Instituto Politcnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias

Biolgicas
Departamento de Microbiologa
Microbiologa General
Tincin de Ziehl-Neelsen
Equipo 4

Fundamento de la tincin de
Ziehl-Neelsen

Esta tincin demuestra la capacidad de bacterias

teidas deresistir a la decoloracin por cidos y
alcoholes. Esto se correlaciona con su alto contenido
en lpidos de su pared celular y presencia decidos
miclicosque aumentan el carcter hidrfobo.

Se utiliza para diagnosticar bacterias del genero

Mycobacterium y algunas especies de Nocardia,
Corynebacterium y Actinomycetes.

Interpretacin de la tincin

Las bacterias que resisten la decoloracin son de color rojo y las que no, se
ven de color azul ya que se utiliza azul de metileno como tincin de contraste.

Cmo sucede?
La

tincin de Ziehl-Neelsen requiere

calentamiento para que el colorante
atraviese la pared bacteriana que contiene
ceras. Al suspender el calentamiento y
enfriar con agua, provoca una nueva
solidificacin de lo cidos grasos de modo
que el colorante ya no puede salir de las
bacterias.

Procedimiento.

Realizar un frotis con

la cepa problema.

Realizar un frotis con la

cepa problema.

Filtrar la fucsina
fenicada antes de
cubrir por completo el
porta objetos con
esta.

Colocar el porta
objetos en un puente
para poder calentarlo
suavemente hasta la
emisin de vapores.

Pasados 5 min. despus de la

emisin de vapores se lava al
chorro de agua para eliminar el
exceso de fucsina( lavar ambas
caras).

Cubrir la superficie del frotis con

alcohol-cido efectuando un
movimiento de vaivn por 2 min. Hasta
que el alcohol-acido arrastre suave y
completamente la fucsina.

Lavar con un chorro suave de

agua.

Cubrir el frotis durante 1 minuto

con azul de metileno.

Lavar ambas caras del frotis con un chorro

suave de agua y dejar secar.

Una vez seco se procede a observar al

microscopio.

Resultados por grupo

equip
o
1

2
3
4
5
6
7

Microorganismos

forma

agrupaci
n

Acido-alcohol
resistente

Mycobacterium phlei

bacilos

aislados

Positivo

Staphylococcus
aureus
Mycobacterium
phlei

cocos

racimos

negativo

bacilos

aislados

Positivo

Staphylococcus
Mycobacterium
aureus
phlei

cocos
bacilos

racimos
aislados

negativo
Positivo

Staphylococcus
Mycobacterium
aureus
phlei

cocos
bacilos

racimos
aislados

negativo
Positivo

Staphylococcus
Mycobacterium
aureus
phlei

cocos
bacilos

racimos
aislados

negativo
Positivo

Staphylococcus
Mycobacterium
aureus
phlei

cocos
bacilos

racimos
aislados

negativo
Positivo

Staphylococcus
Mycobacterium
aureus
phlei

cocos
bacilos

racimos
aislados

negativo
Positivo

Staphylococcus

cocos

racimos

negativo

Equipo 6
M. phlei

Equipo 5
S. aureus

Equipo 5
M. phlei

Discusin

Todos lo resultados obtenidos son iguales a los reportados en la

bibliografa. No existieron variaciones en el trabajo desarrollado
en el laboratorio.

Conclusin

Esta tcnica es muy importante para la diferenciacin de

bacterias y para el diagnstico de enfermedades como la
tuberculosis o la lepra.

Referencias Bibliogrficas.

Brock, Biologa de los microorganismos. Madigan, M.;

Martincko, J.; Parker, J. Ed. Pearson Prentice Hall, 10ma edicin,
Southern Illinois University, EUA, (2004), Pp. 412-413.

Microbiologa Clnica Practica. Martos, P. y co. Ed. Servicio

Publicaciones, 2da edicin, Colombia (1994), Pp. 43-44.

Microbiologia Estomatologica. Negroni, M. Ed. Medica

Panamericana, 2da edicion, Argentina. Pp. 547-549.