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Microbiologia Clnica
Meios Comerciais
para Provas de Identificao
Fonte: biomedicinapadrao.com;
.brandres-laboratorioclinico.blogspot.com:
FAN08S1:
Rodrigo Queiroz
Sarah Pessoa
Sara Jssica
Gleide Martins
Simone J.
Glaubson Sotero
Patrcia
MEIOS DE CULTURA
gar Esculina
gar Fenilalanina
CTA Cystine Tryticase Agar
Caldo Triptona e SIM
Caldo Malonato
Fonte: www.novamed.co.il
1 gar Esculina
Fonte: www.lookfordiagnosis.com
Princpio
Capacidade de hidrolisar a esculina.
Esculetina com sais de ferro
Forma precipitado marrom escuro ou preto
Glicosidase
www.lookfordiagnosis.com
Utilidade
Diferenciar Enterobacterias e no fermentadores.
Identificao de Streptococcus e Enterococcus
usando o meio com blis (prova de Bile-Esculina).
1 gar Esculina
C
itrato frrico
Esculina
gua destilada.
Fonte: labmedvet.blogspot.com
Inoculao
Inocular colnias
Fonte: www.uwyo.edu
Fonte: www.mediaagar.com
Produto
gar trptic de soja (TSA)
gar sangue
4
1 gar Esculina
Controle de qualidade
Positivo: Klebsiella pneumoniae (13883)
Negativo: Pseudomonas aeruginosa (27853)
Klebsiella pneumoniae
www.infoescola.com
thunderhouse4-yuri.blogspot.com
Fonte: www.lookfordiagnosis.com
Interpretao
Cor original: palha.
Positivo: marrom escuro ou preto.
Negativo: inalterado (palha).
Pseudomonas aeruginosa
asylumresearch.com,
textbookofbacteriology.net
5
1 gar Esculina
Conservao e validade
Conservar de 4 a 8C, de 6 a 8 semanas.
Recomendaes
Glicosidase presente em todas enterobacterias
Shewanella putrefaciens
Produo de H2S
Pseudomonas aeruginosa em
TSA, gar Mueller Hinton
Fonte: biomedicinapadrao.com; Merino,
2007.
Fonte: qualidadeonline.wordpress.com
2 gar Fenilalanina
Princpio
Produo de acido fenilpiruvico a partir da
fenilalanina por ao enzimtica.
Fenilalanina desaminase (FAD)
Utilidade
Diferenciar gneros e espcies de enterobacterias.
2 gar Fenilalanina
Fonte: www.solostocks.com.br
Produto
Meio comercial: gar Fenilalanina:
Soluo de cloreto frrico 10% (frasco mbar)
Fonte: www.pro-analise.com.br
Inoculao
Inculo denso
colnia pura de 18 a 24 horas.
2 gar Fenilalanina
Fonte: perso.wanadoo.es
Interpretao
Adicionar o cloreto frrico no tubo inoculado
Cor original do meio: amarelo palha.
Positivo: colorao esverdeada na superfcie
Negativo: o meio permanece inalterado.
PPA
PPA+
Controle de qualidade
Positivo: Proteus vulgaris (8427) ou
P. mirabilis (12453)
Negativo: Escherichia coli (25922)
2 gar Fenilalanina
Conservao e validade
Conservar de 4 a 8C
seis a oito semanas.
Recomendaes
Interpretado imediatamente aps a adio do reagente
Deve ser feita em at 5 minutos
10
3 CTA
Utilidade
Usado para diferenciar espcies de Haemophilus
spp., Neisseria spp., Branhamella catarrhalis e
Corynebacterium spp.
Fonte: us.vwr.com
Tubo de CTA
3 CTA
Fonte: bagginis.blogspot.com
Produto
Meio comercial Cystine Tryticase Agar Medium.
Carboidratos
glicose, maltose, lactose, sacarose, frutose, manose.
Fonte: aulavirtual.usal.es
Inoculao
Fazer um inoculo bem denso, no centro do meio.
Incubar a 35 C
Jarra com vela acesa (anaerobiose)
Gaze embebida em gua
3 CTA
Fonte: www.condalab.com/pdf/1502.pdf
Interpretao
Cor original: alaranjado.
Positivo: cor amarela
Controle de qualidade
Fonte: www.cdc.gov
Neisseria sicca
N. sicca
N. lactamica
N. sicca
N. sicca
Haemophilus
Manose
parainfluenzae
Fonte: Brasil, 2013.
Branhamella catarrhalis
B. catarrhalis
N. sicca
B. catarrhalis
B. catarrhalis
H. influenzae
3 CTA
Fonte: www.stramedical.com.br
Conservao e validade
Temperatura ambiente por 3 meses.
Recomendaes
Caso de provas negativas
incubar um perodo maior (72 horas)
Autoclave
Princpio
Habilidade de metabolizar o triptofano em indol.
Oxidao do Triptofano e adio de reagentes
Reagente de Erlich ou Kovacs.
Triptofanase
Indol
REAGENTE
Cor vermelha
Fonte: lqes.iqm.unicamp.br
Utilidade
Diferenciar gneros e espcies de
enterobacterias, no fermentadores, Haemophilus
e anaerbios.
Triptofano
Caldo Triptona
SIM (sulfato/indol/motilidade Agar).
Reativo Erlich
Reativo de Kovacs
Xilol ou xileno (dimetil benzeno)
Meio comercial
B) Meio SIM
Inocular com agulha bacteriolgica
meio na posio vertical
Reativos
Xilol
Fonte: www.soq.com.br
Inoculao
A) Meio Caldo Triptona
Inculo denso para Haemophilus
Incubar a 35C por 24 horas ou ate 48 horas
Fonte: www.kairosafe.it
Fonte: www.labfast.com.br
Produto
Meio comercial
Interpretao
Caldo Triptona (reativo de Ehrlich ou Kovacs)
Colocar xilol
homogeneizar vigorosamente e aguardar 1 minuto.
Fonte: dianayjulian.galeon.com/bioquimicas.htm#SIM
Indol positivo
Microrganismo
Proteus vulgaris
Shigella sonnei
Escherichia coli
Fonte: www.biosystems.com.br
Controle de qualidade
H2S
INDOL MOTILIDADE
+
+
+
+
+
SIM- Indol
Recomendaes
Baixar a produo de Indol
pH cido (relacionado a enzima)
Cultura no incubada em aerobiose
5 Caldo Malonato
malonato de sdio
Princpio
Habilidade de utilizar malonato de sdio
como nica fonte de carbono
resultando em alcalinizao do meio
Utilidade
Diferenciar gneros e espcies de enterobacterias e no
fermentadores.
5 Caldo Malonato
Procedimentos
Pesar e hidratar o meio
Ajustar o pH 6,7 0,2.
Distribuir 1,5 mL em tubos com tampa de rosca.
Esterilizar em autoclave.
Deixar esfriar em temperatura ambiente.
Inoculao
Inocular colnias puras de 18 a 24 horas.
Inoculo leve.
Incubar a 35C de 24-48 horas
observando o cultivo diariamente.
Fonte: www.renylab.ind.br
Frmula/Produto
Meio comercial: Caldo Malonato.
Ala bacteriolgica
5 Caldo Malonato
Controle de qualidade
Positivo: Klebsiella pneumoniae (13883)
Negativo: Escherichia coli (25922)
Fonte: dianayjulian.galeon.com/bioquimicas.htm#MALONATO
Interpretao
Cor original do meio: verde.
Positivo: azul.
Negativo: inalterado (verde).
5 Caldo Malonato
Conservao e validade
Conservar de 4 a 10C
6 a 8 semanas.
Recomendaes
Alguns resultados negativos de cor amarela
a fermentao da glicose aumenta a acidez
CONCLUSO
Meios Comerciais para Provas de Identificao
Importncia
Identificar
Detectar
Isolar
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
BRASIL. Agencia Nacional de Vigilncia Sanitria. Microbiologia Clinica para o Controle de Infeco
Relacionada a Assistncia a Sade. Modulo 5 :Tecnologias em Servios de Sade: descrio dos meios de
cultura empregados nos exames microbiolgicos/Agencia Nacional de Vigilncia Sanitria. Braslia:
Anvisa, 2013.