CROMATOGRAFIA GASEOSA Y

CROMATOGRAFIA LIQUIDA
GUSTAVO ADOLFO OSPINA G.
LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
UNIVERSIDAD DEL QUINDIO

CROMATOGRAFIA GASEOSA
GUSTAVO ADOLFO OSPINA G

DIVISION
CROMATOGRAFA GAS-LIQUIDO :
Fase estacionaria : Liquido adsorbido sobre un slido
Fase movil
: Un gas inerte
2. CROMATOGRAFA GAS SOLIDO
Fase estacionaria : Especies orgnicas enlazadas a una
Superficie slida.
Fase movil
: Un gas inerte
La fase movil no interacciona con las molculas del analito,su nica
funcin es transportar el analito a
travs de la columna.

INSTRUMENTACIN

CROMATOGRAFIA DE GASES (G.C.)

CROMATOGRAFO DE GASES
Inyector y Automuestreador

Detectores FID, uCDE. NPD, etc

Display de lectura
Rampas de T
Panel de control

Acoplamiento a
Masas y Headspace

Horno y reservorio de columna

Ignictor

SISTEMA DE ENTRADA Y PURIFICACION DE GASES

M
A
N
O
M
E
T
R
O
S

F
I
L
T
R
O
S

GAS PORTADOR:
He , Ne , Ar , CO2 , N2
RANGO DE PRESIONES :
CAUDALES :

10 - 50 psi
1 - 25 mL/minuto

Los caudales pueden determinarse mediante un

rotmetro o mediante un medidor de pompas
de jabon .

CARACTERSTICAS DE LA FASE MVIL PARA

CROMATOGRAFA GASEOSA:

El gas portador cumple bsicamente dos

propsitos: transportar los componentes de
la muestra y crear una matriz adecuada para
el detector.
Un gas portador debe de tener las siguientes
condiciones:

*Debe
ser
inerte
para
evitar
interacciones (tanto con la muestra
como la fase estacionaria)
*Debe ser capaz de minimizar la difusin
gaseosa
*Fcilmente disponible y puro
*Econmico
*Adecuado al detector a utilizar.

SISTEMA DE INYECCIN DE LA MUESTRA

.
La muestra se introduce por medio una microjeringa graduada en microlitros a travs
De una septa de hule en una sola inyeccin .Despus de pasar al puerto de
inyeccin, la muestra entra en la columna donde se efectua el proceso de separacin.

TAMAO DE LA MUESTRA :
0 - 20 uL ( Para columnas de relleno )
10-3 uL ( Para columnas capilares )

La inyeccin se fraciona: Slo el 0.1 a 10 % del volumen de 0.1 a

2 L de muestra inyectada llega a la columna; el resto se elimina.

COLUMNAS

Es el lugar donde ocurre la separacin, comnmente

llamado el corazn de un cromatgrafo. El xito o el
fracaso de una separacin dependern no solo del relleno,
tambin de los materiales de la construccin de la columna
misma.

Materiales de fabricacin:
Cobre, Aluminio, Acero inoxidable, vidrio, Tefln, etc.
Y el material de relleno puede ser un slido, o un lquido
recubriendo un slido.

COLUMNAS

Es la parte mas importante del cromatgrafo de gases y consta de

tres elementos :
Un tubo de metal o de vidrio.
Un soporte slido .
Una fase estacionaria.
FORMAS :

Recta,en espiral y en forma de U .

DIMETRO DEL HELICOIDE : 10 - 30 cm .

TIPO DE MATERIALES : Cu , Al , Ni , vidrio,slice fundida y tefln.

TIPO DE COLUMNAS :

Columnas de relleno
Tipo de soporte : Tierra de diatomeas
Fase estacionaria : Liquido adsorbido en un slido

Longitud : 2 - 3 metros.
Dimetro : 2 - 4 mm.
Dimetro del helicoide : 15 cm.
Tamao de particula : 170 - 250 um.;149 170 um

COLUMNAS CAPILARES:

Capilares de pared recubierta( WCOT).

Capilares de soporte recubierto ( SCOT ).

Material de las WCOT : Cu , Al , plastico,vidrio y las de slice
fundida ( son las mas nuevas ,FSOT ).
Estas columnas son flexibles y pueden doblarse en forma
helicoidal.
Ventajas ( FSOT): Resistencia fsica,flexibilidad, reactividad menor
frente a los componentes de la muestra.
Dimetro de las FSOT : 150 - 200 um.
250 - 320 um.

Columnas (2)

18

EL CORTE DE UNA COLUMNA

TEMPERATURA DE LA COLUMNA
La temperatura optima de la columna depende :
Del punto de ebullicin de la muestra.
Del grado de separacin requerido.
Con una temperatura prxima al punto de ebullicin el tiempo de
elucin es de 2 30 minutos.
Para muestras con un amplio intervalo de ebullicin ( 30 180 oC )
se debe hacer una programacin de temperatura.

22

SISTEMAS DE DETECCION

*DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TERMICA

*DETECTOR DE IONIZACION DE LLAMA
*DETECTOR DE CAPTURA ELECTRONICA
*DETECTOR DE ESPECTROMETRIA DE MASAS
*DETECTOR DE FLUORESCENCIA

25

(CG)

Ejemplos:
Conductividad trmica ( general-no destructivo)
Ionizacin en llama (destructivo)
Captura electrnica (especfico-no destructivo)
26

Detector de ionizacin de
llama

Detector de masas (EM)

Detector de Nitrgeno

Detector de Captura de electrones

Detector de Fluorescencia
Fsforo

Detector de Ionizacin de Llama (1)

29

DETECTOR DE IONIZACIN DE LLAMA

a) Responde al nmero de tomos de carbono que entra al detector

por unidad de tiempo.
b) Es sensible a la mayoria de los compuestos organicos, excepto :
C = O ; R-NH2 y X
c) Es insensible al agua , aire, gases inertes y a los gases no
combustibles( CO2, CS2, NO SO2 H2S ).
d) Posee elevada sensibilidad y un gran intervalo lineal de
respuesta y bajo ruido.

e) Es resistente y facil de utilizar

f) Se trata de un detector destructivo de la muestra .

DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

Consiste en un filamento caliente de tungsteno.
La resistencia elctrica del filamento aumenta con su temperatura.

Cuando de la columna emerge un soluto, la conductividad trmica de

la corriente de gas disminuye, de modo que el filamento se enfra,
baja la resistencia y se observa un cambio en la seal de salida.
32

DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

33

DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD
TERMICA
(CARACTERISTICAS )

A) SENCILLEZ Y AMPLIO INTERVALO DINMICO LINEAL.

B) RESPUESTA UNIVERSAL TANTO A ESPECIES ORGNICAS

COMO INORGNICAS .
C) POSSE UN CARACTER NO DESTRUCTIVO DE LA MUESTRA LO
QUE PERMITE RECOGER LOS SOLUTOS DESPUES DE LA
DETECCION .
D) SENSIBILIDAD RELATIVAMENTE BAJA .

DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES:

El N2 que entra al detector es ionizado por electrones de alta energa
(rayos ) que se emiten de una lmina delgada que contiene 63Ni o
3H. Se produce una corriente hacia el nodo constante. Cuando llega
una molcula de analito con alta afinidad electrnica, capturan
algunos de los electrones y la corriente hacia el nodo disminuye.

Es especialmente sensible a molculas que contienen halgenos,

grupos carbonilo conjugados, grupos nitrilo, compuestos nitro y
compuestos organometlicos.
No es sensible a hidrocarburos, alcoholes y cetonas.

36

DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES

DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES

( CARACTERSTICAS)

a) ES DE RESPUESTA SELECTIVA
b) NO ES SENSIBLE A GRUPOS FUNCIONALES COMO AMINAS,
ALCOHOLES E HIDROCARBUROS .
c) ES MUY SENSIBLE A LOS GRUPOS FUNCIONALES
ELECTRONEGATIVOS TALES COMO HALGENOS, PERXIDOS,
QUINONAS Y GRUPOS NITRO.
d) DETECCION Y DETERMINACION DE INSECTICIDAS CLORADOS .

e) SON ALTAMENTE SENSIBLES Y NO ALTERAN LA MUESTRA DE

MANERA SIGNIFICATIVA.

LA FASE ESTACIONARIA

Respuest
a

ES LA PARTE ACTIVA DE LA COLUMNA, LA SEPARACION SE

EFECTUA ENTRE EL GAS ACARREADOR Y LA FASE
ESTACIONARIA.
LA AFINIDAD DE LA MUESTRA POR LA FASE ESTACONARIA
DETERMINA EL TIEMPO DE PERMANENCIA DE LOS
COMPUESTOS INDIVIDUALES EN LA COLUMNA. LOS
COMPUESTOS CON MENOS AFINIDAD EMERGEN PRIMERO Y
LOS DE MAYOR AFINIAD EMERGEN DE ULTIMO

tR

Area proporcional a la
Cantidad del analito.

to
Inyeccin

tiempo

LA FASE ESTACIONARIA
respuesta del detector

Molc. distribuida en
f.movil
Molc. distribuida
en f.estacionaria

8 9
fraccin

POLARIDADES

EJEMPLO CG

45

ACOPLAMIENTO DE LA
CROMATOGRAFIA DE GASES CON
METODOS ESPECTROSCOPICOS

ANLISIS CUALITATIVO

Comparar el tiempo de retencin del pico del problema con el de

un patrn.

Se agrega al problema una muestra conocida. Si el tiempo de

retencin es idntico al de un componente del problema, el
rea de ese pico aumentar.

Se debe identificar en dos o ms tipos de columnas.

50

ANLISIS CUANTITATIVO

El rea de un pico es proporcional a la cantidad de ese componente.

1- Los cromatgrafos modernos tienen integradores y computadoras
que calculan las reas
2- Planmetro.
3- Para un pico gaussiano, el producto de la altura por el ancho medido a
la altura media es igual al 84 % del rea total
4- Puede dibujarse un tringulo con dos lados tangentes a los puntos de
inflexin en cada lado del pico. El rea es 96 % del rea de un pico
gaussiano.

51

Mtodos Analticos (3)

Cmo los detectores no responden de la misma manera a todos los
solutos, debe medirse un factor de respuesta emprico F

Concentracin del soluto

Concentracin del patrn

=F

rea del soluto

rea del patrn

52

Mtodos de cuantificacin

Estndar externo
Normalizacin de reas
Estndar interno
Altura de pico
Ancho por altura a la mitad

HPLC
(Cromatografa Lquida de alta eficiencia)

ES UNA CROMATOGRAFIA DE ALTA PRESION ES DECIR SE APLICA EL

FLUJO A PRESIN ENTRE 1500 A 2200 PSI. EL TAMAO DE
PARTICULA ES ENTRE 3 Y 10 MICRAS, LA LONGITUD DE LA
COLUMNA ES ENTRE 5 Y 25 CM. Y REQUIERE DE EQUIPO
SOFISTICADO.
EL SISTEMA DE HPLC REQUIERE UNA MEZCLADORA DE
SOLVENTES, UN INYECTOR, Y UNA BOMBA QUE INYECTE EL
LQUIDO A LA COLUMNA. GENERALMENTE LAS COLUMNAS DE
SLICA REQUIEREN ALTA PRESIN PARA QUE EL FLUJO DE LQUIDO
SEA ADECUADO, LA MEZCLADORA SE REQUIERE PARA VARIAR LA
PROPORCIN DE SOLVENTE EN LA FASE MVIL Y EL INYECTOR
PERMITE LA APLICACIN DE LA MUESTRA.

A LA SALIDA DE LA COLUMNA SE COLOCA UN DETECTOR

GENERALMENTE DE ABSORCIN ULTRAVIOLETA O DE FLUORESCECIA
Y UN COLECTOR .
EL ANLISIS DE LA INFORMACIN OBTENIDA SE REALIZA MEDIANTE
UNA COMPUTADORA ACOPLADA AL EQUIPO ; LO QUE PERMITE
ESTANDARIZAR LA CROMATOGRAFIA ,IDENTIFICAR LA NATURALEZA
DE LOS PICOS ELUDOS Y CUANTIFICAR SU CONTENIDO.LOS PICOS
SE RELACIONAN SEGUN SU TIEMPO DE RETENCIN CON
ESTANDARES ,QUE PERMITEN IDENTIFICAR LOS ANALITOS
PRESENTES EN LA MUESTRA. LA CANTIDAD RELATIVA DE CADA UNO
DE ELLOS SE DETERMINA CALCULANDO EL AREA DE CADA PICO.

CROMATOGAFIA LIQUIDA DE ALTA PERFORMANCE (H.P.L.C.)

Jeringa o vlvula para
la muestra

Gases
disueltos
Desgasificador
de disolventes

Precolumna

Introduccin de
la muestra
Espacio trmico

Abastecimiento

de disolvente
Filtro

Columna analtica
Medidor
de presin

Bomba
Vlvula de
seguridad y purga

Lectura

Amplificador
Descarga

Recoleccin
o descarga

59

ES LA TECNICA ANALITICA DE SEPARACIN MS

AMPLIAMENTE UTILIZADA.
CARACTERISTICAS :
a) Su sensibilidad
b) Facil adaptacin a las determinaciones
cuantitativas exactas.
c) Su idoneidad para separar especies no voltiles
d) Aplicabilidad a sustancias de interes en la industria
EJEMPLOS:
Aminocidos,, proteinas, cidos nucleicos,
hidrocarburos, carbohidratos, farmacos, terpenoides,
plaguicidas, antibiticos, esteroides,especies
organometlicas y una variedad de sustancias inorg.

Esquema de un equipo de HPLC

Fases Mviles

Reservorios

Desgasificador
Bomba

Ordenador

Panel principal
De mando
Automuestreador
Columnas
Y hornos

Detectores
CROMATOGRAFO LIQUIDO

SE DEBEN ELIMINAR LOS GASES DISUELTOS( OXIGENO Y

NITROGENO) Y QUE FORMAN BURBUJAS EN LA COLUMNA Y
LOS SISTEMAS DE DETECCIN .
EFECTOS DE LAS BURBUJAS:
-INTERFIEREN EN EL FUNCIONAMIENTO DEL DETECTOR
-PROVOCAN ENSANCHAMIENTO DE BANDA.

DESGASIFICADORES
Puede consistir en:
a) UN SISTEMA DE BOMBEO POR VACIO
b) UN SISTEMA DE DESTILACIN
c) DISPOSITIVOS PARA CALENTAR Y AGITAR LOS DISOLVENTES

DISPOSITIVOS DE FILTRACIN
SON LOS ENCARGADOS DE FILTRAR EL POLVO Y LAS
PARTICULAS SLIDAS EN SUSPENSIN EN LOS DISOLVENTES
EFECTO DE LAS PARTICULAS SLIDAS:
Pueden causar daos :
a) EN LA BOMBA
b) EN LOS SISTEMAS DE INYECCIN
c) OBTURACION DE LA COLUMNA

FILTRACIN Y DESGASIFICACION
DE SOLVENTES
MTODOS COMUNES DE FILTRACION:
*Filtro de entrada del solvente
*Filtro al vaco
*Filtracin en lnea
MTODOS COMUNES DE DESGASIFICACION:
*Sonicacin
*Burbujear Helio
*Desgasificacin electrnica
*Desgasificacin al vaco

DISOLVENTES
LOS DISOLVENTES UTILIZADOS DEBEN SER MUY PUROS.

SE PUEDE UTILIZAR UN SOLO DISOLVENTE (ELUCIN ISOCRTICA).

SE PUEDE CAMBIAR UN SOLO DISOLVENTE POR OTRO LUEGO DE

UN TIEMPO APROPIADO.

SE PUEDE CAMBIAR CONTINUAMENTE DE COMPOSICIN DEL

DISOLVENTE (ELUCIN POR GRADIENTE).

71

CARACTERSTICAS DE LA FASE MVIL PARA

CROMATOGRAFA LQUIDA
*Disponible comercialmente
*Pureza y estabilidad
*Disolver la muestra
*No degradar o disolver la fase estacionaria
*Tener baja viscosidad para reducir las cadas de
presin
*Ser compatible con el detector utilizado;
transparencia ptica

FILTRACIN Y DESGASIFICACION DE
SOLVENTES
MTODOS COMUNES DE FILTRACION:
*Filtro de entrada del solvente
*Filtro al vaco
*Filtracin en lnea

BOMBAS

REQUISITOS O ASPECTOS MAS

IMPORTANTES BOMBA:
*Debe

producir presiones estables hasta

6000 Psi

*Mantener un flujo libre de pulsaciones

*Generar intervalos de caudales
de (0.1 a 10 ml/min)

de flujo

*Control y reproducibilidad del solvente

*Componentes de la bomba resistente a la
corrosin

Sistema de Bombeo

Bombas Reciprocas:
- Son bombas de pistn.
- Las ms usadas en HPLC.
- Problema de pulsaciones.
- Genera presiones sobre 10.000 PSI.
- Flujo constante, relativamente independientes de la viscocidad de la FM.
Bombas de Desplazamiento:
- Bombas de jeringa.
- Flujo constante.
- No genera pulsaciones.
- Independiente de la viscocidad.
- Desventaja, son dificiles de trabajar

Bombas de pistn

VENTAJAS DE LAS BOMBAS RECPROCAS

SU PEQUEO INTERNO ( 35 A 400 uL ).
ALTAS PRESIONES DE SALIDA ( 10.000 PSI ).

FACIL ADAPTACION A LA ELUCIN CON GRADIENTE.

CAUDALES CONSTANTES.

CARACTERISTICAS :
-EL FLUJO TIENDE A SER INDEPENDIENTE DE LA
VISCOSIDAD Y DE LA CONTRAPRESIN.
-EL FLUJO QUE RESULTA ESTA LIBRE DE PULSACIONES.
-LA CAPACIDAD DEL DISOLVENTE ES LIMITADA ,250 mL
-INCOMODIDAD PARA EL CAMBIO DE DISOLVENTE .

BOMBAS NEUMTICAS:

-SON BARATAS Y ESTAN EXENTAS DE IMPULSOS.

-TIENEN LIMITADA CAPACIDAD Y PRESIN DE SALIDA.
-EL CAUDAL DEPENDE DE LA VISCOSIDAD DEL
DISOLVENTE Y DE LA CONTRAPRESION DE LA COLUMNA.
-ESTAN LIMITADAS A PRESIONES MENORES DE 2.000 PSI.
-NO SON UTILIZABLES EN LA ELUCIN CON GRADIENTE

SISTEMA DE INYECCIN DE MUESTRA

SE UTILIZAN MICROJERINGAS CAPACES DE RESISTIR
PRESIONES HASTA DE 1500 PSI.
EL FLUJO DEL DISOLVENTE SE DEBE DETENENE
MOMENTANEAMENTE.
BUCLES DE MUESTA
A) BUCLES INTERCAMBIABLES
Tamao de la muestra : bucles con volumenes de 5-500 uL
Presiones : 7000 psi .

B) BUCLES DE MICROMUESTRA
Tamao de la muestra : bucles con volumenes de 0,5-5 uL

SISTEMA DE INYECCIN DE MUESTRA

SISTEMA DE INYECCIN DE MUESTRA

COLUMNAS

Es el lugar donde ocurre la separacin, comnmente

llamado el corazn de un cromatgrafo. El xito o el
fracaso de una separacin dependern no solo del relleno,
tambin de los materiales de la construccin de la columna
misma.

Materiales de fabricacin:
Cobre, Aluminio, Acero inoxidable, vidrio, Tefln, etc.
Y el material de relleno puede ser un slido, o un lquido
recubriendo un slido.

EL CORTE DE UNA COLUMNA

CLASIFICACIN
Empacadas: Analticas y preparativas
Capilares: W.C.O.T :

(wall coated open tubular)

S.C.O.T:

tubular)

(support coated open

ACOPLES

COLUMNAS ANALITICAS( CARACTERISTICAS )

a) POSEEN UNA LONGITUD ENTRE 10 Y 30 cm.
b) SON RECTAS Y SE PUEDEN ALARGAR.
c) EN OCASIONES SE PUEDEN ENCONTRAR COLUMNAS
CON FORMA ELICOIDAL.
d)EL DIAMETRO INTERNO ES DE 4 A 10 mm.
e) EL TAMAO DE LA PARTICULA DE RELLENO ES DE 5 A
10 um.
LA MAS UTILIZADA ES LA DE 25 CM DE LONGITUD DE 4,6 mm DE DIAMETRO

COLUMNAS DE ALTA EFICACIA

a)
b)
c)
d)
e)

LONGITUD DE LA COLUMNA : DE 3 A 7.5 cm.

DIAMETRO INTERNO : 1 A 4.6 mm
NMERO DE PLATOS : 100.000 PLATOS/METRO.
SON RPIDAS
CONSUMEN POCO DISOLVENTE

FACTORES QUE AFECTAN LA EFICIENCIA DE LA

COLUMNA

LONGITUD DE LA COLUMNA
DIMETRO
TAMAO DE PARTCULAS DEL RALLENO
NATURALEZA DE LAS FASES
CANTIDAD DE LA FASE ESTACIONARIA
TEMPERATURA DE LA COLUMNA
VELOCIDAD DEL GAS PORTADOR
CANTIDAD DE LA MUESTRA INYECTADA
MATERIAL DEL CUAL SE ELABORA LA
COLUMNA
ENROLLADO DE LA COLUMNA

DETECTORES PARA HPLC

DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD
TRMICA

DETECTOR IONICO

DETECTOR DE FLUORESCENCIA

HPLC

(Detector de ndice de refraccin)

94

CONFIGURACIN DEL DETECTOR DE ABSORBANCIA

Volumen de la cubeta: 1-10 uL

Longitud de la cubeta : 2 -10 mm
Presin : 600 psi
Muchos detectores de absorbancia
son dispositivos de doble haz.

DETECTOR ULTRAVIOLETA

CARACTERISTICAS
.

a) UTILIZAN UNA LAMPARA DE MERCURIO COMO FUENTE.

b) LO MAS COMUN EN ESTOS CASOS ES AISLAR LA LINEA INTENSA
A 254 nm POR MEDIO DE FILTROS.
c) SE PUEDEN UTILIZAR LAS LINEAS A 250, 313, 334 Y 335 nm
EMPLEANDO OTROS FILTROS.
c) TAMBIEN UTILIZAN LAS FUENTES DE DEUTERIO O DE
FILAMENTO DE WOLFRAMIO CON FILTROS DE INTERFERENCIA.
d) ALGUNOS INSTRUMENTOS UTILIZAN DISCOS PORTAFILTROS.
e) OTROS INSTRUMENTOS UTILIZAN MONOCROMADORES.

96

Ejemplo

-Utilizan una fuente de

excitacin de mercurio.

-Utilizan uno o mas filtros

para aislar la radiacin
emitida.
-Los instrumentos mas
sofisticados consisten en una
fuente de radiacion de Xe y
emplean monocromadores de
red.

VENTAJAS DE LOS DETECTORES DE FLUORESCENCIA

a) ALTA SENSIBILIDAD
b) SE ANALIZAN MATERIALES DE INTERES FARMACUTICO,
CLINICO, PRODUCTOS NATURALES Y DEL PETROLEO.
c) EL NMERO DE ESPECIES FLUORESCENTES PUEDE AUMENTARSE
MEDIANTE TRATAMIENTO PREVIO DE LAS MUESTRAS, CON
REACTIVOS QUE ORIGINAN DERIVADOS FLUORESCENTES.

VENTAJAS DE LOS DETECTORES DE INDICE DE REFRACCIN

a) RESPONDEN A CASI TODOS LOS SOLUTOS. ES DECIR , SON
DETECTORES UNIVERSALES.
b) SON FIABLES Y NO DEPENDEN DEL CAUDAL.
c) SON MUY SENSIBLES A LOS CAMBIOS DE TEMPERATURA.
d) NO SON TAN SENSIBLES COMO LA MAYORIA DE LOS OTROS
DETECTORES.

VENTAJAS:
a) ELEVADA SENSIBILIDAD.
b) SENCILLEZ

c) ADECUACION Y UNA EXTENSA APLICABILIDAD

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Separaciones de analitos
Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Inyector

Mezcla

Cromatograma

mAU

Bombas

Start Injection
Columna

Detector

Separaciones de analitos
Solventes

tiempo

Respuesta

tR

Area proporcional a la
Cantidad del analito.

to
Inyeccin

tiempo

Tiempos de retencin

LA SUPERFICIE DE LA SILICE COMPLETAMENTE HIDROLIZADA

ESTA CONSTITUIDA POR GRUPOS DE SILANOL QUIMICAMENTE
RECTIVOS

Matrices para HPLC

Nueva matriz para UPLC

APLICACIONES
Bioqumica
Qumica

proteinas
peptidos
nucleotidos

polimeros

Farmacetica

tetraciclinas
corticosteroides
antidepresivos
barbituricos

Productos de Consumo
lipidos
antioxidantes
azucares y acidos

Ambientales
Hidrocarburos poliaromaticos
P.Inorganicos, herbicidas

Clinica
amino acidos
vitaminas
Otros

CROMATOGRAFA LQUIDA vs CROMATOGRAFIA DE GASES

Son al da de hoy dos poderossimas herramientas de anlisis
Ambas admiten acoplamiento con otras tcnicas de deteccin
(hibridacin de tcnicas, por ejemplo con espectrometra de
masas o plasmas..etc)
La cromatografa de gases, requiere muestras gaseosas o
fcilmente volatilizables.
El resto de muestras que no poseen esas caractersticas pueden
ser analizadas por HPLC.

Ambas tcnicas por su versatilidad, y por las diversas posibilidades que

ofrece la seleccin de la columna cromatogrfica, permiten abordar
anlisis de multicomponentes en muestras de diversa procedencia, con
elevada precisin y sensibilidad (dependiendo del detector).
136

=
SISTEMA DE DESGASIFICACION

FILTROS EN RESERVORIOS

SONICADOR PARA
PREPARACION DE
MUESTRA

INSTRUMENTACIN

138