Transporte de RNAs al citoplasma

Una labor de Importinas

Araceli Mejia Salvador

8-Agosto-2013

El transporte ncleo-citoplasmtico es
realizado
mediante
una
familia
de
transportadores-receptores
que
interaccionan con RNAs y con el complejo
nuclear.

Importinas Heterodimero formados por

dos subunidades y .
Exportinas

Utilizando una combinacin de tcnicas:

Cristalografa de rayos X
Estudios de mutagnesis
Presentaron Pruebas
Ultracentrifugacin analtica

Ensayos in vivo

Importina- y importina-,

Desempean un papel clave en la regulacin de la unin

de la ARN cubiertos por el CBC en las clulas.

Se

El
El ARNm
ARNm

modifican
como
resultado de la adicin

Esencial
Esencial para
para el
el reconocimiento
reconocimiento y
y
la
la unin
unin de
de dos
dos protenas
protenas de
de unin
unin
al
al ARN
ARN

Protena
Protena
eIF-4E
eIF-4E

CBC
CBC

eIF-4F

eIF-4E
eIF-4E
eIF-4G

Es crucial
Subunidad ribosomal menor
reconozca el extremo 5 del ARNm
Bsqueda de codn de inicio y
traduccin de protenas.

eIF-4A

La unin entre el ARN cubierto y el eIF-4E es bajo estricta

regulacin del factor de crecimiento

Depende de la
fosforilacin de una
familia de protenas

Lo que aumenta su
afinidad por la
cubierta

Unin
Regular

eIF-4E

Desencadena
liberacin

Se

El
El ARNm
ARNm

modifican
como
resultado de la adicin

Esencial
Esencial para
para el
el reconocimiento
reconocimiento y
y
la
la unin
unin de
de dos
dos protenas
protenas de
de unin
unin
al
al ARN
ARN

Protena
Protena
eIF-4F
eIF-4F

CBC
CBC

CBC
CBC

Heterodmero
Heterodmero

Se une a ARN
mediante ciertos
factores

Subunidad de 20
kDa
(CBP20)

Es un elemento
importante durante los
diferentes aspectos del
procesamiento de ARN

Subunidad
reguladora de 80
kDa (CBP80)

La
La exportacin
exportacin de
de ARNm
ARNm al
al citoplasma.
citoplasma.

Worch R, et al. Sugieren que el CBC tiene una afinidad

por el ARN que el eIF-4E.

Mediante
Uso de fluorescencia
Resonancia de
plasmn superficial

Compararn
Cintica de las interacciones
7-metil-guanosina+eIF-4E
v/s
7-metil- guanosina+CBC

La asociacin de transcritos de ARN unidos a CBC estaban

fuertemente a favor de estas consideraciones
termodinmicas y dinmicas.
La concentracin celular de eIF-4E era en comparacin con
la del CBC

Se trato de entender cmo las importinas confieren

estos efectos reguladores sobre el CBC.
Construccin
Construccin
anlogo
anlogo
Importina-
Importina-

ImportinaImportina

Suprimido
Suprimido el
el
dominio
de
unin
dominio de unin
importina-
importina-

CBC(CBP80+CBP20)+ Importina-

Hubo ciertos contactos clave con CBP20 implicados en la unin

del RNA que no se llevaron acabo.

Lo que llev a considerar que importina- podra estar

jugando este papel en el tetrmero:
CBP80+CBP20+importin-+ importin-

La importina- podra desplazar los RNA cubiertos

mediante su unin a las regiones sobre CBP20?
Discernir el desencadenamiento de Importina-

Tener
Tener un
un efecto
efecto
estabilizador
estabilizador en
en loop
loop
2-3
2-3 de
de CBP20
CBP20

La
La mutacin
mutacin
en
en CBP80
CBP80

Surco
Surco de
de unin"
unin"
ros
interacta
1
interacta 1ros 14
14
residuos
de
CBP20
residuos de CBP20

Afecta
Afecta +
+ las
las interacciones
interacciones entre
entre Tyr20
Tyr20 y
y Tyr43
Tyr43
de
CBP20
y
el
anillo
de
metil
guanosina
de CBP20 y el anillo de metil guanosina de
de la
la
estructura
de
la
tapa
del
RNA.
estructura de la tapa del RNA.

Importina-
Determin 14 residuos de aminocidos
Determin 14 residuos de aminocidos
N-terminales y los residuos C-terminales
N-terminales y los residuos C-terminales
126-156 de CBP20 son puntos de contacto
126-156 de CBP20 son puntos de contacto
crticos para unin importin .
crticos para unin importin .

v/s

REGULACIN DEPENDIENTE DE IMPORTINAS

Seal Localizacin
Complejo
deficiente
RNA

Hidrlisis Ran-GTP

IPO8 Importina 8
Componente importante del complejo de protena Ago
humanas.
Modula localizacin nuclear de Ago2
El agotamiento de Importina 8 interfiere con los miARN
guiando as a un silenciamiento de los genes.
Se considera: Factor de especificidad en la va de los genes
que puede cumplir funciones adicionales en la importacin Ago
nucleares.