V

tm sido produzidas;

Figura 9: Estrutura das Penicilinas Biossintticas

15

Estrutura Qumica

Para produzir penicilinas semi-sintticas a penicilina G

hidrolisada qumica ou enzimaticamente para formar a 6-APA,
que reciclado quimicamente para produzir outro derivado da
penicilina.

Figura 10: Mecanismos de formao da Penicilina

16

Estrutura Qumica

Figura 11: Estruturas de Penicilinas semi-sintticas

Estrutura Qumica

17

38% das penicilinas produzidas comercialmente so utilizadas na

medicina humana;

12% medicina veterinria;

43% como matria prima para produo de penicilinas semisintticas;

Figura 12: Penicilina Comercial

18

Fluxograma da Produo da Penicilina

Figura 13: Fluxograma da Produo da Penicilina

19

Preparao do Inculo

O inculo preparado a partir de Esporos liofilizados.

A Concentrao de esporos e formao de Pellets so

fundamentais para o rendimento

Concentrao tima =

Para se conseguir uma velocidade tima de formao da

Penicilina os Pellets devem crescer de forma solta.

A baixa aerao no cultivo em crescimento crtica, porque o

aumento da viscosidade dificulta a transferncia de oxignio.

Figura 14: Fungo Penicilinium

20

Meio de Cultivo

Fontes de nitrognio : gua de milho, melao, gorduras animais.

Fonte de nitrognio adicional: farinha de soja, extrato de

levedura ou soro de leite

Fontes de carbono: Lactose, glicose;

Vrios Tampes;

Esterilizao: aquecimento mido a alta presso

Figura 14: Componentes do Mosto

21

Condies de Fermentao

O precursor adicionado continuamente

cido fenil cetico (Penicilina G)
cido fenoxiactico (Penicilina V)

Faixa de Temperatura: 25 a 27C

pH mantido constante a 6,5;

Processo aerbio

Fermentao Submersa

Processo descontnuo alimentado ou

batelada alimentada

Figura 15: Exemplo de Fermentadores

22

Condies de Fermentao

Biorreatores de 40.000 a 200.000 litros

Aerao: (0,5-1,0 vvm)

OD: (0,4-0,8 )
Agitao: (120-150 rpm)
Agitadores do tipo turbina
Fonte de C: (1,0-2,5 )

Figura 16: Fermentadores Industriais para a produo da Peniculina

23

Cintica de Produo
3 principais etapas:

Condensao

Converso por oxidao ( formao

de um anel bicclico)

Remoo

Figura 17: Biossntese da Penicilina

Cintica de Produo

24

Primeira etapa

Condensao de 3
aminocidos

Figura 18: Biossntese

25

Cintica de Produo
Segunda Etapa:

Converso oxidao

Figura 18: Biossntese da penicilina G

26

Cintica de Produo
Terceira Etapa:

Remoo

Figura 18: biossntese da penicilina G

27

Cintica de Produo
Produo de penicilina aps a
estabilizao do crescimento celular
Oxignio dissolvido (fator crtico)

Figura 19: Fermentao da Penicilina por Penicillium Chysogenium

28

Processo de separao/purificao
OBS.: A penicilina excretada no meio de cultivo e menos de 1%
permanece unida ao miclio.
A purificao envolve as etapas:

FILTRAO ou CENTRIFUGAO: separao do miclio (clulas);

SISTEMA DE EXTRAO: separao do antibitico em fase aquosa;

CRISTALIZAO: concentrao do antibitico.

29

Processo de separao/purificao
Biomolcula pequena que pode ser extradas diretamente do
mosto fermentativo em uma fase orgnica lquida imiscvel.

VANTAGENS DA EXTRAO EM BIOPROCESSOS

i. Extrao por solvente geralmente mais barata que separao
por membrana ou por cromatografia;
ii. Permite operao contnua;
iii. reprodutvel em larga escala.

30

Extrao da penicilina
A penicilina um antibitico

1 Extrao

2 Clarificao

extrado via metil-isobutil-cetona

(MIBK)
Extrao contnua em
contracorrente do caldo de
fermentao com MIBK.
T.: 0 C 30 C
pH: 2,5 3,0.
Rendimento prximo de 90%.

Figura 20: Extrator contnuo de Podebielniak

31

Concentrao da penicilina

CRISTALIZAO:
concentra o antibitico e
reduz o volume do
processo sem fazer uso
de solvents caros e/ou
membranas;

Facilita a separao;

Cristais de alta pureza

(99,9%);

Em larga escala a etapa

de polimento para
antibiticos, inibidores
enzimticos e algumas
protenas.

Figura 21: Cristalizador evaporativo tipo Oslo

32

Concentrao da penicilina
MECANISMOS:

Ajuste do pH: ponto isoeltrico (reduz a solubilidade);

Reduo da temperature;
Adio de sais, polmeros no inicos ou solvents orgnicos.

CRISTALIZAO DA PENICILINA G:

SEPARAO DOS CRISTAIS:

+ Adio de 4 volumes de nbutanol;

- Azetropo (gua+butanol)
destilado a baixas temperatura e
presso;
= Humidade inferior a 1%;

Filtrao;
Lavagem com butanol;
Secagem (microondas);
Estocados.

33

Concluses

Produto de elevada importncia econmica e social;

Para aumento da eficincia do processo, deve-se atentar para o:
TEOR DE OXIGNIO DISPONVEL (agitao),
pH
TEMPERATURA
controlados, durante todas as etapas de produo.

34

Bibliografia
LIMA, U. A. Biotecnologia Industrial.V. 3. So Paulo, 2001.
Produo e purificao de penicilina G acilase. Disponvel em :
http://www.bv.fapesp.br/pt/publicacao/1109/producao-e-purificacao-depenicilina-g-acilase/ . Acesso em 13/06/2015.
GODOY, D. Processos Bioqumicos. Disponvel em:
http://www.fat.uerj.br/intranet/disciplinas/Processos
%20Bioquimicos/P3/Antibi%F3ticos.pdf. Acesso em 14/06/2015.
Produo de Antibiticos.
https://erikalizfarma.files.wordpress.com/2011/02/aula-10-produc3a7c3a3odeantibic3b3ticos.pdf . Acesso em 14/06/2015.
SEADER, J.D.; HENLEY, E.J.; ROPER, D. K. Separation Process Principles:
Chemical and Biochemical Operations. 3rd. ed.
Menezes, J.C.; Alves, T.P.; Cardoso, J.P. Biotecnologia Microbiana: A
Produo de Penicilina, cap. 12, 15 pp. in Biotecnologia: Fundamentos
e Aplicaes, N. Lima e M. Mota (eds.), DIFEL, 2000.