Tcnica de determinacin de la

GONADOTROPINA CORIONICA
HUMANA (HCG) en IMNULITE 2000
Trabajo realizado por:Esther Martnez Velasco

Tcnica de determinacin de la GONADOTROPINA

CORIONICA HUMANA (HCG) en IMNULITE 2000

Beta HCG Libre

Utilidad del anlisis:
Para el diagnostico in
vitro con los
analizadores INMULITE
2000 para la medida
cuantitativa de la
subunidad -HCB libre
en suero.

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CORIONICA HUMANA (HCG) en IMNULITE 2000

Resumen y explicacin del test.

La Gonadotropina Corionica Humana (HCG) es
una hormona de la familia de las glicoprotenas que
se detecta en sangre y orina solamente en el
embarazo. Es secretada por la placenta, empezando
con el inicio del trofoblasto, desde el momento de la
implantacin, y sirve de apoyo al cuerpo luteo
durante las primeras semanas del embarazo.

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HCG intacta es una molcula de 39.500 dalton compuesta de
dos subunidades, y , que se unen entre si de forma no
covalente. Estas subunidades pueden aparecer de forma libre,
o sin capacidad de unin. Solamente HCG intacta posee
actividad biolgica. La subunidad -HCG es estructuralmente
idntica a la subunidad -HCG de otras hormonas
glicoproteicas anlogas de la putuitaria, Hormona Luteinizante
(LH), Foliculo estimulante (FSH) y Estimuladora del Tiroides
TSH. La unidad es en cambio especifica de estas hormonas y
les confiere sus diferentes actividades biolgicas. La subunidad
de HCG y LH, de todas formas, son estructuralmente muy
similares, a tener en cuenta considerando las actividades
biolgicas de estas dos hormonas.

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La determinacin de los niveles de -HCG libre son
una ayuda al diagnstico y seguimiento de
enfermedades trofoblasticas (molas, cariocarcinoma)
y ciertos tumores testiculares, donde los ratios entre
la subunidad y la HCG intacta pueden ser algo
elevados. Ocasionalmente, se encuentras tumores
que solo secretan -HCG libre no detectndose nada
de HCG intacta.

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Se ha publicado que la determinacin de -HCG libre
en suero materno tiene una unidad significativa en el
screening del primer y segunda trimestre para el
sndrome de Down y otras anomalas cromosmicas.
En el primer trimestre, una combinacin de edad
materna, los niveles srico de PAPP-A y la medida
de translucencia nucal (NT) deben incrementar
sustancialmente la eficiencia del screening prenatal
en comparacin con el screening del segundo
trimestre; usando esta aproximacin, varios
investigadores han publicado eficiencias de
deteccin, con un 5% de falsos positivos, del 85% al
90%.

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Principio del anlisis
INMULITE 2000 Beta HCG Libre es un ensayo
secuencial inmunomtrico con dos sitios de unin
quimioluminiscente en fase slida.
La fase slida (bola) est recubierta por anticuerpo
monoclonal murino anti HCG libre. La fase slida
consiste en dos reactivos:
1) Tampn de matriz proteica.
2) Anticuerpo policlonal de cabra anti -HCG Libre
marcado con fosfatasa alcalina (de intestino
bovino), en solucin tampm.

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En el primer ciclo, la
muestra del paciente y el
tampn se incuban junto con
la bola durante 30 minutos.
Durante este tiempo, la HCG Libre de la muestra del
paciente
se
une
al
anticuerpo
monoclonal
murino anti -HCG Libre de
la bola. La muestra no unida
se
elimina
entonces
mediante
lavados
por
centrifugacin.

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En el segundo ciclo, el anticuerpo policlonal de cabra
anti -HCG Libre marcado con fosfatasa alcalina se
aade al tubo de reaccin original y se incuba
durante otros 30 minutos. El anticuerpo policlonal de
cabra anti -HCB Libre marcado enzimticamente se
une a la -HCG inmovilizada formando el complejo
de anticuerpo tipo sndwich. El conjugado
enzimtico no unido se elimina mediante lavados por
centrifugacin. Finalmente, se aade el sustrato
quimioluminiscente al tubo de reaccin y la seal se
genera en proporcin a la enzima unida.

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Recogida de la muestra:
Volumen necesario para la tcnica: 5 l de suero.
Libre de hemlisis.
Dilucin de muestras: Las muestras con niveles de
-HCG libre superiores al rango informable deben
ser diluidas con suero humano libre de HCG antes
del ensayo.
Rango informable: 2-200ng/ml.
Sensibilidad analtica: 1ng/ml.