CITOGENTICA

Universidad Industrial de Santander

Seminario de Hematologa
Nio Vargas Andrea
Nio Estvez Edna Mylena
Oviedo Len Julin Fernando
Suescn Seplveda Jhon Alexander

GENERALIDADES
La citogentica es el estudio de los
cromosomas tanto en nmero como en
estructura
Convencional

Cariotipo
Cultivo celular
Tcnicas de bandeo

Citogenti
ca

FISH
Molecular

FISH SKY
CGH
PCR

Citogentica convencional
Cariotipo
Organizacin
de
los
cromosomas de acuerdo con el
tamao y la posicin del
centrmero.
El nmero asignado a cada
cromosoma est basado en el
patrn
de
bandas
Q
como
fue
propuesto por Caspersson y col.
En 1971
El anlisis cromosmico requiere
de clulas en metafase, por lo
tanto su obtencin se hace a
partir de tejidos con un gran
nmero de clulas en divisin

Cariotipo: 46, XY. Tomado de: centro

de gentica mdica, Buenos Aires

 Cultivo celular

Tcnicas de bandeo
G

Surgen como la consecuencia de someter las lminas a la

accin de la tripsina.
Giemsa como colorante.
Tien oscuro en regiones ricas en A-T.

Tincin por fluorocromos

Los cromosomas se visualizan con bandas brillantes
(fluorescentes) correspondientes a los segmentos ricos en
AT y opacas correspondientes a los segmentos ricos en GC.

Revelan un patrn inverso al de las bandas G.

Son ricas en GC, en genes, en secuencias Alu, pobres en
secuencias Line.
Se producen al someter las preparaciones en solucin salina
a altas temperaturas y son coloreadas con Giemsa.

Ideograma

Adaptado de Silva et al. 2008

Tcnicas de bandeo
C

Se trata de la deteccin de regiones heterocromticas.

Se utiliza hidrxido de sodio y se incuban los cromosomas
en solucin salina para hacer la tincin posterior con
Giemsa.
Tie principalmente las regiones centromricas

Es una variante del bandeo R en el que las bandas se

producen principalmente en las regiones terminales,
suprimiendo casi totalmente las bandas intersticiales.

NOR

Identifican especficamente las Regiones Organizadoras

Nucleolares (NOR) que se evidencian en las constricciones
secundarias de los cromosomas acrocntricos.

Patrn de bandas C. J. L Santos

Metafase mostrando NORs. Genero, 2001.

Citogentica molecular
Hibridacin
(FISH)

fluorescente

in-situ

Utilizado
para
detectar
anomalas
cromosmicas
estructurales
como
interrupciones cromosmicas
o yuxtaposicin de dos loci
diferentes
implicados
en
translocaciones diferentes.
Se basan en conjuntos de
sondas de dos colores que
generan
patrones
que
permiten distinguir clulas
normales de aquellas con
interrupciones mono o bi
allicas.

Co - localizacin de MYC y
cadena
pesada
de
inmunoglobulina (IGH) en el
linfoma de Burkitt. Tomado de:
Kluin, P., & Schuuring, E. (2011).

 FISH - SKY
Es una adaptacin del FISH
que permite la visualizacin
de
los
23
pares
de
cromosomas a la vez, es
til a la hora de descifrar
cariotipos complejos.
No detecta alteraciones
estructurales
intracromosmicas y no
permite
determinar
las
bandas
cromosmicas
exactas implicadas en la
reorganizacin.

Cariotipado
espectral
(SKY).
Tomado de Pastene, Eduardo. Tres
etapas en la historia de la
citogentica clnica.

 Hibridacin genmica comparada (CGH)

convencional y CGH en array (aCGH).
CGH convencional, se basa en
una hibridacin competitiva
entre DNA normal y DNA
derivado de clulas tumorales
donde
los
cromosomas
obtenidos de los individuos
sanos se utilizan como una
plantilla para la hibridacin
Se ha reemplazado el CGH
convencional por el CGH en
array en el que los fragmentos
de ADN utilizados para la
hibridacin competitiva son
colocados en un portaobjetos
de vidrio.

Tomado
de:
Kluin,
P.,
&
Schuuring, E. (2011). Molecular
cytogenetics
of
lymphoma:
where do we stand in 2010?.

 PCR
cuantitativa
Permite
un diagnstico rpido de aneuploidas mediante la
fluorescente
amplificacin por PCR de secuencias de ADN altamente polimrficas
conocidas como microsatlites.
La incorporacin de una molcula fluorescente, en la reaccin de
amplificacin permite una medicin exacta de la cantidad del
producto amplificado mediante un secuenciador automtico de ADN.

Tomado de: Davalillo, 2005. Electroforetograma de QF-PCR donde

no se observan aneuploidias para los cromosomas sexuales X,Y,
ni para los autosomas 18(verdes), 13 picos negros y 21 (azul a la

CLASIFICACIN

Enfermedades
mieloproliferativas crnicas
Leucemia
positivo

mieloide

11,2)

crnica

BCR-ABL1

t(9;22)(q34:q
cromosoma (22q)

translocacin

recproca

90-95% de los pacientes se presentan con la t(9; 22)

Fusiona secuencias del gen BCR en el cromosoma 22

con regiones del gen ABL1 de cromosoma 9

Produce una protena quimera p210, con actividad

tirosin quinasa que activa constitutivamente la
transcripcin.

Ideograma de los cromosomas 9 y

22 muestran la sondas FISH para
los loci ALB (rojo), BCR (verde) y
seales de funcin de color
amarillo.

Leucemia neutroflica crnica

Pruebas moleculares

No existen marcadores moleculares especficos para el

diagnstico.

No se debe a cromosoma filadelfia, puede confundirse con

una LMC que presente neutrofilia.

Otros casos pueden demostrar la mutacin JAK2.

Citogentica

No ha sido asociado con anomalas cromosmicas

especficas.

Evento gentico primario crptico

Anormalidades asociadas comunes, no

espescficas: Trisoma del 8, 9, 21, del(20q),
del(11q), del(12q)

Leucemia eosinoflica crnica

No se ha identificado una anomala gentica
especfica.
La deteccin del cromosoma filadelfia o gen de fusin
BCR-ABL1 indica un raro caso de LMC con eosinofilia.
Casos con rearreglos de PDGFRA, PDGFRB o FGFR1
son especficamente excluidos, hacen parte de otra
anomala: Neoplasia mieloide y linfoide asociado a
eosinofilia .
Ocasionalmente mutacin en JAK2

Anormalidades asociadas comunes, pero no

especficas: Trisoma del 8, i(17q)

Cariotipo con bandeo G con trisoma 8

Leucemia Mieloide Aguda

Leucemias agudas con anormalidades
citogenticas recurrentes

- AML con t(8;21)(q22;q22)(AML/ETO)

- AML con t(15;17)(q22:q12)

 Leucemias agudas de linaje ambiguo

Fenotipo mixto leucemia aguda con t (9; 22)

(q34; q 11.2): BCR-ABL 1

Los casos tienen la t(9; 22)

detectado por cariotipo clsico o
por el desplazamiento de BCR-ABL1
detectado por FISH o PCR. Muchos
casos tienen anormalidades
citogenticas adicionales, y con
frecuencia tienen cariotipos
complejos

Se muestran clulas con

t(9; 22)

Fenotipo mixto leucemia aguda con t (v;

11q23); MLL reordenado

Todos los casos tienen

reordenamientos del gen
MLL, con el gen asociado
ms comn AF4 en el
cromosoma 4 q21 banda
(338. 1671).
Tambin se ha informado;
translocaciones t (9:11) y t
(11;19).
La reordenacin se puede
detectar ya sea por cariotipo
estndar o por FISH o menos
comnmente, mediante PCR.

 Leucemias mieloide aguda no

categorizada
-AML
mnimamente diferenciada

Neoplasias de precursores
B
yT
Leucemia Linfoblstica de precursores
B

 Leucemia Linfoblstica de precursores

T

Neoplasias de clulas B y T
maduras
Neoplasias de clulas T maduras.
Leucemia prolinfoctica de la clula T.

 Neoplasias de clulas B maduras.

Leucemia linfoctica crnica.

 Leucemia de clulas peludas.

Genes VH con hipermutacin somtica
No presenta anormalidades citogenticas especficas
Anormalidades genticas del cromosomas 5 y 7.
Translocaciones raras.

 Leucemia/Linfoma de Burkitt.

 Leucemia prolinfoctica de clulas B.

BIBLIOGRAFA

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Cialab.Citogentica onco-hematologa, disponible en
http://www.cialab.com/citogeneticaOncoHematologica.php#inicio revisado el:
1/12/2014.