Medios de cultivo

mas utilizados en
Microbiologa Clnica
Universidad Autnoma de
Ciudad Jurez
Laboratorio de Microbiologa 1
M.C. Georgina Escudero
Hermosillo
Chvez Guerrero Erika Margarita
128112
Fernndez Castillo Gabriel 133356
Mora Murillo Laura Argelia 133262
Robles Garca Shayra Paola 128941
Sandoval Cervantes Hctor Edwin
128236

Contenido
Que es un medio de cultivo
Constituyentes de los
medios de cultivo
Tipos de medios de cultivo
agar nutritivo
agar sangre
Agar C.L.E.D
Agar S.S,
Agar kligler
medio de loeffler
Agar hektoen
Agar
C.P.S. ID3
Agar Mueller-hinton,
Agar tripticasa de soja,
Agar chapman o manitol
salino
Agar desoxicolato citrato
lactosa sucrosa (DCLS)

Agar baird-Parker
Agar levine o EMB
Agar cetrimida-King
Agar Schaedler
Agar Gardnerella
Agar BCYE (buffer charcoal
yeast extract)
Agar lowenstein-Jensen
Agar yersinia CIN
Agar Mc conkey,
Agar TCBS (tiosulfato citrato
bilis sacarosa)
Agar chocolate
Agar thayer martin o new york
Agar Skirrow
Agar sulfito de bismuto
Agar sangre brucella heminamenadiona
Agar sabourand
Agar campylosel

Medios de
cultivo

Que son

Constituyente
s de los
medio de
cultivo

Tipos de
medios de
cultivo

Medios de
cultivo
comunes

Por su
consistencia

Por su
composicin

Segn su
origen

Medios de cultivo
Conj.
nutrientes

Fac. de
crecimiento

Otros
component
es

Crean las
condiciones
necesarias para
el desarrollo de
los
microorganism
os.

PARA QUE LAS BACTERIAS CREZCAN

ADECUADAMENTE EN UN MEDIO DE CULTIVO
ARTIFICIAL, DEBE REUNIR UNA SERIE DE
CONDICIONES:

Tempera
tura

Grado
Humeda
d

Presin
de O2
adecuada

Grado
acidez o
alcalinida
d correcto

Nutrient
es

Factores
de crec.

Exento
microorga
nismos
contamin
antes.

Constituyentes de los medios

de cultivo

Tipos de medios de cultivos

Por su composicin:

Segn su origen:

Medios de
cultivo comunes

AGAR
NUTRITIVO

MEDIO USUAL (NUTRITIVO)

ES UN MEDIO SOLIDO QUE SE PREPARA
AADIENDO 12G DE AGAR-AGAR A UN CALDO
USUAL
PH CASI NEUTRO (6.8) A 25 C.

 ES MUY TIL PORQUE PERMANECE SOLIDO INCLUSO A RELATIVAS

ALTAS TEMPERATURAS.

ESTE MEDIO ES BASTANTE BUENO PARA EL CULTIVO DE

GRMENES QUE NO PRESENTAN EXIGENCIAS PARTICULARES. NO
ES DIFERENCIAL.

INTERPRETACIN
EL CRECIMIENTO BACTERIANO EN ESTE AGAR LO
HACE EN LA SUPERFICIE, POR LO QUE SE
DISTINGUEN MEJOR LAS COLONIAS PEQUEAS.
EN UN CALDO DE NUTRIENTES, LA BACTERIA CRECE
EN EL LQUIDO, Y APARECE COMO UNA SUSTANCIA
ESPESA, CON COLONIAS DIFCILMENTE
OBSERVABLES.

 CRECIMIENTO DE
STAPHYLOCOCCU
S EPIDERMIDIS
AGAR NUTRITIVO

 BACILLUS CEREUS
(LECHE DE CERDA)

AGAR SANGRE

PREPARACIN
Formula (en gramos por litro)
Infusin de musculo de
corazn

375.0

Peptona

10.0

Cloruro de sodio

5.0

Agar

15.0

pH final: 7.3 0.2

INDICACIONES

 LA SANGRE UTILIZADA COMO ADITIVO A ESTOS MEDIOS SUELE

LA SANGRE UTILIZADA COMO ADITIVO A ESTOS MEDIOS SUELE
SER SANGRE DE CARNERO DILUIDA AL 5%, PERO EN ALGUNAS
SER SANGRE DE CARNERO DILUIDA AL 5%, PERO EN ALGUNAS
OCASIONES ES NECESARIO UTILIZAR SANGRE DE OTRAS
OCASIONES ES NECESARIO UTILIZAR SANGRE DE OTRAS
ESPECIES (CABALLO, CONEJO, HUMANA), PUES FACILITAN LAS
ESPECIES (CABALLO, CONEJO, HUMANA), PUES FACILITAN LAS
REACCIONES HEMOLTICAS O CONTIENEN DETERMINADOS
REACCIONES HEMOLTICAS O CONTIENEN DETERMINADOS
FACTORES DE ENRIQUECIMIENTO O NO POSEEN SUSTANCIAS
FACTORES DE ENRIQUECIMIENTO O NO POSEEN SUSTANCIAS
INHIBIDORAS DEL CRECIMIENTO DE DETERMINADOS GRMENES.
INHIBIDORAS DEL CRECIMIENTO DE DETERMINADOS GRMENES.

COLONIAS
ES UN MEDIO ENRIQUECIDO QUE SE UTILIZA ADEMS PARA LA
INVESTIGACIN DE LOS DIVERSOS TIPOS DE HEMLISIS(, SS GAMMA ). SE
UTILIZA PARA EL CRECIMIENTO DE ESTREPTOCOCOS
STAPHYLOCOCCUS
I.

AUREUS

II.

PYOGENES

III. PNEUMONIAE ATCC 6305

IV. PNEUMONIAE ATCC 49619
. E. COLI

 ES UN MEDIO SELECTIVO PARA

ENTEROBACTERIAS POR SU CONTENIDO EN
SALES BILIARES. EN SU COMPOSICIN LLEVA UN
AZCAR (LACTOSA) Y UN INDICADOR (ROJO DE
METILO) QUE LO CONVIERTEN EN UN MEDIO
DIFERENCIAL.
LOS GRMENES QUE FERMENTEN LA LACTOSA
PRODUCEN UNA ACIDIFICACIN DEL MEDIO QUE
HACEN APARECER DE COLOR ROJO FUERTE A
LAS COLONIAS RESULTANTES. LAS COLONIAS
LACTOSA NEGATIVAS SERN INCOLORAS,
APARECIENDO DEL MISMO COLOR QUE EL MEDIO
SUBYACENTE (NARANJA).

 DERECHA:
STAPHYLOCOCCUS E
IZQUIERDA:
STREPTOCOCCUS

C.L.E.D

La cistina
Permite el desarrollo
De enterobacterias

EL MEDIO C.L.E.D. DENOMINADO AS POR SUS

SIGLAS CISTINA LACTOSA ELECTRLITO
DEFICIENTE.
EST RECOMENDADO PARA EL RECUENTO E
IDENTIFICACIN PRESUNTIVA DE LOS
MICROORGANISMOS DE LAS VAS URINARIAS.
SU BAJO CONTENIDO EN ELECTROLITOS EVITA
LA INVASIN DE LOS CULTIVOS POR PROTEUS.

FRMULA (POR LITRO)

PREPARACIN

CRECIMIENTO
LA PRESENCIA DE LACTOSA EN SU
COMPOSICIN LE CONFIERE EL CARCTER DE
MEDIO DIFERENCIAL, AUNQUE LA
INTERPRETACIN SEA DIFERENTE AL
ANTERIOR MEDIO POR LA INCORPORACIN
DE OTRO INDICADOR: EL AZUL DE
BROMOTIMOL. LAS COLONIAS LACTOSA
POSITIVAS APARECERN DE COLOR
AMARILLO Y LAS LACTOSA NEGATIVAS LO
HARN CON UN COLOR VERDOSO,
BLANCO O AZULADO.

 CORYNEBA
CTERIUM
STRIATUM
EN C.L.E.D. AGAR

 SPHINGOMONAS
PAUCIMOBILIS EN
C.L.E.D. AGAR

S.S.

FRMULA (EN GRAMOS POR LITRO)

PREPARACIN

INTERPRETACIN
EL AGAR SS ES UN MEDIO SELECTIVO EMPLEADO PARA EL
AISLAMIENTO DE SALMONELLA Y SHIGELLA A PARTIR
DEMUESTRAS FECALES. EL MEDIO CONTIENE SALES BILIARES Y
VERDE BRILLANTE PARA IMPEDIR EL CRECIMIENTO DE
COLIFORMES Y GRMENES GRAM POSITIVOS. LA
PRESENCIA DE LACTOSA Y ROJO DE METILO NOS PERMITEN
DIFERENCIAR LAS COLONIAS QUE FERMENTAN LA LACTOSA
(ROSAS O ROJAS) DE LAS QUE NO LO HACEN (INCOLORAS)

 ES DOBLEMENTE DIFERENCIAL, PORQUE

ADEMS DE INDICARNOS EL
COMPORTAMIENTO DE LOS GRMENES CON
RELACIN A LA LACTOSA, NOS MUESTRA
LOS GRMENES QUE SON CAPACES DE
PRODUCIR CIDO SULFHDRICO, QUE SE
MANIFIESTA COMO UN PRECIPITADO DE
COLOR NEGRO EN EL CENTRO DE LA
COLONIA.

KLIGLER

FRMULA (EN GRAMOS POR LITRO)

g/L
Peptona de carne
Cloruro de sodio
Lactosa
Tripteina
Glucosa
Citrato de hierro y amonio
Tiosulfato de sodio
Rojo de fenol
Agar

13.0
5.0
10.0
10.0
1.0
0.5
0.3
0.025
15.0

pH final: 7.3 0.2

INSTRUCCIONES

Enfriar en pico de
flauta profundo.

 LA LACTOSA Y LA GLUCOSA SON LOS

HIDRATOS DE CARBONO FERMENTABLES. EL
TIOSULFATO DE SODIO ES EL SUSTRATO
NECESARIO PARA LA PRODUCCIN DE CIDO
SULFHDRICO, EL CITRATO DE HIERRO Y AMONIO,
ES LA FUENTE DE IONES FE3+, LOS CUALES SE
COMBINAN CON EL CIDO SULFHDRICO Y
PRODUCEN SULFURO DE HIERRO, DE COLOR
NEGRO. EL ROJO DE FENOL ES EL
INDICADOR DE PH, Y EL CLORURO DE SODIO
MANTIENE EL BALANCE OSMTICO


1-PICO
INTERPRETACIONES
ALCALINO/FON
DO CIDO
(PICO
ROJO/FONDO
AMARILLO):
EL
MICROORGANI
SMO
SOLAMENTE
FERMENTA LA
GLUCOSA.

 2-PICO
CIDO/FONDO
CIDO (PICO
AMARILLO/FO
NDO
AMARILLO):
EL
MICROORGANIS
MO FERMENTA
GLUCOSA, Y
LACTOSA.

ALCALINO/F
ONDO
ALCALINO
(PICO
ROJO/FON
DO ROJO):
EL
MICROORGA
NISMO ES
NO
FERMENTAD
OR DE

 4-LA
PRESENCIA DE
BURBUJAS, O
RUPTURA
DEL MEDIO DE
CULTIVO,
INDICA QUE EL
MICROORGANI
SMO PRODUCE
GAS.

 5-EL
ENNEGRECIMI
ENTO DEL
MEDIO INDICA
QUE EL
MICROORGANIS
MO PRODUCE
CIDO
SULFHDRICO.

MEDIO DE
LOEFFLER

FRMULA G/L DE AGUA DESTILADA:

 MEDIO DE CULTIVO QUE

CONTIENE GLUCOSA Y
SUERO, UTILIZADO PARA
EL AISLAMIENTO DE
CORYNEBACTERIUM
DIPHTHERIAE.

Agar Hektoen
Esta compuesto de la presencia
de tres azcares (lactosa,
sacarosa y salicilina).

Uso

Capaz de detectar
los grmenes
formadores de ss.

Permiten ampliar el
poder diferencial de este
medio.

Se utiliza para facilitar el

aislamiento de las
enterobacterias

COMPONENTE
S

 LAS CUALIDADES DEL AGAR HEKTOEN SE DEBEN A:

Crecimient
o

Inhibicin

Como crecen las Colonias

Las
colonias
de
los
fermentadores de lactosa (E.
coli, Klebsiella, Enterobacter) se
ven de color amarillo-naranja.
Las de los no fermentadores se
ven incoloras.

Como crecen las Colonias

Las colonias de
Salmonella, verdes o
transparentes con un
precipitado negro en el
centro.

Las colonias de Shigella

son verdes o
transparentes.

AGAR C.P.S. ID3

Uso

MEDIO CROMOGNICO
DESARROLLADO POR
BIOMERIEUX.

Altamente selectivo y
diferencial.
Incorpora sustratos
incoloros = productos
con color
(cromognicos) tras
actuar sobre ellos una
enzima especfica.

Cambio de color de
la colonia sobre el
medio:
*Rojo burdeos
*Azul-marrn

CRECIMIENTO DE
COLONIAS

E. coli

P. Mirabilis

Enterococo

AGAR MUELLER-HINTON
Uso

Componentes

Medio utilizado para realizar las pruebas

de
susceptibilidad antimicrobiana en
microorganismos aerbicos.

be
r
so os
b
A xic
t

e
m

s
o
t
li
o
b
ta

Agente solidificante

PROCEDIMIEN
TO

Almacenamient
o:
2-30 C.

Caducidad:
5 aos en
frasco cerrado.

Para que sirve?

*Susceptibilid
ad a
antibiticos.
*Pruebas de
sensibilidad
antimicrobian
a.

AGAR TRIPTICASA DE SOYA

ES UN MEDIO UTILIZADO PARA EL CRECIMIENTO DE
GRMENES EXIGENTES:

PERMITE EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS:

 TIENE UN BAJO POTENCIAL

REDOX QUE, AL AUMENTAR,
SE MANIFIESTA POR UN
COLOR ROSA DEL MEDIO.
RECOMENDADO PARA
CONTROLES DE
ESTERILIDAD.

COMPONENTES

AGAR CHAPMAN O MANITOL SALINO

PERMITE EL CRECIMIENTO DE UN DETERMINADO GRUPO DE
BACTERIAS MIENTRAS QUE INHIBE EL CRECIMIENTO DE
OTRAS.
Es importante en el
laboratorio clnico

Capaz de distinguir
los
microorganismo
patognicos en un corto
periodo de tiempo.

COMPOSICIN

HACINDOLO
SELECTIVO PARA:
STAPHYLOCOCCI
Y
MICROCOCCACEA
E.
DEBIDO A QUE EL
NIVEL DE
CLORURO
SDICO ES
INHIBITORIO
PARA LA MAYORA
DE LAS
BACTERIAS.

AGAR DESOXICOLATO CITRATO

LACTOSA SUCROSA (DCLS)

ES UN MEDIO MODERADAMENTE SELECTIVO PARA EL AISLAMIENTO:

FORMULACIN

PREPARACI
N

COMPONENTES

Como crecen las colonias?

Agar Baird-Parker
Permite el crecimiento de estafilococos coagulasa positivos, a
la vez que los diferencia del resto en los alimentos y otros
materiales de importancia sanitaria
Frmula (gramos x litro)
PEPTONA DE CASENA........................................10.0
EXTRACTO DE CARNE.........................................5.0
EXTRACTO DE LEVADURA...................................1.0
CLORURO DE LITIO ..............................................5.0
GLICINA................................................................12.0
PIRUVATO DE SODIO..........................................10.0
AGAR....................................................................17.0
TELURITO POTSICO.0.1
EMULSIN DE YEMA DE HUEVO...50 mL
pH final: 6.8 0.2

Cmo
sese
prepara?
Cmo
usa?

Cmo se presentan las

colonias?

MICROORGANISM CRECIMIENTO
OS

ACTIVIDAD
LECITINSICA

REDUCCIN DE
TELURITO DE
POTASIO

Staphylococcus
aureus ATCC
25923
Satisfactorio

Staphylococcus
epidermis ATCC
14990
Proteus
mirabilis ATCC
43071

RegularSatisfactorio

Total o
parcialmente
inhibido

Positiva

Negativa

Negativa

CARACTERSTICA
S DE LAS
COLONIAS

Positiva

Col. Negras,
borde incoloro,
convexas,
rodeadas de
zona opaca con
zona clara
externa

Positiva

Colonias negras,
tamao irregular,
zona opaca
alrededor

Positiva

Col. marrones sin

zona opaca o
clara alrededor

Agar Levine o EMB (Eosina

Azul de Metileno)
COMPOSICIN (gramos x litro)

Digerido
pancretico
de
Gelatina..10.0
Es
usado
para
el
aislamiento
y
Sacarosa.5.
diferenciacin de bacilos entricos Gram
0 negativos. El uso de la eosina y del azul
Eosina.................
metileno permite la diferenciacin de las
0.4
colonias
de lactosa
Azul
de fermentadoras
metileno.....
0.065
Agar
bacteriolgico......
..15.0

Cmo
sese
prepara?
Cmo
usa?

Enterobacteria

Agar Cetrimida- Agar

King
Medio de cultivo para aislar
Pseudomona aeruginosa
FRMULA

(gramos

litro

de

agua

destilada)
Digerido pancretico de gelatina
20.0
Cloruro de magnesio..
1.4
Sulfato
de
potasio
..10.0

Cmo se prepara?
MICROORGANISMOS
:
o Pseudomona
aeruginosa
o Escherichia Coli
o Staphylococcus
aureus

Agar Schaedler

COMPOSICIN (gramos x litro)

Caldo TSB
...
10.0
Peptona
.5.0
Medio
con
vitamina
K
y
Extracto de levadura
sangre de cordero que se
5.0
Dextrosa
encuentra
muy
adaptado
...5.0
para el de
cultivo
bacterias
Clorhidrato
cistena de

0.4
anaerobias
Hemina

0.01
Buffer
Tris
..0.75
Agar

Cmo se prepara?

Agar Gardnerella y BCYE

(buffer charcoal yeast
extract)
Digerido pancretico de casena 12.0
Digerido pptico de tejido animal
5.0
Peptona
de
proteosa
..10.0
Extracto
de
levadura
.3.0
Extracto de carne bovina
Agar
con sangre humana ms una
3.0
Almidn de antibiticos
de
maz
mezcla
que permiten
..1.0
la
observacin
de
colonias
Cloruro
sdico
betahemolticas
caractersticas de
..5.0
Agar
Gardnerella vaginalis
..13.5
Colistina

0.01

Cmo se prepara?
Es importante tener
cuidado extremo ya
que se trabajar con
sangre humana que
previamente se
analiz para descartar
enfermedades en ella

Lowenstein-Jensen
Medio Base.

Suspender 37,3 g del polvo en

600 ml de agua destilada y
agregar 12 ml de glicerina.
Frmula (gramos x litro)
Calentar agitando y hervir un
minuto. Esterilizar en autoclave
Es esta una base para la preparacin de
varios
a 121C
x 15 min. Enfriar a
Fosfato monopotsico
2.5
50C. Mezclar
aspticamente un
medios destinados al aislamiento, cultivo
y
litro de huevo ntegro, evitando
Sulfato de magnesio
0.24
diferenciacin de micobacterias.
la formacin de burbujas de aire
y agregar al medio base.
Citrato de magnesio
0.6
Mezclar el huevo y la base hasta
Fundamento
uniformar. Distribuir recipientes
Asparragina
3.6
Los nutrientes de este medio basal, ms los aportados por el estriles
agregado
de la
y tapar
mezcla
de huevos, constituyen un30.0
rico soporte para el crecimiento
de una
granlos
hermticamente.
Colocar
Harina
de papa
variedad de micobacterias.
mismos en posicin inclinada y
coagular a 85-90C durante 45
Verde de malaquita
0.4
min.

 SIEMBRA
SE RECOMIENDA, EN PROCEDIMIENTOS DE RUTINA,
INOCULAR LA MUESTRA PREVIAMENTE DESCONTAMINADA,
SOBRE LA SUPERFICIE DEL MEDIO DE CULTIVO.
INCUBACIN
A 35-37C. A LOS 7 DAS DE INCUBACIN.
RESULTADOS
OBSERVAR LAS CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y LA
PRESENCIA O AUSENCIA DE PIGMENTO EN LAS COLONIAS.
Microorganismos

Crecimiento

Mycobacterium
tuberculosis

Excelente

Mycobacterium avium
Mycobacterium
gordonae
Mycobacterium bovis

Excelente

Caractersticas de las
colonias
Grandes, secas,
amarillentas,
granulares
Lisas, sin pigmentos

Excelente

Lisas

---

---

 CARACTERSTICAS DEL MEDIO

PREPARADO: VERDE PLIDO, OPACO.
ALMACENAMIENTO
MEDIO DESHIDRATADO: A 10-35 C.
MEDIO PREPARADO: A 2-8 C.

Agar yersina CIN (CefsudolinaIrgasn-Novobiocina

EL AGAR YERSINIA CIN ES UN MEDIO DE AISLAMIENTO

SELECTIVO, DETECCIN E IDENTIFICACIN DE
DIFERENTESESPECIE DE YERSINIA A PARTIR DE
COPROCULTIVOS.
EL MANITOL Y EL ROJO NEUTRO PRESENTES EN EL MEDIO
PERMITEN DIFERENCIAR YERSINIA POR EL COLOR DE LAS
COLONIAS (COLONIAS DE ROSAS OSCURAS A ROJAS).
ESTE MEDIO HA SIDO CREADO CON UNA ESPECIAL
SELECTIVIDAD PARA EL AISLAMIENTO DE YERSINIA. A LAS 24
HORAS DE INCUBACIN LAS COLONIAS SON PEQUEAS, CON
CENTRO ROJO LADRILLO; A LAS 48 HORAS SE VUELVEN
ROSADAS, MUCOSAS Y GRANDES

aislamiento selectivo, deteccin e

de Yersinia a partir de
eutro presentes en el medio
color de lascolonias (colonias de

Mac Conkey Agar.

Este
medio
utilizapor
para
el aislamiento de bacilos Gram negativos de
Frmula
(ense
gramos
litro)
fcil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos.
Peptona
17.0
Fundamento
Pluripeptona
3.0 peptonas, aportan
En el medio de cultivo, las
los nutrientes
necesarios
Suspender
50 g del
polvo por
para el desarrollo bacteriano,
la lactosa eslitro
el hidrato
dedestilada.
carbono Reposar
de agua
Lactosa
10.0
fermentable, y la mezcla de sales biliares y5 el
cristal violeta
sonhasta
los
minutos
y mezclar
Mezcla de sales
1.5
de gran parte
de la
flora
uniformar.
Calentar
suavemente
biliaresagentes selectivos que inhiben el desarrollo
Gram positiva.
y hervir 1 a 2 minutos hasta
Cloruro de sodio
5.0
Por fermentacin de la lactosa, disminuye disolver.
el pH alrededor
de la
Esterilizar
encolonia.
autoclave
Agar Esto produce un viraje del
13.5color del indicador
de pHdurante
(rojo neutro),
la
a 121C
15 minutos.
absorcin en las colonias,
y la precipitacin de las sales biliares.
Rojo neutro
0.03
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias
Cristalincoloras.
violeta
0.001
pH final: 7.1 0.2

 SIEMBRA
- SEMBRAR EN SUPERFICIE.
- UTILIZANDO LA TCNICA DE POUR PLATE: SEMBRAR 1 ML DE
MUESTRA Y AGREGAR APROXIMADAMENTE 15 ML DE MEDIO DE
CULTIVO FUNDIDO Y ENFRIADO A 45-50 C.
INCUBACIN
DURANTE 18-48 HORAS, A 35-37 C, EN ATMSFERA AERBICA
RESULTADOS
Microorganismos

Colonias

Escherichia
CARACTERSTICAS
coli ATCC 25922 DEL MEDIO
Rojas con halo turbio
MEDIO PREPARADO: ROJO PRPURA
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Rosadas mucosas
ALMACENAMIENTO:
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Incoloras, transparentes
MEDIO DESHIDRATADO: A 10-35 C.
Shigella flexneri ATCC 12022
MEDIO PREPARADO: A 2-8 C.Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis ATCC 43071

Incoloras, transparentes

Enterococcus faecalis ATCC 29212

Diminutas, incoloras, opacas

TCBS
Medio
MEDIO SELECTIVO
PARA EL AISLAMIENTO Y CULTIVO
DE VIBRIO CHOLERAE, VIBRIO PARAHEMOLYTICUS Y
OTRAS ESPECIES DE VIBRIO A PARTIR DE HECES,
AGUA
Y ALIMENTOS
CONTAMINADOS.
Frmula
(en gramos
por litro)

Extracto de levadura 5.0

Suspender 89 g del polvo en un
Peptona de carne 5.0
litro de agua destilada. Calentar
FUNDAMENTO
Triptena
5.0
hasta ebullicin y hervir de 1 a 2
Citrato de sodio10.0
EN de
ELsodio10.0
MEDIO DE CULTIVO, minutos.
EL EXTRACTO
DE
Tiosulfato
NO AUTOCLAVAR.
Bilis de
buey8.0
LEVADURA,
LA PEPTONA DE
CARNEenY placas
LA TRIPTENA
Distribuir
de Petri
Sacarosa 20.0
APORTAN
EL DESARROLLO
estriles.
Cloruro
de sodio 10.0NUTRIENTES PARA
Citrato
frrico 1.0
BACTERIANO.
ES ESTE, EL MEDIO SELECTIVO MS
Azul de bromotimol 0.04
ADECUADO
PARA EL AISLAMIENTO DE LAS ESPECIES
Azul de
timol 0.04
Agar DE
15.0 VIBRIO, E INHIBIDOR PARA LA MAYORA DE LAS

ENTEROBACTERIAS.

 SIEMBRA

1. MATERIALES CLNICOS:
Caractersticas de las
Microorganismo
Crecimiento
A-MATERIA FECAL: SUSPENDER 1 GRAMO DE HECES
O EL CONTENIDO DEL
colonias
HISOPO EN 10 ML DE AGUA PEPTONADA ALCALINA E INCUBAR DE 6 A 8
HORAS A 35-37C, EN AEROBIOSIS.
Amarillas de 2-3 mm
B-MATERIALES
DE INFECCIONES
EXTRAINTESTINALES:
NO
Vibrio
cholerae PROVENIENTES
Bueno
de dimetro,
de borde
ES NECESARIO REALIZAR ENRIQUECIMIENTO PREVIO
EN AGUA PEPTONADA
traslcido
ALCALINA.
Centro verde azulado,
V. parahaemolyticus
Bueno
2-AGUA:FILTRAR DE 1 A 10 LITROS (EL borde
VOLUMEN
DESEADO) DE AGUA
traslcido
CON MEMBRANA DE 0.22.COLOCAR LA MEMBRANA EN UN RECIPIENTE
V. CONTENIENDO
alginolyticus AGUA PEPTONADA
Bueno ALCALINA
Amarillas
grandes
E INCUBAR
DE 6 A 8 HORAS A
35-37C, EN AEROBIOSIS.
Aeromonas spp.
Inhibido
-3-ALIMENTOS:LICUAR 25 G DE LA MUESTRA CON 225 ML DE AGUA
E. coli
-- A 35-37C, EN
PEPTONADA
ALCALINA E Inhibido
INCUBAR DE DE 6 A 8 HORAS
AEROBIOSIS.
CARACTERSTICAS DEL MEDIO
EN TODOS LOS CASOS SEMBRAR UNA ALCUOTA
DELPREPARADO:
CALDO DE VERDE AZULADO
MEDIO
ENRIQUECIMIENTO EN LA SUPERFICIE DE UNA
PLACA DE TCBS, POR
ALMACENAMIENTO
ESTRIADO, PARA EL AISLAMIENTO DE COLONIAS.
MEDIO DESHIDRATADO: A 10-35 C.
INCUBACIN
MEDIO PREPARADO: A 2-8 C.

Chocolate Agar
Permite el crecimiento de microorganismos
exigentes
en
sus
requerimientos
nutricionales, por ejemplo especies de
Streptococcus, Haemophilus y Neisserias
patgenas.
Fundamento.- El medio de cultivo es
ampliamente nutritivo por la presencia de
peptona, triptena, extracto de levadura,
extracto de corazn y almidn. El agregado
de sangre y suplemento Britalex con
solvente aporta nutrientes, vitaminas y
minerales adicionales. El cloruro de sodio
mantiene el balance osmtico y el agar es
el agente solidificante.

FRMULA
Peptona
de
carne................................................................................................5.0
Tripte...............................................................................................................
..12.0
g
Extracto
de
levadura...........................................................................................5.0
g
Extracto
de
corazn............................................................................................3.0
g
Almidn
soluble..................................................................................................1.0 g
Cloruro
de
sodio................................................................................................5.0
g
Agar.................................................................................................................
..15.0
g
Sangre
ovina......................................................................................................50 ml
Suplemento
Britalex........................................................................................10 ml
Agua
purificada.................................................................................................100
0 ml

 INSTRUCCIONES
PLACAS LISTAS PARA USAR.
CARACTERSTICAS DEL PRODUCTO
MEDIO DE CULTIVO COLOR MARRN.
ALMACENAMIENTO
A 2-8 C.
SIEMBRA
EN SUPERFICIE, ESTRIAR DIRECTAMENTE EL MATERIAL EN ESTUDIO.
INCUBACIN
EN GENERAL SE RECOMIENDA: BACTERIAS DE FCIL CRECIMIENTO: EN
AEROBIOSIS, A 35-37 C DURANTE 18 A 24 HORAS.
BACTERIAS EXIGENTES EN SUS REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES: EN
ATMSFERA CON 5 % DE CO2, A 35-37 C DURANTE 18-48 HORAS.

Thayer Martn Medio

MEDIO
SELECTIVO DE THAYER-MARTIN PARA
EL AISLAMIENTO
Pluripeptona
15.0
DE NEISSERIAS PATGENAS.
Almidn soluble
1.0
FUNDAMENTO
Fosfato
dipotsico
EL MEDIO
DE
THAYER-MARTIN PERMITE EL 4.0
CORRECTO
AISLAMIENTO
Y RECUPERACIN DE LAS NEISSERIAS
Fosfato monopotsico
1.0
PATGENAS DENTRO DE LAS 24 H, CON UNA AUSENCIA CASI
Cloruro
de sodio
TOTAL
DE CONTAMINANTES.
EL MEDIO DE 5.0
CULTIVO SE
PREPARA
A PARTIR DEL AGAR BASE GC, CON
EL AGREGADO
Agar
15.0
DE HEMOGLOBINA, UN SUPLEMENTO DE ENRIQUECIMIENTO
(BRITALEX) Y UNA MEZCLA ANTIMICROBIANA (VCNT:
VANCOMICINA, COLISTINA, NISTATINA Y TRIMETOPRIMA).
COMPOSICIN

 PREPARACIN
MEDIO THAYER MARTIN MODIFICADO LISTO PARA USAR FUNDIR EL
CONTENIDO DE UN FRASCO DE 50 ML DE AGAR BASE GC DOBLE
CONCENTRACIN Y ENFRIARLO A 50C. RECONSTITUIR EL BRITALEX Y EL
VCNT CON 2,1 ML DE SOLVENTE CADA UNO. ADICIONAR ASPTICAMENTE LA
SOLUCIN DE HEMOGLOBINA, 1 ML DE VCNT Y 1 ML DE BRITALEX A LA BASE
GC DOBLE CONCENTRACIN. CONSERVAR EL RESTO DE VCNT Y BRITALEX
RECIN PREPARADOS EN CONGELADOR (ESTABLE 15 DAS A -20C). MEZCLAR
PARA HOMOGENEIZAR. DISTRIBUIR UNOS 10 ML POR PLACA Y DEJAR
SOLIDIFICAR. LAS PLACAS PUEDEN CONSERVARSE EN HELADERA POR 3
SEMANAS, SIN PERDER SU POTENCIA INHIBIDORA.
SIEMBRA
SEMBRAR INICIALMENTE EL MATERIAL CON HISOPO O ANSA SOBRE UN TERCIO
DE LA SUPERFICIE DE LA PLACA, ESTRIANDO EL RESTO DE LA SUPERFICIE
PARA OBTENER COLONIAS AISLADAS.

Microorganismos

T.M.

T.M.

A.N

C22C

OXI

GLU

MAL

N. gonorrhoeae

N. meningitidis

Acinetobacter spp.

-*

Neisseria spp.

Moraxella spp

Moraxella (Branhamella)
catarrhalis

INCUBACIN
INCUBAR LAS PLACAS A 35-36C EN RECIPIENTES CON CIERRE HERMTICO,
EN CMARA HMEDA Y ATMSFERA DE CO2, DURANTE 18 A 72 H.

IDENTIFICACIN
LAS COLONIAS DE GONOCOCOS Y MENINGOCOCOS OBTENIDAS EN ESTE
MEDIO SELECTIVO SON USUALMENTE OPACAS, GRISCEAS, CONVEXAS, DE
1-4 MM DE DIMETRO. LUEGO DE 48 H DE INCUBACIN PUEDEN
TRANSFORMARSE EN COLONIAS MUCOIDES. COLORACIN DE GRAM:
DIPLOCOCOS GRAM NEGATIVOS. SE SUGIERE PROSEGUIR CON ESTE
ESQUEMA DE IDENTIFICACIN.

Agar BD
Campylobacter
(Skirrow)

FRMULA (gramos x
litro)

Es un medio selectivo
para el aislamiento de
especies
de
Campylobacter
partiendo de muestras
clnicas

Infusin de
msculo cardiaco

2.0

Digerido
pancretico de
casena

13.0

Extracto de
levadura

5.0

Cloruro sdico

5.0

Vanocomicina

0.01

Trimetoprima

0.005

Poliximina B

2500 Ul

Agar

15.0

Sangre de caballo, 7%
desfibrinada ypH 7.3 0.2

Microorganismos:
Campylobacter jejuni
subesp
Campylobacter fetus DSM
Escherichia coli
Proteus mirabillis
Enterococcus faecallis

Agar sulfito de
bismuto
Frmula (gramos x
litro)
Peptona

10.0

bacteriolgica
Indicadr bismuto
sulfito

8.0

Extracto de carne

5.0

Dextrosa

5.0

Fosfato disdico

4.0

Sulfato ferroso

0.30

Vede brillante

0.025

Agar bacteriolgico

20.0

pH 7.5 0.2 a 25C

Es
un
medio
altamente
selectivo que se recomienda
para
el
aislamiento
de
Salmonella
spp,
especialmente en Salmonella
thyphi presente en heces

Cmo se prepara?
Microorganism
o

Desarrollo

Color colonia

E. Coli ATCC
25922

Inhibicin
parcial

Marrn-verde

Salmonella
enteriditis

Bueno

Negro con
brillo metlico

Salmonella
typhi

Bueno

Negro con
brillo metlico

Shigella
flexneri

Inhibicin
parcial

Marrn

Agar Sabourand
ESTE MEDIO ES UTILIZADO PARA EL AISLAMIENTO E
IDENTIFICACIN
DE:
Hongos Miceliales

era
m
i
r
p
r
ado po
z
i
l
i
t
u
Fue
mond
y
a
R
r
vez po
1892
n
e
d
u
ra
Sabou

Hongos
Levaduriformes

Hongos patgenos
dermatofitos

RMULA (en gramos por litro)

Componentes:

PREPARACION

o
t
n
e
i
m
i
c
e
r
C
s
o
v
i
t
l
u
c
de

Agar Campylosel
ES UN MEDIO SELECTIVO QUE SE SE UTILIZA PARA EL
AISLAMIENTO DE:

Presentes en heces. creciendo a

42 C en microaerofilia.

FORMULACIN EN G/L DE AGUA

DESTILADA:

Como crecen Las Colonias?

Las colonias caractersticas
deCampylobacterson
pequeas, y a veces crecen a lo
largo de las estrasde
inoculacin.
*Despus de 24 a 48 horas de
incubacin, tienen un tamao de 1 a 2
mm.
*Son generalmente de aspecto plano,
gris liso y brillante, algunas veces
ms granuloso.

Agar sangre Brucella-hemina

menadiona
Este medio esta basado en satisfacer las
caractersticas de crecimiento de las cepas de
brucella.
LA BASE DEL MEDIO ES AGAR COLUMBIA, EL CUAL COMBINA LAS
CARACTERSTICAS DE PRODUCIR COLONAS GRANDES, GRACIAS AL
HIDROLIZADO DE CASENA Y LAS ZONAS CLARAS, DEFINIDAS DE
EMOLISIS Y BUENA DIFERENCIACIN DE COLONIAS GRACIAS A LA FUSION
DE CARNE Y/O TEJIDO ANIMAL.

COMPOSICIN:

de
o
l
l
rro
a
s
n de a
e
u
o b rucell
d
n
b
itie
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P
pa
e
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n
s
e
a
l
alm
i
c
e
esp

CMO CRECEN LAS COLONIAS?

Bibliografas:
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Bismuth and Sodium Sulfite affording an enrichment
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