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CULTIVO
REQUERIMIENTOS DE LOS
MEDIOS DE CULTIVO
Requerimientos energticos y no energticos
REQUERIMIENTOS ENERGETICOS
REQUERIMIENTOS ENERGETICOS
1. Fuentes de carbono
Existen muchos tipos de fuentes de carbono, ya que esto est ligado al
metabolismo energtico de la especie microbial; por ejemplo:
Algunas bacterias son capaces de utilizar sustancias muy sencillas como
cido actico, alcohol, citrato sdico, etc.
En otras ocasiones, la mayor parte de los casos, la fuente de carbono
corresponde a azcares en forma de mono o disacridos, como glucosa,
lactosa, maltosa, etc.,
Incluso hay microorganismos que pueden utilizar azcares ms complejos
para obtener energa, como es el caso del almidn.
REQUERIMIENTOS ENERGETICOS
1. Fuentes de carbono
Existen tambin bacterias capaces de utilizar el
gas carbnico CO2 hecho que es caracterstico de
las bacterias fotosintetizantes y quimiolittrofas.
Otros microorganismos pueden crecer a expensas
del metano, benceno e, incluso, hidrocarburos
como fuente de energa: Ejemplo: Cladosporium.
Por ltimo, existen especies como Pseudomonas,
que pueden utilizar como fuente de energa un
gran nmero de componentes hidrocarbonados
diferentes.
En general, conocer el tipo de azcar utilizado por
cada bacteria es muy til para su identificacin
bioqumica y consiguiente clasificacin taxonmica.
REQUERIMIENTOS ENERGETICOS
2. Fuente de nitrgeno
Es una fuente bastante menos energtica que la fuente de carbono pero es
necesaria para el metabolismo microbiano, produciendo tambin energa.
Esta fuente de nitrgeno la van a formar las protenas, pptidos o
aminocidos. Pueden presentarse como protenas completas, que sera el
caso de la gelatina cuya presencia sirve para determinar la actividad
proteoltica o gelatinasa del microorganismo problema, o incluso protenas
an ms complejas, como es el caso de los extractos de carne, sales de
amonio, etc.
Es frecuente encontrar peptonas como fuente de nitrgeno que
corresponden a pptidos o polipptidos dependiendo de su complejidad
pero en cualquier caso son tambin protenas que estn parcialmente
hidrolizadas, aunque no se las deba considerar como tal.
REQUERIMIENTOS ENERGETICOS
2. Fuente de nitrogeno
REQUERIMIENTOS
ENERGETICOS
2. Fuente de nitrogeno
REQUERIMIENTOS NO ENERGETICOS
REQUERIMIENTOS NO ENERGETICOS
1. Fuente de azufre
Todos los microrganismos que utilizan en su metabolismo azufre lo
hacen mayoritariamente en forma de sulfatos, a veces en forma de
tiosulfatos y en otras ocasiones lo pueden obtener a partir de algn
aminocido, ejemplo: metionina, cisteina, tiamina, etc.
Agar SIM
Agar TSI
Agar XLD
SIM
XLD
REQUERIMIENTOS NO ENERGETICOS
2. Fuente de fsforo
En general, las bacterias que utilizan el fsforo lo suelen hacer en
forma de fosfatos.
REQUERIMIENTOS NO ENERGETICOS
3. Iones metlicos
Son utilizados por las bacterias bajo la forma de
iones a concentraciones muy bajas. Por ej: el Sodio,
el Potasio, Magnesio, Hierro,etc.
Tambin se encuentra otro tipo de iones metlicos a
Cobalto, Molibdeno.
Estos iones son esenciales para el crecimiento
microbiano y dependiendo de su concentracin
pueden inhibir el crecimiento de otros, como el
caso del sodio que a concentraciones altas inhibe el
crecimiento de un tipo de microorganismo y facilita
el crecimiento de otros.
Agar Manitol Salado contienen 7.5% ClNa permite
el crecimiento de Staphylococous.
Agar Streptococus KF contiene 6.5% ClNa permite
el crecimiento del Enterococus.
REQUERIMIENTOS NO ENERGETICOS
DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
4. Factores de Crecimiento
No todas las bacterias son capaces de crecer sobre medios donde se
encuentran cubiertas las necesidades elementales.
Existen bacterias que an as no crecen en tales medios o, si lo hacen, es
muy lentamente. A este tipo de bacterias les hace falta adems una serie de
componentes definidos que muchas bacterias no son capaces de fabricar por
s solas para su crecimiento.
A este tipo de componentes se denomina factores de crecimiento y van a
corresponder a algn tipo de aminocido de bacterias muy exigentes o
incluso vitaminas, bases pricas o pirimidinicas, etc.
Agar sangre enriquecido con metionina, cido glutmico y cido nicotnico
para el crecimiento de Xanthomonas.
REQUERIMIENTOS NO ENERGETICOS
DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
5. Factores de Arranque
Son sustancias que van a permitir
a la bacteria en estudio, salir de su
fase de latencia y comenzar su
fase de crecimiento exponencial.
Son fundamentalmente fuentes de
energa glucosa que es utilizado
por las bacterias.
Un factor de arranque puede ser
una fuente no energtica como
algn
in que estimule el
crecimiento.
REQUERIMIENTOS NO ENERGETICOS
DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
6. Factores Inhibidores
Son componentes que van a impedir el crecimiento de algn tipo de
microorganismo por bloqueo de sus procesos metablicos.
Los antibiticos son agentes inhibidores o destructores de la propia bacteria.
La azida sdica inhibe el crecimiento de los Gramnegativos.
Algunos colorantes : Eosina Azul de metileno impide el crecimiento
bacteriano de los Grampositivos.
Cristal Violeta impide el crecimiento de los Grampositivos.
Las sustancias inhibidoras son muy tiles para la identificacin y tipificacin
de pruebas bioqumicas de las bacterias.
Agar Mac Conkey : Crital Violeta y sales biliares.
: Eosina y azul de metileno
Agar Salmonella Shigella
Agar Verde brillante
AGAR CHOCOLATE
HAEMOPHYLLUS
El Agar Chocolate permite el desarrollo
de colonias hmedas, lisas y grises del
Haemophylus influenzae.
Este medio contiene hematina (factor
X) y est enriquecido con otros
cofactores, como el NAD (factor V),
que permite el desarrollo de este
microorganismo.
AGAR SANGRE
BORDETELLA
Agar Sangre enriquecido con
Glicerol - papa (Bordet Gengou)
para crecimiento de Bordetella
pertusis.
Se observa colonias en gotas de
mercurio brillantes es fcil de
apreciar.
AGAR SANGRE
FLAVOBACTERIUM
Agar sangre enriquecido con
nitrgeno suplementario y vitaminas
del complejo B para el crecimiento
del Flavobacterium.
TIPO DE COLONIAS
Superficie de agar Mac Conkey con desarrollo de colonias a las 24 horas.
Se observa colonia rojas fermentadoras de lactosa, el color rojo se debe a
que el microorganismo produce grandes cantidades de cido mixtos.
Se observa colonias no fermentadoras de lactosa, son colonias pequeas y
transparentes.
CLASIFICACION DE LOS
MEDIOS DE CULTIVO
MEDIOS DE CULTIVO
SEGN SU CONSISTENCIA
1. Medios slidos.
2. Medios lquidos.
3. Medios semislidos
POR SU CONSISTENCIA
1. MEDIOS SOLIDOS.
Corresponden a aquellos medios donde la proporcin en agar est
siempre por encima del 1.5% . Koch utiliz, en 1881, por primera
vez la gelatina para obtener un medio slido; posteriormente un
alumno suyo, Hesse, utilizara en su lugar agar. En la actualidad,
para la solidificacin de los medios es el agar el utilizado, ya que la
gelatina presenta el inconveniente de fundir a unos 24C, adems
existen en bacteriologa numerosas bacterias gelatinasa positiva que
destruiran tal medio.
La importancia, pues, de los medios slidos es muy grande, ya que
nos permite el aislamiento, purificacin y visualizacin de su
crecimiento en colonias, as como su posible identificacin a travs
de medios especficos y diferenciales de caracteres slidos,
elaboracin de antibiogramas, etc.
POR SU CONSISTENCIA
1. MEDIOS SOLIDOS.
Agar Sangre, observar la morfologa de las colonias y el tipo de
hemolisis.
Agar Mac Conkey, los diferentes tipo de colonias de acuerdo al
consumo de lactosa.
Agar Mueller Hinton, prueba de susceptibilidad a los
antimicrobianos.
AGAR SANGRE
HEMOLISIS
Los Streptococus se clasifican en
base a su propiedades hemoliticas en
agar sangre.
La hemolisis parcial de los eritrocitos
da como un resultado un color
verdoso del medio slido que rodea
las colonias (alfa-hemolisis).
Los que producen hemolisinas que
lisan los eritrocitos, produce un
aclaramiento del medio que rodea las
colonias (beta-hemolisis).
AGAR SANGRE
AGAR SANGRE
ANTIBIOGRAMA
Se basa en la difusin del
antibitico sobre el agar, y
determinar la sensibilidad
(formacin de halo alrededor
del
antibitico)
y/o
resistencia
(crecimiento
alrededor del antibitico).
POR SU CONSISTENCIA
2. MEDIOS LIQUIDOS.
Corresponden a los que tambin se denominan caldos, no contienen
agar y su composicin, adems de agua suele contener al menos
una fuente de carbono, sales minerales, y, en algunas ocasiones
segn las caractersticas del medio, factores de crecimiento,
vitaminas, peptonas, ciertos aminocidos, etc. Son de gran utilidad
para la realizacin de recuentos bacteriolgicos por turbidimetra,
especialmente til en levaduras, para la realizacin de inculos, para
obtener productos metabolitos primarios o secundarios, creados por
los propios microorganismos como, por ejemplo, antibiticos, cidos
lcticos, etc.
Caldo MRVP, para investigar la ruta utilizada en la degradacin de
glucosa
Caldo Peptona, para investigar la produccin de Indol.
Caldo Lactosado, para investigar la formacin de cido y gas
INDOL
POR SU CONSISTENCIA
3. MEDIOS SEMISLIDOS.
Son medios intermedios entre los medios lquidos y los slidos
donde su proporcin en agar suele ser inferior al 0.5% pero siempre
suelen presentar una cierta cantidad que le proporcione una
consistencia semislida.
Son tiles para ciertas pruebas bioqumicas como por ejemplo, la
prueba de oxidacin- fermentacin, que permiter conocer el tipo de
metabolismo oxidativo o fermentativo de la bacteria problema.
Agar O-F Hugh Leiffson
Agar SIM, estudiar movilidad, Produccin de H2S, Indol.
Agar MIO, estudiar movilidad, Produccin de Indol y Ornitina.
SIM
MEDIOS DE CULTIVO
SEGN SU PRESENTACION
1. Medios deshidratados o liofilizados.
2. Medios ya preparados:
A. Slidos en placa petri.
B. Slidos en tubo.
B.1. Inclinado
B.2. Semi-inclinado (pico de flauta)
C. Lquidos en tubo.
D. Semislidos en tubo.
E. De doble fase en frasco o tubo.
POR SU PRESENTACION
1. MEDIOS DESHIDRATADOS
Son medios que se comercializan tal
cual y una vez en el laboratorio deben
ser preparados adicionando la cantidad
de agua correspondiente en condiciones
totalmente aspticas o una vez
preparados en estas condiciones lo
esterilizaramos en el autoclave. Su
composicin es muy variable y puede
ser de tipo bsico o ms complejo.
POR SU PRESENTACION
2. MEDIOS YA PREPARADOS
Son medios que han sido elaborados por las casas comerciales
presentando un determinado control de calidad y caractersticas
especficas adecuadas a cada tipo de cultivo. Este tipo de medios
pueden presentarse en forma de placas, en tubo, como formas
slidas, en frascos, como medios semislidos o lquidos, en sistemas
de doble fase, etc.
POR SU PRESENTACION
A. Medios slidos en Placa Petri
POR SU PRESENTACION
B. Medios slidos en tubo
Los medios slidos en tubo corresponden a tubos:
POR SU PRESENTACION
B.2. Con agar semi-inclinado o Pico
de flauta
Estos tipos de medios son tiles para
observar
el
crecimiento
aerobio
microbiano si se ha sembrado por estra,
el crecimiento anaerobio microbiano si se
ha sembrado por picadura (anaerobiosis
facultativa).
Agar KIA
Agar LIA
Tambin es til para la conservacin de
cepas, porque la desecacin es menor en
medios slidos en tubo que en las placas
petri.
POR SU PRESENTACION
C. Medios lquidos en tubo
Estos medios no permiten visualizar
colonis
pero
tienen
muchas
aplicaciones como, por ejemplo,
pruebas bioqumicas que permiten:
La determinacin del Indol.
La reduccin de nitratos a nitritos
La fermentacin de la glucosa,
lactosa u otro azcar, etc.
Pueden servir para aumentar la
concentracin del microorganismo
inoculado, es decir, realizar un
inculo, y otras aplicaciones.
Estos medios no contienen en
ningn caso agar.
POR SU PRESENTACION
D. Medios semislidos en tubo
Se siembran por picadura y corresponden a un trmino medio entre
los lquidos y los slidos. Se utilizan en ciertas pruebas bioqumicas
como:
La prueba de la movilidad
La prueba de oxidacin-fermentacin o de Hugh-Leiffson.
POR SU PRESENTACION
E. Medios de doble fase en frasco
Son frascos constituidos por una fase slida y otra
lquida, por ejemplo, para la determinacin rpida de
microorganismos en sangre. Ambas fases crecen en el
mismo medio y pueden tener un carcter aerobio o
anaerobio. Suelen contener obturadores de caucho
manteniendo completamente aislado el medio.
Medio de Ruiz Castaeda para el aislamiento de
Brucella.
Medio para Hemocultivo
MEDIOS DE CULTIVO
SEGN SU USO O UTILIZACION
1. Medios para aislamiento.
A. Enriquecidos
B. Selectivos
C. Diferenciales
2. Medios para crecimiento general.
3. Medios para identificacin.
4. Medios para mantenimiento de cepas.
INDOL
UTILIZACION DE LA GLUCOSA
AGAR UREA
El tubo de la derecha demuestra
un color rojo, lo que indica una
reaccin positiva.
El tubo de la izquierda no
presenta viraje de color
1. Medios naturales.
2. Medios semisintticos.
3. Medios sintticos.
4. Medios complejos.
1. COMPOSICION
Infusin cerebro de ternera
Infusin corazn de res
Peptonas
Fosfato disdico
Glucosa
Cloruro de sodio
Agua destilada
20.0 g
25.0 g
10.0 g
2.5 g
2.0 g
5.0 g
1000 ml
2. FINALIDAD
AGAR NUTRITIVO
1. COMPOSICION
Peptona
Extracto de carne
Cloruro de sodio
Agar - Agar 12.5 g
Agua destilada1000 ml
17.0 g
3.0 g
5.0 g
3.0 g
10.0 g
10.0 g
10.0 g
5.0 g
Rojo fenol
Verde brillante
Agar - Agar
Agua destilada
0.08 g
0.0125 g
20.0 g
1000 ml
17.0 g
3.0 g
10.0 g
1.5 g
5.0 g
Rojo neutro
Cristal violeta
Agar - Agar
Agua destilada
0.03 g
0.001 g
12.5 g
1000 ml
TIPO DE COLONIAS
Superficie de agar Mac Conkey con desarrollo de colonias a las 24 horas.
Se observa colonia rojas fermentadoras de lactosa, el color rojo se debe a
que el microorganismo produce grandes cantidades de cido mixtos.
Se observa colonias no fermentadoras de lactosa, son colonias pequeas y
transparentes.
AGAR TCBS
1. COMPOSICION
Peptona de caseina
Peptona de carne
Bilis de buey desecada
Sacarosa
Cloruro de sodio
Agar-agar
5.0 g
5.0
5.0
20.0
10.0
14.0
Citrato de sodio
Tiosulfato de sodio
Colato de sodio
Citrato hierro (III)
Azul de timol
Azul de Bromotimol
10.0 g
10.0 g
3.0
1.0
0.04
0.04
AGAR TCBS
Las colonias amarillas, se
deben a la utilizacin del citrato
y a la formacin de cido por la
utilizacin de la sacarosa del
medio.
Vibrio Cholerae.
V. Algynolyticus
V. Cincinatiensis
V.fluvialis
V. Furnisii
V. metsnichnikovii
AGAR TCBS (pH del medio 8.6 +/- 0.1)
El pH alcalino inhibe notablemente a las enterobacterias.
AGAR
TCBS
Las colonias gris verdosa
semitranslcida indica que el
microorganismos no utiliza la
sacarosa.
Vibrio parahaemolyticus
V. Mimicus.
V. Damsela
V. hollisae
10.0g
5
5
2
Eosina amarilla
Azul de metileno
Agar-agar
Agua destilada
0.3 g
0.065
13.5
1000 ml
Los
metileno inhiben a las bacterias
Grampositivas y a las Gramnegativas
exigentes.
Tambin
se
combinan
precipitando a pH cido, actuando como
indicadores de produccin de cidos.
Los fermentadores fuertes de lactosa:
Escherichia coli, producen colonias color
negro verdoso con brillo metlico. El
brillo metlico indica una fuerte
produccin de cido con una cada de pH
a 4.5 o menos.
Los productores dbiles de cidos,
producen colonias violeta, Klebsiella,
Enterobacter, Serratia, Hafnia.
Los no fermentadores de lactosa, forman
colonias incoloras. Salmonella,
Shigella, Proteus..
5.0 g
5
10
8.5
8.5
8.5
1.0 g
0.0003
0.025
13
1000 ml
1. COMPOSICION
Extracto de carne 1.0 g
Agua destilada
D-Manitol
10 g
Agar agar
Peptona
10.0
Rojo fenol
Cloruro de sodio 75 g
2. DESCRIPCION DEL MEDIO
A. Requerimiento energtico:
Extracto de carne, D-manitol, peptona
B. Requerimiento no energtico
Cloruro de sodio, agua, destilada, agar.
C. Segn su proporcin en agua
D. Segn su uso o utilizacin
E. Segn la composicin que presenta
F. Segn su presentacin
1000 ml
15 g
0.025 g
A. INTRODUCCION
La configuracin del medio en pico de flauta
(Pico y Fondo) determina la existencia de 2
compartimientos La porcin inclinada, expuesta
al oxgeno atmosfrico es aerobia.
- La porcin inferior llamada fondo esta
protegida del aire y es relativamente anaerobia.
La porcin expuesta al oxigeno (INCLINADA),
tiende
a
tornarse
alcalina
por
la
descarboxilacin oxidativa de protenas, y se
desarrolla un pH alcalino y se vuelve rojo.
En el fondo del tubo donde no hay oxgeno , la
degradacin proteica es mnima y se pueden
detectar incluso pequeas cantidades de cido
por la aparicin de un color amarillo.
A. INTRODUCCION
La configuracin del medio en pico de flauta (Pico y Fondo)
determina la existencia de 2 compartimientos La porcin
inclinada, expuesta al oxgeno atmosfrico es aerobia.
- La porcin inferior llamada fondo esta protegida del aire y
es relativamente anaerobia.
La porcin expuesta al oxigeno (INCLINADA), tiende a
tornarse alcalina por la descarboxilacin oxidativa de
protenas, y se desarrolla un pH alcalino y se vuelve rojo.
En el fondo del tubo donde no hay oxgeno , la degradacin
proteica es mnima y se pueden detectar incluso pequeas
cantidades de cido por la aparicin de un color amarillo.
INTERPRETACION
K/K: Microorganismo no fermentador
Son incapaces de producir cido por fermentacin de la
glucosa o lactosa, no hay cambio en el medio.
K/A Microorganismo no
fermentador de lactosa
El microorganismo es capaz
de utilizar la glucosa pero
no a lactosa, por lo cual
produce
una
pequea
cantidad de cido, ya que la
concentracin del medio es
de 0.1% de glucosa, por lo
cual
al
comenzar
a
degradarse las protenas del
pico se comienza a liberar
aminas lo que da un color
rojo en el pico. En el fondo
del tubo la degradacin
proteica es insuficiente para
contrarrestar
el
cido
formado y se mantiene de
color rojo.
Lactosa:
Glucosa:
CO2 Gas:
H2S:
Lactosa:
Glucosa:
CO2 Gas:
H2S:
Lactosa:
Glucosa:
CO2 Gas:
H2S:
AGAR LIA
1. COMPOSICION
Peptona
Extracto de levadura
Dextrosa
Lisina
Citrato amonio frrico
3.0 g
3.0 g
1.0 g
10.0 g
0.5g
Tiosulfato de sodio
0.04 g
Prpura de bromocresol 0.02g
Agar - Agar
15.0 g
Agua destilada
1000 ml
SIMBOLO:
INTERPRETACION:
DESCARBOXILACION
DESAMINACION
LISINA
H2S
SIMBOLO:
INTERPRETACION:
DESCARBOXILACION
DESAMINACION
LISINA
H2S
SIMBOLO:
INTERPRETACION:
DESCARBOXILACION
DESAMINACION
LISINA
H2S
CALDO PEPTONA
1. COMPOSICION
Peptona
10.0 g
Cloruro de sodio 9 g
Agua destilada
1000 ml
2. DESCRIPCION DEL MEDIO
A. Requerimiento energtico:
Peptona
B. Requerimiento no energtico
Cloruro de sodio, agua
C. Segn su proporcin en agua
D. Segn su uso o utilizacin
E. Segn la composicin que presenta
F. Segn su presentacin
INDOL
INTRODUCCION:
El indol, un bencilpirrol, es uno de los productos de degradacin
metablica del aminocido triptofno. Las bacterias que poseen la
enzima triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el
triptofno con produccin de indol, cido pirvico y amoniaco.
La prueba de indol esta basada en la formacin de un complejo rojo
cuando
el
indol
reacciona
con
el
grupo
del
pdimetilaminobenzaldehido. Este es el principio activo del reactivo de
Kovac y Erlich. Debe emplearse un medio rico en triptofno.
INDOL
REACTIVO DE KOVAC
Alcohol amlico o isoamlico puro
150 ml
p-dimetilaminobenzaldehido
10 g
HCl concentrado
50 ml
TECNICA:
Inocular el caldo peptonado e incubar a 37C por 24 horas. Luego
aadir 5 gotas del reactivo por la pared del tubo.
INTERPRETACION:
Positivo: El desarrollo de un color rojo fucsia en la interfase del
reactivo y el caldo, indica la presencia del indol.
2.0 g
1.0 g
5.0 g
0.2 g
Azul de bromotimol
Fosfato dipotsico
Agar - Agar
Agua destilada
0.08 g
1.0 g
12.5 g
1000 ml
INTRODUCCION
El citrato de sodio es una sal del cido ctrico, un
compuesto simple que constituye uno de los
metabolitos del ciclo de Krebs . Algunas bacterias
pueden obtener energa por va distinta de la de
fermentacin de hidratos de carbono, utilizando
citrato como nica fuente de carbono. La
determinacin de esta caracterstica importante para
la identificacin de muchas enterobacterias.
TECNICA
Tomar una colonia bien aislada de la superficie de un
medio e inocular en una sola ,estra en el pico del
agro citrato e incubar a 37C por 24 - 48 horas.
INTERPRETACION
El desarrollo de un color azul intenso en 24 a 48
horas indica una prueba positiva y revela que el
organismo en estudio ha sido capaz de utilizar el
citrato contenido en el medio, con la formacin de
productos alcalinos.
AGAR UREA
1. FUNDAMENTO
En el medio de cultivo, la triptena y la glucosa,
aportan los nutrientes para el desarrollo de
microorganismos.
El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el
rojo de fenol es el indicador de pH.
Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la
enzima ureasa liberando amonaco y dixido de
carbono.
Estos productos alcalinizan el medio haciendo virar el
rojo de fenol del amarillo al rojo.
En este medio, la fermentacin de la glucosa activa la
enzima ureasa, acelerando la velocidad del
metabolismo en aquellos organismos que hidrolizan
lentamente la urea, como especies de Enterobacter o
Klebsiella.
AGAR SIM
1. COMPOSICION
Peptona de caseina
20.0 g
Peptona de carne
6.6 g
Tiosulfato de sodio
0.2 g
Citrato hierro(III) amonio
0.2 g
Agar - agar
3.0 g
Agua destilada
1000 ml
Agar S.I.M.
Este medio de cultivo permite comprobar la formacin de sulfuro, la produccin de
indol y observar la movilidad.
PRODUCCION DE H2S
Se evidencia la formacin de cido
sulfihidrico
por la formacin de un
precipitado negro. Esto se logra mediante
las siguientes etapas:
Liberacin de sulfuro a partir del tiosulfato
por accin enzimtica de la bacteria.
Acoplamiento del sulfuro (S-2) con el ion
hidrogeno (H+) para formar gas H2S.
Deteccin del gas H2S mediante sales de
metales pesados como hierro, logrando la
forma de sulfuro del hierro, que es un
precipitado negro.
Agar S.I.M.
MOVILIDAD
Los medios para detectar movilidad contienen
concentraciones de agar de 0.4% o menos. A
mayor concentracin del gel es demasiado
firme como para permitir la diseminacin de
los organismos.
La Motilidad se pone de manifiesto por la
turbidez difusa del medio de cultivo alrededor
del canal de la picadura.
La no motilidad se caracteriza por el
crecimiento producido exclusivamente a lo
largo de dicho canal.
INDOL
Despus de agregar unas gotas del reactivo
de kovacs, si aparece un color rojo-cereza
dela capa del reactivo indica la presencia de
Indol.
CALDO MRVP
1. COMPOSICION
Peptona de caseina
Dextrosa
Fosfato dipotsico
Agua destilada
7.0 g
5.0 g
5.0 g
1000 ml
I.M.V.I.C.
INDOL
ROJO DE METILO
VOGES PROSKAUER
CITRATO DE SIMMONS
I.M.V.I.C.
I.M.V.I.C.
Indol:
Rojo de Metilo:
Voges Proskauer:
Citrato de Simmons:
Indol:
Rojo de Metilo:
Voges Proskauer:
Citrato de Simmons:
DIFERENCIACION
BIOQUIMICA
TSI
LIA
Indol
Rojo de Metilo
Voges Proskauer
20.0 g
25.0 g
10.0 g
5.0 g
Fosfato disdico
Glucosa
Agua destilada
2.5 g
2.0 g
1000 ml
AGAR SANGRE
1. COMPOSICION
Peptona de caseina
Peptona de carne
Lactosa
Sales biliares
Cloruro de sodio
17.0 g
3.0 g
10.0 g
1.5 g
5.0 g
Rojo neutro
Cristal violeta
Agar - Agar
Agua destilada
0.03 g
0.001 g
12.5 g
1000 ml
AGAR CHOCOLATE
1. COMPOSICION
Peptona de caseina
Peptona de carne
Lactosa
Sales biliares
Cloruro de sodio
17.0 g
3.0 g
10.0 g
1.5 g
5.0 g
Rojo neutro
Cristal violeta
Agar - Agar
Agua destilada
0.03 g
0.001 g
12.5 g
1000 ml
AGAR SABAURAUD
1. COMPOSICION
Peptona
10.0 g
Dextrosa
40.0 g
Agar - Agar
12.5 g
Agua destilada
1000 ml
2. DESCRIPCION DEL MEDIO
A. Requerimiento energtico:
Dextrosa, peptona
B. Requerimiento no energtico
Agar, agua
C. Segn su proporcin en agua