David Ortiz

Paulina Tamay
Daniela Ortiz
Paola Bravo

Teora de la eficiencia
de la columna
cromatogrfica

Teora de la eficiencia de la
columna cromatogrfica

El

ensanchamiento de banda que se

presenta en la cromatografa en
columna es el resultado de varios
factores que influyen sobre la
eficiencia de las separaciones.

Platos tericos
La

eficiencia de separacin de una columna

se puede expresar en funcin del nmero de
platos tericos que posee.
Un plato terico representa una sola etapa
de equilibrio. Cuantos ms platos tericos
haya, el poder de resolucin ser mayor y
ser mayor el nmero de etapas de
equilibrio.
La altura del plato H, equivale a la longitud
de una columna dividida entre el numero de
platos tericos

Platos tericos

Se puede calcular el nmero de platos o

eficiencia de un cromatograma con la
ecuacin:

El nmero efectivo de platos corrige los platos

tericos por volumen muerto:

Tm es igual al tiempo que la fase mvil necesita para

cruzar la columna

Platos tericos
La

ecuacin de Foley-Dorsey corrige

el tiempo de retencin y el nmero
de platos:

Eficiencia de la cromatografa de
gases: Ecuacin de Van Deemter

debe ser mnima para acortar los

tiempos de separacin, y las
velocidades mayores a

representa la velocidad de la fase

mvil lquida, en donde u = L/tm

Eficiencia de la cromatografa de
gases: Ecuacin de Van Deemter

La

difusin molecular suele ser despreciable en

cromatografa de lquidos, pero es importante en
cromatografa de gases.
La transferencia de masa domina en cromatografa de
lquidos
La constante C es la transferencia de masa entre
fases y se debe al tiempo finito necesario para que se
establezca el equilibrio del soluto entre las dos fases
.

Altura de plato reducida en

cromatografa de gases
Para

comparar el funcionamiento de
diferentes columnas se usa un
trmino de altura adimensional
llamado altura de plato reducida.

Una

columna bien empacada debe

tener un valor de h igual a 2 o
menos cuando el flujo es ptimo

Altura de plato reducida en

cromatografa de gases
La

altura del plato reducida se usa con la

velocidad reducida, v, para comparar
diferentes columnas empacas en gran
variedad de condiciones; v relaciona el
coeficiente de difusin en la fase mvil y el
tamao de partcula del material de
empaque

COLUMNAS TUBULARES ABIERTAS EN CROMATOGRAFA DE GASES

Tienen un numero elevado de platos, n

empacado, en las columnas abiertas
difusin por arremolinamiento se mod
ecuacin de Van Deemter llamada ecua
Golay.

CROMATOGRAFA DE LQUIDOS DE ALTA

EFICIENCIA
ECUACIONES DE HUBER Y KNOX
La

grafica de Van Deemter a la cromatografa de lquidos de alta

(HPLC) se produce una curvatura que se aleja de la curva terica
velocidades son grandes.

Donde:
Esta es la llamada ecuacin de Huber
= velocidad lineal de la fase movil
Cm = termino de transferencia de masa en la fase mvil
Cs = la fase estacionaria.
B = (difusion longitudinal), excepto a muy bajas velocidades de
es casi cero y se puede ignorar; es funcion de la viscosidad de l
de la molecula del analito.
A = (difusion por arremolinamiento) es pequeo, y su valor es c

H se determina a partir
de:
Donde:
Cs = es relativamente
constante
Cm = transferencia en
la fase mvil
estancada (en los
poros de las
partculas).
H = aumenta un poco .

Knox desarrollo una

ecuacin emprica para
la cromatografa de
lquidos para corregir
la desviacin respecto
de la ecuacin de Van
Deemter.
A = De 1 a 2
B = De 1.5
C = Es casi 0.1.

EFICIENCIA Y TAMAO DE
PARTCULA EN HPLC
Para columnas bien empacadas, H
posee un valor dos a tres veces el
Partculas de distintas
dimetro
de partcula esto es:
distribucionespromedio
de tamao
empacadas en columnas de
igual dimetro tendrn en
esencia la misma difusin
longitudinal.
Las partculas mayores
poseen mayor transferencia
estancada de la fase mvil
(C), la molcula del soluto
recorre una trayectoria ms
larga en los poros esto
aumenta el ensanchamiento
de bandas.

FACTOR DE RETENCIN EN
CROMATOGRAFA
ES UNA MEDIDA DEL TIEMPO DE RETENCIN Y, EN
CONSECUENCIA, DE LA CAPACIDAD DE RESOLUCIN.

Donde:

tR = tiempo de retencin.
Tm = tiempo que tardara en
aparecer un soluto no retenido

Un factor de retencin grande

favorece una buena separacin
se traducen en mayor tiempo de
elucin.
Un cambio en el factor de
retencin es sntoma de que hay
degradacin
de
la
fase
estacionaria.

El volumen de una
columna cromatografa

Formado por el
volumen de la fase
estacionaria y el
volumen muerto
ocupado por la fase
Mvil.

RESOLUCIN EN
CROMATOGRAFA
SE DEBE BUSCAR TENER UNA RESOLUCIN
MNIMA DE 1.0.

tR1 y tR2 = Tiempos de

retencin de los dos
mximos.
Wb = Ancho de la
lnea base de los
mximos.

Factor de separacin
es una cantidad
termodinmica que mide la
retencin relativa de los
anualitos.
Donde:
tR1 y tR2 = Tiempos de
retencin corregidos.
K1 y k2 = factores de
retencin
correspondientes.