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COLORACIN P.A.

S
INTEGRANTES:
AGUILAR
MENDOZA,
Gianina .
BAZN HUAYTN, Roby .
CALISTO
VIZCARDO,
Gabriela.
OLIVARES
CALLER,
Adriana

UTILIDAD

UTILIDAD
Utilizado para la deteccin de
hidratos de carbono cuando se
encuentra
en
cantidades
relativamente grandes en los tejidos.
Tambin en frotis sanguneo o de
medula sea para el reconocimiento
de
eritroleucemia
y
leucemia
linfoblstica aguda.

UTILIDAD
Es uno de los mtodos qumicos ms
empleados en histologa:
Glucgeno en las clulas
Moco en diversos tipos celulares
Membrana basal subyacente a los
epitelios
Fibras reticulares del tejido conectivo
Teir linfocitos (leucemia linfoctica)

UTILIDAD

MOCO EN DIVERSOS TIPOS


CELULARES:

UTILIDAD
OTROS USOS SON PARA TEIR BACTERIAS,
HONGOS Y OTROS MICROORGANISMOS.

FUNDAMENTO

FUNDAMENTO
- Esta tcnica consiste en oxidar los tejidos. Es necesario oxidarlos con el fin de
incrementar dichos grupos, que solo pueden ser detectados por el reactivo de schiff.

PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO
REACTIVOS:
CIDO PERYDICO AL 5 %
REACTIVO DE SCHIFF
HEMATOXILINA DE MAYER

MATERIALES:
XILENO
ETANOL DE 50, 70, 80,
90, 96 Y 100
H2O DESTILADA
AGUA CORRIENTE
MEDIO DE MONTAJE
CUBETAS DE TINCIN
CESTA PARA PORTAS
CUBREOBJETOS

PROCEDIMIENTO
I. RECOGIDA DE LA MUESTRA:
Se utilizan frotis de sangre total heparinizada o
con EDTA, o de mdula sea, recin
preparados.
Tejido fijado con formol tamponado neutro al 10
%, solucin de zenker o de bouin.
Algunos carbohidratos son hidrosolubles. Para
la demostracin de glicgeno, se recomienda
lquido de carnoy, lquido de gendre o formol
alcohlico cido.

Partimos de muestras que han sido fijadas e incluidas en


parafina. Estas muestras se han cortado en secciones de
unas 5 a 8 um y adheridas a portaobjetos recubiertos
con gelatina.

PROCEDIMIENTO
II. DESPARAFINACIN E
HIDRATACIN
1. 2 veces x10 min en xileno para desparafinar.
2.
3.
4.
5.
6.

2 veces x10 min en etanol 100


10 min en etanol 96
10 min en etanol 80
5.- 10 min en etanol 50
5 min en H2O destilada

PROCEDIMIENTO
III. Tincin
7. cido perydico al 0.5 % durante 5 10 min
8. varios lavados en H2O destilada
9. Reactivo de Schiff durante 30 min
Se puede dar un paso con una solucin de metabisulfito potsico durante 2 minutos para
eliminar los residuos de reactivo de schiff de la muestra, luego 5 min en agua corriente.
10. Varios lavados en H2O destilada
11. 5 min en hematoxilina de Mayer
12. 15 min en agua corriente
13. 2 x 10 min en H2O destilada

PROCEDIMIENTO
IV. Deshidratacin :
14. 5 min en etanol 80
15. 5 min en etanol 96
16. 2 veces x10 min en etanol 100
17. 2 veces x10 min en xileno

V. Montaje :

RESULTADOS

RESULTADOS
Las sustancias PAS (+) tien:
Ncleos
Glucgeno

azul
rojo oscuro, magneta.

Polisacridos simples
Mucopolisacridos neutros
rojo rosa
Mucoprotenas
Glucoprotenas
Glucolpidos

El portaobjetos de extraccin de diastasa (-amilasa) no tendr ninguna tincin PAS


visible de glicgeno, al compararlo con el portaobjetos de control positivo de
glicgeno no digerido.

RESULTADOS
PAS (+):
Las clulas calciformes de los
tractos gastrointestinal y
respiratorio debido a la mucina
producida que se tie de
magenta son PAS positivo

Las membranas basales y los


bordes en cepillo de los tbulos
renales y del intestino delgado
y grueso tambin son PAS
positivo

VENTAJAS Y
DESVENTAJAS

VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Es til para diferenciar o resaltar
algunos tipos celulares y la
distribucin del colgeno entre
clulas neoplsicas.
La especificidad del PAS para la
deteccin
de
hidratos
de
carbono no puede ser aceptada
sin una cualificacin.
PASpuede
arrojar
falsos
positivos en algunas dermatosis
al teir de rojo elementos como
paraqueratosis,
clulas
polimorfonucleares o partculas
de almidn.

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