Bioqumica Experimental II

Propriedades Qumicas de Glicdios

Prof : Maria Eleonora Andrade de Carvalho

Dayane Faviero
Matheus Francischini
Octavio Lomonaco
Tamara Poletti

 O que so Glicdios ?
Os glicdios, tambm chamados de acares, carboidratos
ou hidratos de carbono so molculas orgnicas
constitudas fundamentalmente de carbono, hidrognio e
oxignio.

Sacarose

Lactose

Os glicdios apresentam estruturas muito parecidas

entre si, dificultando sua identificao, ento o que
se faz caracterizar grupos de glicdios utilizando
suas propriedades qumicas:
1. Desidratao de glicdios em presena de cidos
minerais fortes
2. Poder redutor

Glicose

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios

1. Desidratao de glicdios em presena de cidos

minerais fortes
Reao de Antrona;
Reao de Seliwanoff;
Reao de Bial.
Condensam com:

Substncias Fenlicas
Pentoses

Desidratadas a

Furfural

Aminas Aromticas
+
Tiocompostos
Uria

Hexoses

Hidroximetilfurfural

Formando complexos coloridos

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios
Reao
de Antrona
Reagente de Antrona = Antranol/H2SO4
H2SO4 :
1. Libera energia (calor) suficiente para ocorrer a reao,
2. Hidrlise catalisada de oligo e polissacardeos, convertendo-os a
hexoses e pentoses.
3. Desidrata hexoses e pentoses gerando HMF(hidroximetilfurfural) e
furfural, respectivamente.
Na presena de H2SO4
polissacardeos --> monossacarideo
monossacarideo --> hidroximetilfurfural/furfural
Na presena de antranol
Hidroximetilfurfural complexo verde azulado
Furfural complexo verde azulado que fica vermelho

Procedimentos e Resultados
1) Teste de Antrona:
Em tubos de ensaio foram colocados 0,2 mL das solues de glicose
0,1M, sacarose 0,1M, cido glutmico 0,1M, amido 0,5%, CMC 0,5% e
de gua destilada (para um branco de reao).
Cuidadosamente, adicionou-se 1mL do reagente de antrona (deixando
o reagente escorrer nas paredes do tubo).

Procedimentos e Resultados
Reao de Antrona Resultado obtido

Branco

Glicose

Amido
Sacarose cido
glutmico

CMC

Procedimentos e Resultados

Reao de Antrona

Branco - Colorao sem alteraes.

Glicose Formao de um anel verde azulado, reao muito

rpida

Sacarose Formao de um anel verde intenso.

cido Glutmico No houve formao de anel, por no se

tratar de glicdios.

Amido Formao de um anel verde intenso.

CMC Formao de um anel verde claro com o passar do tempo.

Procedimentos e Resultados
Reao de Antrona
O resultado positivo, intenso e instantneo obtido no teste com
glicose devido ao monossacardeo apresentar alta cintica de
reao, tanto na desidratao quanto com o reagente de antrona. O
teste com sacarose apresentou resultado semelhante devido
rpida hidrlise da sua estrutura de dissacardeo em frutose e
glicose, seguida da mesma seqncia de reaes.
Tanto o amido quanto o CMC so molculas de polissacardeos
que, em meio cido, ocorre a hidrlise em monossacardeos. Desta
maneira o teste se mostrou positivo, porm houve um atraso entre
a adio do reagente e formao do anel azul. Este atraso mostra
que a hidrlise destes polissacardeos lenta frente s etapas de
desidratao e reao com antranol.
O cido glutmico no apresentou colorao por se tratar de um
aminocido, e no reagir com o antranol formando compostos
coloridos.

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios
Reao de Seliwanoff

Feita com Resorcinol em meio HCl, com aquecimento.

Utilizada para diferenciar cetoses e aldoses.

Cetohexoses Colorao vermelha intensa

Aldohexoses Colorao rsea, mais demorada

Procedimentos e Resultados
2) Teste de Seliwanoff
Em tubos de ensaio foram colocados 0,2 mL das solues de
glicose 0,1M, frutose 0,1M, sacarose 0,1M, lactose 0,1M e de
gua destilada (para um branco da reao)
Adicionou-se 1mL do reagente de Seliwanoff a cada tubo, que
foram ento aquecidos em um banho termostato por trs
minutos.

Procedimentos e Resultados

Glicose

Reao de Seliwanoff

Frutose

Sacarose

Lactose

Branco

Procedimentos e Resultados

Reao de Seliwanoff

Branco - Colorao sem alteraes.

Glicose Colorao levemente rosada.

Frutose Colorao vermelho intenso.

Sacarose Colorao vermelho intenso.

Lactose Colorao levemente rosada.

Galactose Aldedo

Frutose Cetona

Glicose Aldedo

Procedimentos e Resultados
Reao de Seliwanof
No teste de Seliwanoff as aldohexoses reagem formando
uma soluo levemente rsea, o que foi confirmado no teste
com glicose. As cetohexoses reagem formando uma soluo
vermelha, resultado apresentado pela frutose.
Neste teste, quando dissacardeos so testados, por se
tratar de um meio cido e a reao se dar a quente, ocorre a
hidrlise e o resultado obtido ser dos monossacardeos
integrantes. No caso da sacarose, o resultado foi vermelho,
indicando a presena de uma cetohexose, especificamente
frutose. O resultado da aldohexose fica encoberto pelo
vermelho proveniente da reao da frutose com o resorcinol.
O teste realizado com lactose apresentou colorao
levemente rsea, apresentando apenas aldohexoses. Resultado
coerente com a constituio da lactose: glicose e galactose;
somente aldohexoses.

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios
Reao
de Bial
Feita com Orcinol em meio HCl, com aquecimento.
Utilizada para identificao de pentoses e alguns cidos urnicos

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios
Reao
de Bial
Em tubos de ensaio colocou-se 0,5mL de solues de
glicose 0,1M, arabinose 0,1mL, cido poligalacturnico
0,1mL, furfural 2,3 g/mL e de gua destilada (para um
branco da reao).
Adicionou-se 1mL do reagente de Bial e aqueceu-se os
tubos em banho termostato a 100C por 2 minutos.

Procedimentos e Resultados

Branco

Glicose

Reao de Bial

cido
Furfural
Arabinose
Poligalacturnico

Procedimentos e Resultados
Reao de Bial

Branco Colorao sem alteraes.

Glicose Hexose, praticamente no muda de colorao.

Arabinose Aldopentose, Colorao verde intensa.

cido Poligalacturnico Hexose, Colorao marrom.

Furfural Pentose, Colorao azul escura.

Procedimentos e Resultados
Reao de Bial
O furfural, proveniente da desidratao das pentoses pelo
reagente de Bial, quando na presena dele, formam compostos
de colorao verde. Tal fato se comprova pelo aparecimento
dessa cor nas solues de Arabinose, Ac. Poligalacturnico e a
do prprio furfural, cuja colorao apareceu imediatamente,
pois ele o composto que reage dando a cor verde.
J na desidratao de hexoses pelo reagente leva a um
produto chamado hidroximetilfurfural, que na presena do
reagente de Bial, d uma cor amarelo-marrom soluo.

Tcnicas de Caracterizao de
Poder Redutor
Glicdios
Teste de Benedict;
Teste de Barfoed modificado.

cares podem ter funes aldedos e cetonas, que reagem com o Cu+.

erentes hexoses sero mais ou menos reativas, gerando xido cuproso, de forma
poder redutor ser a medida da proporo entre a concentrao
cdios e xido cuproso formado.

oder redutor medido de diferentes formas: Colorimetria e Gravimetria.

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios
Teste de Benedict

Consiste de uma nica soluo onde esto presentes

ons de Cu+2, citrato e carbonato de sdio.

As transformaes intermedirias no so completamente parecidas, mas fora

identificados produtos como cido metassacarneos e osonas.

Procedimentos e Resultados

Branco

Glicose

Teste de Benedict

Frutose

Sacarose

Lactose Amido

Procedimentos e Resultados

Teste de Benedict

Branco No houve mudana de colorao.

Glicose Formao de precipitado vermelho.

Frutose Formao de precipitado vermelho.

Sacarose No houve mudana de colorao.

Lactose Formao de precipitado vermelho.

Amido No houve mudana de colorao.

Todos os monossacardeos reagem no teste de Benedict, um

dissacardeo depende da presena de uma extremidade
redutora, como o caso da Lactose.

Procedimentos e Resultados
O teste se mostrou positivo para frutose, glicose e lactose, o
que condiz com a realidade, uma vez que ambos so aucares
redutores, ou seja, possuem carbono anomrico livre.
A lactose apresenta uma extremidade redutora por ser um
dissacardeo formado por duas aldohexoses ligadas por ligaes
1-4, sendo o carbono anomrico da glicose o livre.

Na sacarose os dois carbonos anomricos se ligam em ligaes

1-2. No caso do amido, as longas cadeias de glicose
apresentam poucas extremidades redutoras, dando resultado
negativo para o teste.

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios
Teste de Barfoed modificado
Oxidao do glicdio com ons Cu+2 em meio alcalino
ou cido.
Diferenciao entre monossacardeo e dissacardeos
redutores.

Monossacardeos Produto de colorao azul

Procedimentos e Resultados
Teste de Barfoed modificado
Em tubos de ensaio foram colocados 2mL das solues de
glicose 0,1M, lactose 0,1M, sacarose 0,1M e de gua
destilada.
Adicionou-se 0,5mL da soluo 1 de Barfoed, aqueceu-se os
tubos em banho termostato a 100C por 30 segundos.
Aps resfriar, adicionou-se 0,5mL da soluo 2 de Barfoed e
agitou-se levemente os tubos de ensaio para misturar os
reagentes.

Procedimentos e Resultados
Teste de Barfoed modificado

do a problemas com o reagente, deve-se prever os resultados do teste de Barfoe

que deveria ter acontecido?
Glicose Monossacardeo Azul
Lactose Dissacardeo (glicose + galactose) Azul plido
Sacarose Dissacardeo (glicose + frutose) Azul plido

Ilustrao de
como deveria
ficar:

Procedimentos e Resultados
Teste de Barfoed modificado
Neste
teste
somente
os
monossacardeos
redutores
apresentariam colorao azul aps o procedimento. Isto
aconteceria devido reao com o cido fosfomolibdico.
O mesmo tambm aconteceria com dissacardeos redutores,
porm o tempo de reao consideravelmente maior. No teste
realizado, somente a glicose apresentaria resultado positivo.

Tcnicas de Caracterizao de
Glicdios
Teste
com Iodo
Teste de Identificao do amido
Complexo colorido
Amido + I2
+ Iodo
Amido
Amilopectina
Amilose
+ Iodo

Complexo Avermelhado
Complexo Azulado

Mtodo pode ser utilizado para medir o

grau de ramificao da cadeia

Procedimentos e Resultados
Teste com Iodo
Em tubos de ensaio colocou-se 2mL das suspenses de amido
0,5%, dextrina 0,5%, CMC 0,5%, agar 0,5% e de gua destilada.
Adicionou-se 0,1mL da soluo de Lugol.

Procedimentos e Resultados
Teste com Iodo

Branco

Amido

Dextrina

CMC

gar

Procedimentos e Resultados

Teste com Iodo

Branco No houve alterao da colorao.

Amido Aparecimento de cor azul.

Dextrina Aparecimento de cor roxa.

CMC No houve mudana aparente.

gar No houve mudana aparente.

Procedimentos e Resultados

Teste com Iodo

O teste com iodo permite identificar cadeias de glicose com ligao

1-4. Cadeias pequenas apresentam colorao rsea/amarelada,
que foi o caso da dextrina. Cadeias com alto grau de amilose
apresentam colorao azul intensa, que foi observado no teste com
amido.
O CMC no apresenta afinidade com o I2, no apresentando
formao do complexo colorido. O Agar um polmero de
galactose, anlogo ao amido, porm no apresenta afinidade com
I2.