UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO ACADMICO DE QUMICA BIOLGICA Y FISIOLOGA
ANIMAL

MTODOS INSTRUMENTALES DE ANLISIS

T.1. Agua de uso en el laboratorio. Tipos. Tcnicas de purificacin. Control
de
calidad.
T.2. Soluciones buffer (Amortiguadoras): Definicin. Propiedades.
Regulacin
del pH por una solucin amortiguadora. Buffers ms comunes. Aplicaciones.
Potenciometra: Fundamento. Tipo de electrodos. Medicin del pH.

Ms.C. Patricia Elizabeth Torres Plasencia

EL AGUA DE USO EN EL LABORATORIO

Uno de los reactivos ms comunes usado en el laboratorio y

considerado como disolvente universal es el agua, por lo tanto es de
vital importancia cuidar su pureza. Si se mantiene un control
sistemtico de la pureza o calidad del agua para uso en el laboratorio
se promueve la eliminacin de sesgo en los resultados, se evitan
interferencias o reacciones colaterales y se aumenta as la
confiabilidad en dichos resultados.
En la actualidad los laboratorios deben establecer requisitos de
calidad o pureza, as como mtodos de produccin y anlisis de agua
donde deben establecerse el los procesos para su purificacin.

COMPOSICIN DEL AGUA

El ciclo natural del agua tiene diferentes compuestos que se consideran
impurezas (Tabla 1). Estas impurezas presentes en el agua se pueden
clasificar en tres grandes grupos:
Inicas Disueltas (inorgnicos).
No inicas Insolubles (orgnicos, microorganismos, pirgenos, virus,
partculas en suspensin, coloides).
Gaseosas.

Pirgenos
(lipopolisacridos)
Partculas en
suspensin.

En los laboratorios se requiere usar agua con mnimo de impurezas.

Los requisitos de calidad o pureza se encuentran establecidos en base
a diferentes normas o criterios, dependiendo de las instituciones u
organismos internacionales que establecen las referencias, entre
estas se encuentran la American Society for Testing and Materials
(ASTM), British Standards Institution (BSI) y la International
Organization for Standardization (ISO).

Actualmente estn definidos los diferentes niveles de pureza del agua

en funcin de los parmetros fsico-qumicos, tales como
conductividad elctrica, resistividad, pH, contenido de carbono
orgnico total (TOC), sodio, cloruros y slice, as como microbiolgicos.

http://www.astm.org/Standards/D1193.htm

PARMETROS DE CONTROL DE CALIDAD PARA INDICAR LA

PUREZA DEL AGUA
Resistividad Tendencia
del agua sin iones a
resistirse
a la conduccin de
electricidad.
La unidad de medida es el
megaohmio-centmetro
(M.cm),
abreviado a menudo en M
o
meg.
Se
utiliza
comnmente para el agua
de gran pureza.
El valor mximo terico es
de 18,2 M.cm a 25 C.
Cuanto ms alto es el
contenido inico ms baja
es la resistividad y cuanto
ms bajo es el contenido
inico, ms alta es la
resistividad (un nivel alto
de resistividad es bueno).

Conductividad
Carbono orgnico
Tendencia
total (COT)
del agua con iones
medida de los
a conducir
contaminantes
electricidad.
orgnicos
La unidad de medida
encontrados en el
es
agua.
microsiemens/centm La
unidad
de
etro
(S/cm)
o medida es partes
microhmio/cm.
Se por milln (ppm) o
utiliza para medir el partes
por
mil
agua de suministro o millones (ppb). En el
aguas tratadas de agua de suministro
calidad inferior.
puede oscilar entre
Cuantos ms iones 2 y 5 ppm, y la
hay en el agua, pureza ms alta del
mayor
es
la agua estara entre 1
conductividad.
y
5
ppb.
La
Se mide con un medicin del COT se
Parmetros microbiolgicos
contador
realiza
con
un
de conductividad.
sistema en lnea.

CONDUCTIVIDAD Y RESISTIVIDAD
La conductancia o resistencia elctrica se mide con dos electrodos en
lnea. La corriente elctrica se desplaza por el agua mediante
molculas inicas a modo de escalones en progresin. Cuantos
menos escalones haya, ms difcil es el paso de la electricidad.
Habr, por tanto, menos conductancia elctrica y ms resistencia. La
temperatura del agua tambin afecta a la conductividad/resistividad,
por lo que la lectura estndar se suele realizar a 25 C con
compensacin de temperatura. Utilizamos la resistividad para medir
la concentracin de iones en el agua pura.

0,
1
10

USOS DEL AGUA CLASIFICADA POR ASTM SEGN SUS

CARACTERSTICAS FISICO-QUMICAS
TIPO I
Usada para procedimiento que requieren de mxima exactitud y precisin; tales
como espectrometra atmica, fotometra de llama, enzimologa, gas en la
sangre, soluciones buffer de referencia y reconstitucin de materiales liofilizados
usados como estndares. El agua Tipo I, debe seleccionarse siempre que en la
prueba sea esencial un nivel mnimo de componentes ionizados o cuando se
preparan soluciones para anlisis de rastreo de metales.
TIPO II
Recomendada para la mayora de las pruebas analticas y generales de
laboratorio, tales como los anlisis hematolgicos, serolgicos y microbiolgicos;
as como para mtodos qumicos en los que especficamente no se indique o se
haya comprobado que requieren agua de calidad Tipo I. La ASTM especifica que
el agua Tipo II sea preparada por destilacin y como factor importante
recomienda que est siempre libre de impurezas orgnicas.
TIPO III
Satisfactoria para algunas pruebas generales de laboratorio; para la mayora de
los anlisis cualitativos, tales como uroanlisis, procedimientos histolgicos y
parasitolgicos; para el enjuague de muestras analticas; preparacin de
soluciones de referencia; y para el lavado o enjuague de cristalera (el enjuague
final de la cristalera debe hacerse con el tipo de agua especificado para el
procedimiento realizado).
TIPO IV
Agua con una conductividad final mxima de 5,0 S/cm. Sirve para la

USOS DEL AGUA CLASIFICADA POR ISO 3696: 1987 SEGN

SUS CARACTERSTICAS FISICO-QUMICAS

Grado 1- Exenta bsicamente de contaminantes constituidos

por iones disueltos o coloidales y materias orgnicas. Es
apropiada para los requisitos de anlisis ms exigentes, incluyendo
la cromatografa liquida de alta definicin. Se puede preparar por un
tratamiento adicional del agua de grado 2 (por ejemplo osmosis
inversa o desionizacin seguida de filtrado a travs de una
membrana con tamao de poro de 0,2 m para separar las
partculas, o por redestilacin en un aparato de slice fundido).
Grado 2- Con muy pocos contaminantes inorgnicos,
orgnicos o coloidales. Es apropiada para anlisis delicados,
incluyendo la espectrometra de absorcin atmica (EAA) y la
determinacin de componentes en cantidades mnimas. Se puede
preparar por destilacin mltiple o por desionizacin u osmosis
inversa seguida de destilacin.
Grado 3- Apropiada para la mayora de los trabajos de
qumica en laboratorios por va hmeda y la preparacin de
soluciones de reactivos. Se puede preparar mediante una sola
destilacin, por desionizacin o por osmosis inversa. Salvo indicacin

Obtener agua de buena calidad para los laboratorios, depende de

la seleccin de la tecnologa de purificacin correcta y de un
diseo del sistema que mida y controle de forma precisa las
impurezas. Producir agua pura es slo una parte de la ecuacin; la
validacin de la calidad, el almacenamiento del agua y el
mantenimiento del sistema tambin son claves para asegurar que
tenga la calidad del agua que se necesita.
PROCESOS DE PURIFICACIN DEL AGUA
Existen diferentes calidades de agua y diversas necesidades en
funcin de su uso. En la purificacin existen distintos procesos para
eliminar las impurezas; entre los ms importantes se encuentran:
Filtracin.
Ultrafiltracin.
Destilacin.
Osmosis Inversa.
Adsorcin con carbn activado.
Desionizacin.

FILTRACIN
Existen filtros de profundidad (nominal) y de membrana (absoluto).
Los filtros de profundidad se suelen utilizar en el pretratamiento y
estn hechos de fibras reforzadas que envuelven tubos huecos y ranurados.
Conforme pasa el agua por la matriz de fibra reforzada hacia el tubo central,
las partculas se quedan en las fibras. Este tipo de filtro es el utilizado
tradicionalmente para eliminar la mayor parte de las impurezas de tamao
superior al del poro del filtro. Por lo general, estos filtros se disean para
eliminar las partculas ms grandes (> 1 m) para proteger las tecnologas
posteriores.
A los filtros de membrana se les llama con frecuencia absolutos, ya
que estn diseados para eliminar todas las partculas superiores al tamao
de poro nominal del filtro. Utilizan una membrana (en forma de lmina plana o
fibra hueca) y se suelen utilizar en el extremo del sistema para eliminar
bacterias y otras partculas no eliminadas por los filtros anteriores. Los filtros
de membrana que tradicionalmente se utilizan en los sistemas de agua de
laboratorios tienen un tamao nominal de poro inferior a 0,45 m; con
frecuencia, de 0,2 m.

ADSORCIN CON CARBN ACTIVADO

La adsorcin utiliza el carbono activo con un rea superficial
muy alta para eliminar sustancias orgnicas y cloro del agua
de suministro.
La mayora de los sistemas de purificacin de agua lo utilizan,
combinado con resinas de intercambio inico, como primer o
segundo paso, o incluso como ltimo paso, para alcanzar la mxima
resistividad y un carbono orgnico total (COT) ultrabajo. Las
sustancias orgnicas y el cloro se adhieren a la superficie del
carbono activo y se quedan acoplados al carbono.

DESTILACIN
La destilacin es el sistema de purificacin de agua que por s solo
cuenta con ms capacidad de eliminacin.
La destilacin del agua consiste en separar los componentes basndose en las
diferencias en los puntos de ebullicin. Los compuestos con una presin de
vapor baja tendrn puntos de ebullicin altos y los que tengan una presin de
vapor alta tendrn puntos de ebullicin bajos. Los tipos de destilacin ms
comunes son: La Destilacin Simple, Destilacin Fraccionada y la Destilacin
por Arrastre con Vapor.
Durante el proceso de destilacin, el agua hierve y pasa por distintas fases,
cambiando de lquido a vapor y de nuevo a lquido. En su paso de lquido a
vapor es cuando el agua se separa (en distintos grados) de las impurezas
disueltas en ella, como iones, contaminantes orgnicos, bacterias, pirgenos y
partculas.
La destilacin no basta por s sola para eliminar iones inorgnicos, gases
ionizados, sustancias orgnicas con punto de ebullicin superior a 100 C o
gases no ionizados disueltos.

SMOSIS INVERSA
La smosis inversa es el mtodo ms econmico para eliminar hasta el
99% de los contaminantes del agua de suministro.
Se ejerce presin externa en el lado de la membrana con mayor concentracin
(agua de suministro) para revertir el flujo osmtico natural. As se fuerza el paso
del agua de suministro por la membrana semipermeable, las impurezas se
depositan en la superficie de la membrana y se envan a drenar. El agua que
pasa por la membrana como agua producida, apenas tiene impurezas.
Las membranas para smosis inversa tienen una superficie fina de microporos
que rechaza las impurezas pero permite el paso del agua. La membrana impide
el paso de bacterias, pirgenos y entre el 90 y el 95% de slidos inorgnicos. Los
iones polivalentes se rechazan ms fcilmente que los monovalentes.
La membrana rechaza los slidos orgnicos con un peso molecular superior a
200 Daltons, pero no puede eliminar eficazmente los gases disueltos. La pureza
del agua producida depende de la pureza del agua de suministro. El producto
suele tener entre un 95 y un 99% ms de pureza que el agua de suministro.

DESIONIZACIN
La desionizacin tambin se puede denominar desmineralizacin o
intercambio inico.
El proceso elimina iones del agua de suministro (entre ellos cationes: Na,
Ca, Mg y aniones Cl, SO4 y bicarbonatos (HCO) mediante resinas
sintticas. Son resinas que se alteran qumicamente para que tengan afinidad
con iones inorgnicos disueltos y se clasifican en dos tipos: resinas de
eliminacin (o intercambio) de cationes y resinas de eliminacin de
aniones.
Los iones desaparecen del agua mediante una serie de reacciones qumicas.
Estas reacciones tienen lugar cuando el agua atraviesa los lechos de resina de
intercambio inico. La resina catinica contiene iones de hidrgeno (H+) en la
superficie, que se intercambian por iones con carga positiva. La resina aninica
contiene iones de hidrxido (OH-) en los puntos de intercambio, que se
intercambian por iones con carga negativa. El resultado final de estos dos
intercambios es H+ y OH-, que se combinan para formar agua (H2O).
La desionizacin es la nica tecnologa que alcanza el requisito de
resistividad del agua de tipo 1 con grado de reactivo. En los sistemas de
agua de laboratorio, las resinas catinicas y aninicas se utilizan casi siempre
combinadas para poder alcanzar la mxima pureza inica.

ULTRAFILTRACIN (UF)
En la purificacin de agua, la ultrafiltracin se utiliza para eliminar
pirgenos (endotoxinas bacterianas) y nucleasas, lo que resulta
fundamental para el cultivo tisular, el cultivo celular y la
preparacin de medios.
Para eliminar partculas y macromolculas, los ultrafiltros utilizan la
exclusin por tamao. Por su diseo, funcionan de forma similar a
las membranas de smosis inversa: las partculas quedan atrapadas
en la superficie de las membranas y se eliminan mediante una
corriente de rechazo. Los ultrafiltros se utilizan en el extremo de los
sistemas para garantizar la eliminacin de casi la totalidad de
impurezas macromoleculares como pirgenos, nucleasas y
partculas.
COMBINACIN DE OXIDACIN UV Y ULTRAFILTRACIN
(UV/UF)
El uso conjunto de las tcnicas de oxidacin ultravioleta y
ultrafiltracin con adsorcin y desionizacin en el mismo sistema
permite obtener agua prcticamente sin impurezas. Estas
tecnologas han demostrado su capacidad para eliminar nucleasas,
como las ARNasas y ADNasas, as como pirgenos cuando se han
enfrentado a concentraciones de material conocidas. Los sistemas
de tipo 1 con opciones de UV/UF producen agua con grado de
reactivo con una resistividad de hasta 18,2 M.cm, un COT de entre

TRATAMIENTO DEL AGUA PARA OBTENER AGUA DE ALTA PUREZA

SEGN ASTM 1193: 2001
El agua ultrapura (tipo I), no se puede obtener con un solo proceso de
purificacin, es necesario la combinacin de ms de uno de ellos, para
lograr la calidad deseada de acuerdo a sus caractersticas fisicoqumicas.
Filtracin (del agua de la red de
suministro) filtros de sedimentos y de
carbn activado, (eliminar partculas y el
cloro residual)
smosis inversa (eliminacin de sales
disueltas con una eficiencia de 95 a 98%).

Lecho mixto de resinas catinicas/aninicas

Conveniente reciclar y pasar

continuamente el agua a travs de la
resina mixta (incrementar su calidad).

CONSERVACIN
La contaminacin del agua durante su conservacin puede
aparecer, principalmente, por disolucin de componentes solubles
del vidrio o plstico de los recipientes o por absorcin de CO o de
cualquier otra impureza existente en la atmsfera del laboratorio.
Por esta razn no se recomienda la conservacin de agua de grado
1 y 2, sino que se debe preparar para su uso inmediato, a medida
que se vaya precisando. Sin embargo, el agua de grado 2 se puede
preparar en una cantidad razonable y conservar en recipientes
apropiados, inertes, limpios, hermticos, llenos del todo y que se
hayan enjuagado previamente con agua de calidad similar.
La conservacin del agua de grado 3 presenta pocos problemas,
pero los recipientes y condiciones de conservacin deben ser
iguales para los de grado 2.
Se recomienda que los recipientes se reserven para envasar
exclusivamente agua de un misma grado.

CH3COOH (aq) + H2O (l) H3O+ (aq) + CH3COO Transferencia

(aq)
cido
cido
base
base
protnica
Par cido-base conjugado

ACIDOS Y BASES
Un CIDO es una sustancia capaz de liberar protones (H+) y
una BASE es una sustancia capaz de aceptar protones (H+).
Dentro de esta sencilla definicin, se puede clasificar a los cidos y
bases por su afinidad por el H+:
cidos fuertes: Su afinidad por el H es baja, por lo que, en
solucin, liberan fcilmente H+. El ejemplo tpico es el CIDO
CLORHIDRICO, que se disocia totalmente, de HCl a Cl + H.
cidos dbiles: Su afinidad por el H es alta ya que liberan con
dificultad al H. El CIDO CARBNICO, FOSFRICO, ACTICO, etc. son
cidos dbiles porque no se disocian totalmente y, por lo tanto,
producen MENOS HIDROGENIONES LIBRES que los cidos fuertes.
Bases fuertes: Aceptan con facilidad (tienen alta afinidad) a los
iones hidrgeno.
Bases dbiles: Aceptan con dificultad (tienen baja afinidad) a los
iones hidrgeno.

FUNCIN E IMPORTANCIA BIOLGICA DE LAS SOLUCIONES

BUFFER:
En los organismos vivos, las clulas deben mantener un pH casi
constante para la accin enzimtica y metablica.
Los fluidos intracelulares y extracelulares contienen pares
conjugados cido-base que actan como buffer.
BUFFER INTRACELULAR MS IMPORTANTE:
HPO / HPO
BUFFER SANGUNEO MS IMPORTANTE:
HCO/ HCOOTROS SISTEMAS QUE AYUDAN A MANTENER EL pH
SANGUNEO:
Protenas.
cidos Nucleicos.
Coenzimas.
Metabolitos intermediarios.
Algunos poseen grupos funcionales que son cidos o bases dbiles,
por consiguiente, ejercen influencia en el pH intracelular y ste
afecta la estructura y el comportamiento de tales molculas.

MECANISMO DE ACCIN DE UNA SOLUCIN BUFFER

Para comprender la forma en que un sistema buffer es capaz de
mantener constante el valor de pH, es necesario tener en cuenta: [H]
( [HO]), pH, Ka y pKa
Analizaremos el caso del sistema cido actico/acetato de sodio. La
constante de disociacin del cido actico (Ka) se puede expresar
como:

ECUACIN DE HENDERSON-HASSELBACH (nos permite

determinar el pH de una solucin buffer, conociendo el pKa del

MECANISMO DE ACCIN DE UNA SOLUCIN BUFFER

Caractersticas importantes de una disolucin

amortiguadora
Su pH:
del cido) y de las

, depende del Ka (naturaleza

concentraciones de los componentes en la solucin: [A]/[HA].

Capacidad amortiguadora: Cantidad de cido o base que se
puede agregar a un tampn antes de que el pH comience a cambiar
de modo apreciable. La capacidad reguladora de una solucin es una
medida de la resistencia al cambio de pH que se producira por el
agregado de pequeas cantidades de cidos y /o bases fuertes.
De qu depende?
* Del nmero de moles (concentracin) de cido y sal base y
sal.
(deben ser altos para que la capacidad tambin lo sea).
* Del cociente [sal]/[cido].
(para que la capacidad sea alta, ha de ser prximo a 1.

POTENCIOMETRA
Los mtodos potenciomtricos se basan en la medida de la diferencia
de potencial elctrico (fuerza electrn motriz FEM) entre dos
electrodos: uno de referencia y otro que interacciona con la disolucin
problema (indicador), a partir de la cual es posible establecer la
concentracin de la misma directa o indirectamente.
La potenciometra puede usarse desde dos puntos de vista:
Potenciometra directa, consistente en la determinacin de la
actividad de una especie de forma directa, a travs de la medida de un
potencial elctrico. Ejm: determinacin de HO (pH) u otros.
Valoracin potenciomtrica, para localizar el punto de equivalencia
de una valoracin analtica (volumtrica o culombimtrica) en funcin
del volumen del titulante.

La potenciometra es un proceso electroqumico que se puede explicar

mediante una celda galvnica (o voltaica), en donde se produce una
reaccin redox espontnea, generndose energa elctrica (flujo de
electrones, FEM). El electrodo donde se produce la oxidacin es el
nodo y la reduccin se produce en el ctodo. Una caracterstica
importante de la celda galvnica es la FEM, que corresponde a la
diferencia de los potenciales elctricos de los dos electrodos E ctodo
E nodo = ? E

Las celdas galvnicas,son un

dispositivo
en
el
que
la
transferencia de electrones, (de
la semireaccin de oxidacin a la
semireaccin de reduccin), se
produce a travs de un circuito
externo en vez de ocurrir
directamente entre los reactivos;
de esta manera el flujo de
electrones (corriente elctrica)
puede ser medido.

El instrumental necesario en la potenciometra, incluye un electrodo

de referencia, un electrodo indicador y un dispositivo para medir esa
diferencia de potencial.
Electrodos de Referencia
Aquel cuyo potencial elctrico es conocido, constante en el tiempo e
insensible a la composicin de la solucin que se estudia. Un
electrodo de referencia debe ser fcil de montar, proporcionar
potenciales reproducibles y tener un potencial sin cambios. Los
electrodos comnmente utilizados que satisfacen estos requisitos son:
el Electrodo de Hidrgeno, el Electrodo de Calomel y el Electrodo de
Plata-Cloruro de Plata.

Electrodos Indicadores.
Un electrodo indicador ideal responde de forma rpida y
reproducible a los cambios de actividad del ion analito (presente en
la muestra), es decir su respuesta depende de la concentracin
del analito. Aunque ningn electrodo indicador es absolutamente
especfico en su respuesta, actualmente se dispone de unos pocos
que son marcadamente selectivos. Hay dos tipos de electrodos
indicadores: de membrana y metlicos.
Electrodos Indicadores de Membrana
Existe una gran variedad de electrodos de membrana que permiten
la determinacin rpida y selectiva de numerosos cationes y aniones
por medidas potenciomtricas directas. Debido a su gran
selectividad a menudo se les llama electrodos selectivos de iones.
Tambin se les conoce como electrodos de pIon debido a que su
respuesta se registra generalmente como una funcin p, por ejemplo
pH, pCa, pN0, etc.

DETERMINACIN DEL pH DE UNA SOLUCIN

Para medir el pH de una disolucin podemos emplear dos mtodos,
en funcin de la precisin con que queramos hacer la medida:
Para realizar medidas del pH que no necesiten ser muy precisas
se utilizan unas sustancias llamadas indicadores, que varan
reversiblemente de color en funcin del pH del medio en que estn
disueltas. Se pueden aadir directamente a la disolucin o utilizarlas
en forma de tiras de papel indicador.
Para realizar medidas exactas se utiliza un pH-metro, que mide el
pH por un mtodo potenciomtrico.

Mtodo potenciomtrico: Como electrodo indicador se utiliza el:

Electrodo de vidrio
El electrodo de vidrio es un electrodo indicador de membrana
selectivo a iones hidronio (HO) y constituye la pieza
fundamental en la medicin potenciomtrica del pH. Su uso se
encuentra ampliamente difundido ya que hasta el momento no se
conoce otra tcnica tan precisa como esta.
El cuerpo de los electrodos de vidrio est formado por un tubo de
vidrio (o plstico) no conductor y un bulbo sensible a iones
HO(membrana). En su interior hay un electrodo de referencia
interno que no es sensible a los cambios de pH, por ejemplo Ag/AgCl,
y una solucin de concentracin conocida de iones hidronio.

Actualmente
se
utiliza
un
solo
electrodo
que
condensa los dos
electrodos
anteriores y que se
denomina electrodo
combinado
de
vidrio,
aqu,
se
unen fsicamente el
electrodo de vidrio
y uno de referencia
externo para mayor

Los electrodos de vidrio pueden clasificarse de acuerdo a:

La composicin de su membrana: Diferentes tipos de membrana pueden
hacer que el electrodo sea ms resistente, expandir su rango de
temperaturas o prevenir errores a pH extremos. Existen diferentes tipos de
vidrios utilizados en electrodos comerciales, algunos ejemplos son: vidrio
para propsito general (varios rangos de pH y temperaturas hasta 100C),
vidrio azul (pH de 0 a 13 y temperaturas hasta 110C), vidrio mbar (pH de 0
a 14, temperaturas hasta 110C y bajo error de sodio).
Cuerpo: Electrodos con cuerpo de vidrio (resisten altas temperaturas y
materiales y solventes altamente corrosivos, pero son mecnicamente
frgiles) y Electrodos con cuerpo de Epoxi (son resistentes a los golpes pero
no deben ser utilizados a altas temperaturas ni para compuestos
inorgnicos).
Sustancia de relleno: Recargables (tienen puertos que permiten rellenar la
cavidad con la solucin de referencia y por tanto son econmicos y
duraderos) y Sellados (prcticamente no necesitan mantenimiento, pero
deben ser reemplazados cuando el nivel de la solucin de referencia est
bajo).

USO DEL ELECTRODO DE VIDRIO PARA LA DETERMINACIN DE pH

La base del funcionamiento del electrodo de vidrio es el intercambio
de los H+ de la disolucin con los iones monovalentes del vidrio,
especialmente Na+ Li+ para los vidrios Jena (Optica Karl Zeiss
Alemania, los mejores en su calidad). Este proceso de intercambio
involucra casi exclusivamente a los cationes monovalentes del
vidrio, puesto que los cationes divalentes y trivalentes (por ej. Ca +2
y Al+3) estn fuertemente enlazados a la estructura del silicato del
vidrio.

El mtodo potenciomtrico ofrece numerosas ventajas respecto al

mtodo colorimtrico:
Es ms preciso, ya que permite apreciar diferencias de 0,005
unidades de pH mientras que el mtodo colorimtrico slo aprecia
diferencias de 0,1 unidades de pH.
No se ve afectado por la coloracin que pueda presentar la
muestra, como ocurre con el mtodo colorimtrico.

Acondicionamiento y conservacin de los electrodos

de pH
El electrodo de vidrio no se puede conservar seco. El bulbo debe
estar hmedo en todo momento; de lo contrario, la capa activa se
degrada siendo necesarias algunas horas para restablecer el
equilibrio. El electrodo se puede conservar sumergido en una
solucin de almacenamiento sino en una solucin tampn pH 4 o
pH 7. Es mejor evitar la conservacin del electrodo en soluciones
tampn alcalinas con valores superiores a pH 9.18. Los electrodos de
referencia se conservan en ambientes acuosos, por ningn motivo
en ambientes secos.