A HISTRIA DA

BIOSSNTESE
DE PROTENAS

POR:

Ana Beatriz T. Frederico

Gabriela G. de Souza
Lukas Bolini
Sidcley Lyra
Thas Antunes
Thas Oliveira

EM 1953 PETER CAMPBELL E THOMAS

WORK
IDENTIFICARAM DUAS TEORIAS OPOSTAS
SOBRE A ORIGEM DAS PROTENAS:
a Teoria dos Peptdeos (tambm conhecida como a
Teoria das Multienzimas), segundo a qual as protenas
so criadas "pelo acoplamento gradativo de muitas
unidades pequenas de peptdeos",
e a Teoria dos Moldes, a qual envolvia a "sntese baseada
em moldes, sendo cada molde especfico para uma nica
estrutura proteica e provavelmente identificvel com um
gene".

Imagem do Teorema das

Multienzimas.

Teorema dos Moldes.

O modelo dos peptdeos contou durante muito tempo

com o apoio de muitos bioqumicos de destaque,
incluindo Joseph Fruton. A convico por trs dele era o
poder das enzimas de tanto sintetizar quanto fragmentar
seus substratos, com alto grau de especificidade atribuda
a ambas as aes. A idia era que a sntese envolvia a
formao de uma sucesso de peptdeos e acabava
resultando na molcula de protena, e as enzimas
sintetizam apenas as ligaes de peptdeos que tambm
hidrolisam. Mas o problema dessa teoria era que, com a
exceo de muito poucos casos especiais, os alegados
peptdeos que constituiriam os intermedirios na sntese
proteica no podiam ser detectados na clula, nem
incorporados na protena que estava sendo sintetizada.
(Entretanto, os aminocidos podiam sim, ser
incorporados, indicando que eram eles os blocos bsicos
dos quais eram feitas as protenas.)

O segundo modelo de sntese proteica, que pressupunha

a sntese com base num molde, tinha sido proposto por
Dounce em 1952. Ele imaginou cadeias de polipeptdeos
sendo dispostas sobre molculas de RNA, e a sequncia
do RNA determinando a sequncia dos aminocidos
incorporados (numa base de um para um). Assim, o DNA
no ncleo controlaria a ordem das bases no RNA. Depois
de pesar os mritos e as dificuldades do esquema
proposto por Dounce, Campbell e Work expressaram seu
repdio pelo controle gentico da sntese proteica
observando em 1953, que "(...) o gene essencialmente
uma ideia abstrata, e pode ser um erro tentar revestir
essa ideia com uma capa de cido nuclico ou
protena (...). Se precisamos obrigatoriamente ter um
gene, ele deveria ter uma funo negativa, em lugar
de positiva, no que diz respeito sntese proteica".

Mas foi apenas trs anos mais tarde (1956) que Robert
Sinsheimer encerrou uma palestra no Instituto de
Tecnologia da Califrnia com as seguintes palavras: "O
gene, antes uma abstrao formal, comeou a se
condensar, a assumir forma e estrutura e a
apresentar atividade definida".

Esses trs anos testemunharam mudanas profundas.

Em janeiro de 1957 quando Fruton reviu a segunda

edio de seu largamente usado livro didtico "General
Biochemistry", suas observaes sobre a teoria dos
peptdeos foram cautelosas e seguidas de uma discusso
do papel exercido pelo RNA, em torno do qual, ele
observou, "vm sendo feitas especulaes instigantes
quando ao papel dos cidos 6 nuclicos como
"moldes" numa sntese proteica". Em uma parte
anterior do livro ele dedicou um pargrafo dupla
hlice, descrevendo-a como "especulao engenhosa". O
nico diagrama era do par de bases adenina-timina, em
vez do modelo helicoidal da estrutura.

Kornberg tinha mostrado, em 1957, que a reproduo do

DNA segue as normas da formao de pares de bases,
pelas quais a DNA-polimerase acrescenta uma base fita
recm-sintetizada, base essa que complementar base
oposta na fita de molde (A sempre fica oposta a T, e C
fica sempre oposta a G). Mas seu interesse no assunto
no tinha sido estimulado pela descoberta de Watson e
Crick. Em lugar disso, em 1953 ele estava interessado
em como as coenzimas (compostos no-proteicos
necessrios para a atividade enzimtica) so sintetizadas
a partir dos nucleotdeos.

Kornberg foi levado a se indagar como o DNA e o RNA

poderiam ser compostos de milhares de nucleotdeos. Ele
recorda que "o significado da dupla hlice s se fez
sentir" em seu trabalho em 1956, depois de mostrar que
"uma frao moderadamente purificada" daquilo que
ele, mais tarde, iria chamar de DNA-polimerase
"pareceu aumentar o tamanho de uma cadeia de
DNA".

Aps a descoberta da dupla hlice, os cientistas que

procuravam elucidar o problema da reproduo
encontraram seu fundamento molecular na estrutura do
DNA, embora tenham sido necessrias mais de duas
dcadas para deduzir o intricado mecanismo de sua
operao na clula. Os pesquisadores que trabalhavam
com a sntese proteica constataram que a fonte de sua
especificidade estava na sequncia de bases do DNA.

A dupla hlice possui valor simblico notvel, e isso

contribuiu muito para sua visibilidade pblica, coisa que
no aconteceu com nenhuma das 7 estruturas proteicas.
Alm disso, a maneira como ela foi descoberta e as
personalidades envolvidas na descoberta ajudaram a
tornar mais interessante a histria, amplamente difundida
pelo relato feito por James Watson em "The Double
Helix" (A Dupla Hlice), publicado em 1968, e na
recente biografia de Rosalind Franklin escrita por
Brenda Maddox "The Dark Lady of DNA", da editora
Harper Collins.

Uma caracterstica dos ribossomos que deve ser

destacada que eles podem ser formados in vitro pela
unio espontnea de seu RNA com os constituintes
proteicos. Como descrito primeiramente em 1968 por
Masayasu Nomura, protenas ribossomais purificadas e
RNA ribossomais podem ser misturados e sob condies
apropriadas, formaro novamente um ribosssomo
funcional. Essa tcnica tem fornecido uma importantes
ferramenta experimental, permitindo a anlises dos
papeis das protenas e dos RNA ribossomal
individualmente.
Devido ao grande tamanho e complexidade do
ribossomo, a anlises estrutural de alta resoluo dos
ribossomos, por cristalografia de raio x, no havia sido
realizada at o ano de 2000, quando as estruturas das
subunidades 50S e 30S foram descritas pela primeira
vez.

Os dois processos antes enigmticos (a reproduo do

DNA e a sntese das protenas) fizeram uma interseco
com as pesquisas de qumica-fsica, qumica-orgnica e
biolgica que estavam sendo conduzidas no incio dos
anos 1950.

Devido ao grande tamanho e complexidade do ribossomo, a

anlises estrutural de alta resoluo dos ribossomos, por
cristalografia de raio x, no havia sido realizada at o ano
de 2000, quando as estruturas das subunidades 50S e 30S
foram descritas pela primeira vez.

PAPEL CATALTICO DO RNA

RIBOSSOMAL

Os experimentos:

Com a inteno de estudar a atividade cataltica do

rRNA , Harry Noller e seus colaboradores utilizaram um
modelo de reao simplificada na qual testava a
atividade da peptdil transferase. A reao tem como
objetivo medir a transferncia da N- formilmetionina que
estar marcada radioativamente a partir de um fragmento
de tRNA para o grupo amina da puromicina ( um
antibitico similar a um tRNA aminoacil e pode formar
ligaes peptdicas com uma cadeia peptdica em
crescimento.

EXPERIMENTO PROPRIAMENTE DITO:

A reao da peptdil transferase pela
formao de N-formilmetionina
puromicina (f- Met- puro)
radioativa que detectada por
eletroforese e auto-radiografia.
Ribossomos do T. aquaticus foram
submetidos extrao proteica ou ao
tratamento com RNAse, como
indicador.

RESULTADO DO EXPERIMENTO DE
NOLLER

Os resultados de Noller foram confirmados pela anlise

estrutural de alta resoluo da subunidade ribossomal 50S
realizada por Peter Moore, Thomas Steitz e seus colaboradores
nos anos 2000. O stio ribossomal da reao da peptidil
transferase continha
somente rRNA, sem protenas
ribossomais nas adjacncias.

Esses resultados removem quaisquer dvidas quanto ao papel

cataltico do RNA nessa reao e demonstram que a reao
fundamental da stese protica catalisada pelo RNA
ribossomal. Esses resultados no tm somente um impacto
surpreendente em nosso entendimento da funo ribossomal,
mas tambm ampliam profundamente as atividades catalticas
das molculas de RNA descritas previamente e formem um
novo suporte para a hiptese de que um periodo inicial da
evoluo tenha tenha sido um mundo de RNA povoado por
molculas de RNA auto-replicativas .

A hiptese foi baseada na capacidade das molculas de

RNA em catalisar as reaes necessrias para a sua
prpria replicao. A descoberta de que o RNA poderia
catalisar reaes envolvidas na sntese protica forneceu
uma ligao clara entre o mundo de RNA e o fluxo da
informao gentica nas clulas dos dias atuais, com o
RNAr continuando a funcionar na reao-chave da
formao da ligao peptdica.