Paulo Edson

Fernandes
paulofernandes@live.
com

BIOTECNOLOGIA FARMACUTICA
Aula 06

Mtodos de determinao de biomassa

Trabalho Semanal
Pequeno questionrio semanal
Pesquisas simples de conceitos e aplicaes
prticas
50% da 1 V.A. - Aprox. 8 trabalhos
Entrega no dia = 100% da nota;
Entrega atrasada = 80% da nota.
Essa semana:
Cite 9 microrganismos e seus principais
produtos biotecnolgicos.
1 VA 8 Noturno 30/09/2013

O que a Biomassa?

Qualquer matria orgnica que possa ser

transformada em energia mecnica,
trmica ou eltrica classificada como
biomassa.

O que a Biomassa?

De acordo com a sua origem, pode ser:

Florestal (madeira, principalmente);

Agrcola (soja, arroz e cana-de-acar, entre

outras)

Rejeitos Urbanos e Industriais (slidos ou lquidos,

como o lixo).

O que a Biomassa?

Os derivados obtidos dependem tanto da

matria-prima utilizada (cujo potencial
energtico varia de tipo para tipo) quanto
da tecnologia de processamento para
obteno dos energticos.

Biomassa Microbiana
Parte viva da matria orgnica do solo,
composta por todos os organismos menores
que 5.10-3 mm3 Fungos, bactrias,
actinobacterias, leveduras e microfauna
- (protozorios)
Cerca de 98% do C-orgnico do solo
matria orgnica morta
- 2% do C-orgnico do solo composto pela
frao viva. 5 a 10% - Razes
15 a 30% - Macrofauna
60 a 80% - Microrganismos
(1 a 5% da MOS total)

BIOMASSA

Interesse Farmacutico

Biomassa microbiana ou protena obtida de

processos nos quais algas, leveduras, bolores
ou bactrias so produzidos em larga escala, e
utilizados como complemento em alimentos e
em rao animal.

Single-Cell Protein (SCP)

As leveduras contribuem com cerca de 5% do

total de protenas no po (possuem alto teor de
lisina);
At 1914, cerca de 10.000 ton de levedura seca
eram utilizadas como rao;
Interesse aumentou durante a 2. Guerra
mundial, quando houve escassez de alimentos,
estimulando a produo industrial de Candida
utilis a partir de hidrolisados de madeira e licor
sulfitico.

Vantagens da SCP

Possibilidade de converso de resduos

agrcolas e agroindustriais em alimento e
rao;
Produo independe de condies climticas e
sazonalidade;
Alta e rpida taxa de crescimento;
Alto teor protico.

Biomassa Microbiana

Substratos mais utilizados so acares ou

materiais amilceos que podem ser hidrolisados
por enzimas:

Melao de cana, soro de queijo, amido de gros, licor

sulftico, hidrolisados de madeira, vinhaa, bagao e
cascas de frutas, metanol, efluentes industriais...

Necessidades nutricionais: carbono, nitrognio,

fsforo, vitaminas, minerais.
Relao substrato/nutriente importante, pois
o crescimento da biomassa dependente da
disponibilidade do nutriente.

Produo de Biomassa
Microbiana

So convertidos por multiplicao celular em:

Produo de Biomassa
Microbiana

Composio qumica dos microrganismos:

Biomassa Microbiana Vantagens

Tempo de gerao curto:

Bactrias: 30 min a 2 h;
Leveduras: 1 a 3 h;
Algas: 2 a 6 h;
Fungos filamentosos: 4 a 12 h.
Elevado teor de vitaminas;
Alto contedo protico;
Variedade de fonte de carbono utilizada;
Facilidade em realizar alteraes genticas;
Instalaes relativamente baratas;
Independe de fatores climticos.

Biomassa Microbiana
Aplicaes

Protena para alimentao humana ou animal.

Biomassa Microbiana
Aplicaes

Indstria de alimentos (ex. fermento biolgico).

Biomassa Microbiana
Aplicaes

Medicamentos:
Probiticos;
Antibiticos;
Suplementos.

Biomassa Microbiana
Etapas

Biomassa Microbiana Processo

Cultivo do microrganismo:

Esterilizao;
Aerao;
Equipamento;
Forma de Conduo.

Recuperao da Biomassa:

Centrifugao (Leveduras e Bactrias);

Filtros rotatrios (Fungos Filamentosos);
SecagemQuebra da parede celular (para SCP).

Microrganismos Ideais

No ser patognico;
Valor nutritivo (para SCP);
No formar compostos txicos;
Baixo custo de produo:

Velocidade de crescimento;
Contedo protico;
Suplementao de nutrientes;
Meio de cultura;
Separao e secagem.

Microrganismos Ideais Bactrias

Bactrias:

Alta velocidade de crescimento

Extensa variedade de fontes de carbono
Contedo protico alto
Perfil de aminocidos bom; ricas em cistina e
metionina
Recuperao da biomassa
Contedo de cidos nuclicos elevado
Possibilidade de produo de endotoxinas (Gram -)

Gneros
mais
utilizados:
Bacillus,
Hydrogenomas, Methanomonas, Methylomonas,

Biomassa Microbiana Processos

Bactrias:

Substratos: hidrocarbonetos, Metanol

Processos:

Chia Yee Solvent Works (Taiwan, 1963)

Pseudomonas: Substrato: Hidrocarbonetos parafnicos;
T = 36-38C; pH = 7,0;
Em contnuo: clulas com 73,6% de protena;
Separao em centrifuga,
Secagem em tambor;
Remoo de leo com solvente;
Moagem em moinho.

Biomassa Microbiana Processos

Processos:

Esso Research and Engineering Co. (1968)

Pseudomonas;
Substrato: Hidrocarbonetos purificados (retirada
dos aromticos);
T = 25-40C;
Separao por centrifugao, decantadores ou
filtros;
Secagem em spray-drying;

Microrganismos Ideais Fungos

Fungos Filamentosos:

Alta contedo protico

Perfil de aminocidos bom; baixo AA sulfidrilados

Os cogumelos constituem um dos mais antigos

alimentos humanos.
Gneros: Fusariume Rhizopus em cultivos
submersos foram usados como alimento
humano durante a 2 guerra mundial.
Micoproteina: aprovado pelo governo ingls
para consumo humano.

Microrganismos Ideais Fungos

Alto contedo de cidos nuclicos.

Alguns produzem compostos txicos.
Crescimento mais lento que leveduras
bactrias.
Matria-prima amilcea (mais cara).

Microrganismos Ideais Fungos

Leveduras de panificao:
Levedura prensada:

Adio de emulsificantes (leos vegetais) para

dar consistncia desejada e adio de lcoois
(etlico, proplico, isoproplico) ou amido de cereal
para proteo contra contaminaes.

Levedura seca ativa:

8% de umidade;
Clulas so secas em condies controladas de
temperatura e umidade de modo que as enzimas
no sejam deterioradas.

Microrganismos Ideais Fungos

Levedura alimentar:
S. cerevisiae e C. utilis so propagadas em
diferentes substratos e comercializadas como
fonte de protenas e vitaminas do complexo B
para suplementao humana ou raes
animais.
As leveduras resultantes dos processos
exclusivamente destinados a sua propagao
so denominados leveduras 1s, enquanto que
as obtidas como subprodutos de outra indstria
so denominadas leveduras 2s (recuperadas

Microrganismos Ideais Fungos

Levedura alimentar:
Componentes da levedura:

Protena > 45%

Gordura 2%
Fibras 2%
Cinzas 7-8%
Ca 0,1 0,5%
P 1,5%
Tiamina (Vit. B1) 6 a 100 mg/kg
Riboflavina (Vit. B2) 10 a 50 mg/kg

Microrganismos Ideais Algas

Algas tm sido usadas como alimento humano

desde tempos imemoriais.

Baixo custo de produo;

Alto contedo protico;
Alta digestibilidade;
Teor balanceado de aminocidos;
Alto teor de vitaminas (tiamina,
cobalamina) e carotenides.

riboflavina,

Gneros: Chlorella, Scenedesmuse Spirulina.

Microrganismos Ideais Algas

Meio
de
cultivo
fotoautotrfico)

(quimioautotrfico

ou

gua do mar
Lagos salinos
guas oriundas de sistemas de tratamento de
efluentes
Meio de cultivo sinttico (NaHCO3; K2HPO4;
NaNO3; NaCl; MgSO4.7H2O; FeSO4.7H2O; K2SO4;
CaCl2.2H2O; soluo de micronutrientes)

No precisa esterilizar e sem controle de

temperatura.

Biomassa Microbiana Processos

Algas - Processo de produo:

Batelada simples em lagos abertos;
Boa quantidade de iluminao;
Profundidade 20 a 30 cm.

Biomassa Microbiana Processos

Algas Recuperao:

Centrifugao/Coagulao
(baixa
densidade
celular);
Filtrao rotativa;
Secagem (Baixa presso, spray drying, ao sol,
secagem em camadas de areia).

Quantificao Celular

Mtodos Diretos
Determinao do nmero de clulas:

Contagem ao microscpio;
Contagem de colnias formadas;
Nmero mais provvel (NMP);
Contagem eletrnica (Contador Coulter, Citometria
de fluxo).

Determinao da biomassa microbiana:

Peso Seco;
Turbidimetria;
Volume de Centrifugado;

Quantificao Celular

Mtodos Indiretos
Constituintes celulares:

Concentrao total de N ou C;
ATP;
DNA, RNA;
Contedo protico.

Dosagem de elementos do meio de cultura:

Substrato;

Consumo de O2;

Produo de CO2.