ESCUELA POLITECNICA DEL EJRCITO

INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA
BIOLOGIA MOLECULAR I
4to A
Integrantes :

Salom Calahorrano
Carolina Carrin
Adriana Chiriboga
Johnny Garca
Sebastin Naranjo
Evelyn Quiroz

GENERALIDADES

Gen
encendido

Mecanismo de
silenciamiento
(Regulacin de
la expresin
gnica)

Historia (1995 por Guo y Kemphues)

C. elegans

Gen sin expresar

INTRODUCCIN
El silenciamiento gnico es un mecanismo de vigilancia
participa en la defensa contra virus y viroides
protege el genoma de transposones y regula la expresin
gnica
quelling

interferencia de ARN (RNAi)

silenciamiento gnico

mecanismo de silenciamiento es el ARN de pequeo

tamao

silenciamiento de genes especficos a varios niveles de

la expresin gnica

19 y 28 nt y se clasifican en micro RNA (miRNA),

pequeos ARN de interferencia (siRNA)

 De manera general existen dos grandes categoras,

es decir dos maneras de silenciar los genes:

TGS

PTGS

Mecanismos que regulan la

expresin de genes
endgenos

Mecanismo de proteccin
de transposones y virus

Sistema de defensa ancestral

contra cidos nucleicos
infecciosos

BASES MOLECULARES
Caractersticas que les permiten
actuar a diversos niveles en una
amplia
gama
de
procesos
celulares.
Variedad de funciones que
desempean sus componentes.
Reconocimiento de genes exgenos y
endgenos potencialmente dainos
para la integridad celular
La actividad RNasa guiada por la
complementariedad
de
cidos
nucleicos y la actividad

TIPOS DE SILENCIAMIENTO
GENTICO

POSTRANSCRIPCIONAL
(PTGS)

TRANSCRIPCIONAL

(TGS)

1. SILENCIAMIENTO
POSTRANSCRIPCIONAL
El ARNm es degradado

Inductores
u
Activadores

ARNdc

Coexpresin de genes sentido-antisentido

Homologa entre genes endgenos y transgenes
Produccin de ARN aberrante (transcriptos prematuros)

ARN antisentido
Altos valores de expresin de un transgen (que excedan un
valor umbral), entre otros.

 Cualquiera de los inductores del PTGS es degradado por

una RNasa especfica de ARNdc (Dicer y Drosha) en
pequeos ARN de 21 a 25 pares de bases (siRNA)

2. SILENCIAMIENTO GENTICO
TRANSCRIPCIONAL
Los transcriptos no son formados.

Metilacin
del ADN

La interaccin
ADN-ARN,
especficamente
ADN-siRNA, que
regulan:
Metilacin
de
algunas
Histonas

MECANISMOS DE TGS EN EL NCLEO

La
metilacin
de ADN
en plantas
dirigida
por ARN
El ensamblaje de
heterocromatina en
levaduras, animales
y plantas mediada
por interferencia de
RNA (RNAi)
La
eliminacin
de ADN en
protozoos.

METILACIN DEL ADN Y ENSAMBLAJE

DE HETEROCROMATINA
Caractersticas

La metilacin de ADN dirigida por ARN y el ensamblaje de

heterocromatina mediado por RNAi son procesos
epigenticos
Metilacin de la citosina en el ADN y de la lisina 9 en la
histona H3 (HEK9)

La metilacin de ADN dirigida por ARN est asociada a la

metilacin de secuencias promotoras en un transgen

El activador de la metilacin, probablemente es un siRNA

que es homlogo a bloques de repeticiones que se
originan de transposones .

ARN DE INTERFERENCIA

Dicer
Membrana
celular

MICROARN

Principio de los aos

noventa

Estudio gentico del

nemtodo
Caenorhabditis elegans

Se las denomin
pequeos ARN
transitorios

Revelaba la existencia
de unas molculas de
ARN diminutas y
peculiares

La investigacin ulterior
descubri que esos
pequeos ARN
reguladores de la
expresin de ciertos
genes

DEFINICIN
Son molculas de ARN transcritas a partir de
genes de ADN, pero no son traducidas a
protenas.
Presentes en los genomas de organismos
eucariotas y virus.
Una longitud de entre 21 y 25 nucletidos.

FUNCIN
Regulacin
de
expresin gnica.

la

Cualquier desregulacin
de
los
miRNA
problemas regulatorios
en la clula (fenotipos
cancerosos).

BIOGNESIS Y PROCESAMIENTO

MODO DE FUNCIONAMIENTO
Degradacin significativa de los ARNm diana
Degradacin de la protena durante la traduccin

Inhibicin de la elongacin de la traduccin

Terminacin prematura de la traduccin

Inhibicin de la iniciacin de la traduccin

PI ARN

PI ARN
CARACTERISTICAS
Piwi interacting RNA (piRNA) es la clase mas grande de RNA no
codificante en clulas animales.
piARN =ARN+Protena Piwi
Longitud de 26-31 nucleotidos

BIOGENESIS
Precursor largo monocatenario
Proceso que es independiente de Drosha y Dicer

FUNCIONES
Clulas germinales
Espermatogenesis
Celulas somticas
Participan en el silenciamiento de genes, especificamente de los
transposones
Expresin Protena
Piwi

Expresin de transposones

Mediante las protenas argonautas Ago 1 y Ago 2 forman un

complejo
Ribonucleoproteico al asociarse a miARN y siARN RISC (RNA-induced
silencing complex) Este complejo se une a un ARNm reprimiendo su
expresin

IMPORTANCIA BIOLGICA DEL

SILENCIAMIENTO

Mantenimiento
de la integridad
del genoma.

Daos causados por los

transposones, retrotransposones
y trasgenes (mediada por siRNA)

Se da de forma natural en las

plantas.

Esta proteccin
incluye la
infeccin por
virus y viroides
(mediada por
siRNA)

Control del
desarrollo e la
planta
mediado por
miRNA, ta-siRNA
y nat-siRNA

Receptor de auxina, genes

relacionados con la delimitacin
y
separacin
de
rganos,
desarrollo
de
estructuras
reproductivas, la divisin celular
durante la morfognesis de las
hojas y flores.

CIENCIA UANL / VOL. VII, No.

4, OCTUBRE-DICIEMBRE 2004

MEJORA DEL CRECIMIENTO DE

PLANTAS
DE TABACO MEDIANTE LA
INHIBICN
DEL GEN DE LA TREHALASA
I. ANAL GMEZ ESCOBEDO*, JOS LUIS
CABRERA PONCE**, LUIS R. HERRERA
ESTRELLA**,
CARLOS HERNNDEZ LUNA*, ROBERTO
MONTES DE OCA LUNA

INTRODUCCIN
Respuesta al estrs abitico (sequa)

Osmoprotectores

Trehalosa(disacarido G.)

Mejoramiento

Transgenes con trehalosa

PROBLEMA:Trehalasa

Solucin: Silenciamiento de genes

RNA antisentido

Disminuir act. enzimatica

MATERIALES Y MTODOS
Clonacin y anlisis del cDNA de la
enzima trehalasa dela alfalfa
Clonacin secuencia antisentido de la
trehalasa, promotores 35s y rd29A

Transgenes por biobalstica

Dependencia de Sacarosa

DISCUSIN
Inhibicin

50%
Treholasa

Acumulacin

Treholosa
Mejor
productividad

Beneficios

Regeneracin
+ fotosintesis
+ biomasa

BIBLIOGRAFIA

http://es.wikipedia.org/wiki/ARNs_asociados_a_Piwi
http://es.scribd.com/doc/7102930/Biomedica
http://en.wikipedia.org/wiki/PiRNA
http://www.unisanitas.edu.co/revista/18/articulos/h
allazgos.pdf

Si hay
Transcripci
n

PTGS
ARNm
degradad
o

No hay
sntesis
proteica

Ncleo

Metilacin o
Remodelamie
nto del ADN

TGS

Formacin de
Heterocromati
na

No ocurre
transcripci
n