Tesistas: Maribel Tenesaca

Valeria Coronel
Directora: Dra. Ins Malo

Estudio de factibilidad de un proceso de
biorremediacin del colorante ndigo presente en
aguas residuales de la industria textil en la
Ciudad de Cuenca, a travs de hongos
ligninolticos.
La industria textil en el Ecuador:

Las Provincias con mayor numero de industrias textiles:
Pichincha, Imbabura, Tungurahua, Azuay y Guayas.

Segundo sector manufacturero que mas mano de obra emplea ,
alrededor de 50.000 directamente 200.000 lo hacen
indirectamente.

El 80% de las industrias textiles ecuatorianas, no emplean un
tratamiento de sus aguas residuales y son vertidas en principales
fuentes hdricas.


Problemas Ambientales Graves:
Husseiny, Radulesco, INDUSTRIA TEXTIL, 2008






1) La interrupcin del grado de iluminacin en el medio
acutico
2) Los sub productos generados










Se estima que entre 125 a 170 ml de agua residual de tipo textil se
originan por kilogramo de producto coloreado







En la Ciudad de Cuenca existen 44 pequeas industrias textiles, las
mismas que 8 son tintoreras donde se realizan los procesos de lavado y
tinturado, manipulando diferentes colorantes para el teido de su
materia prima















Estudios previos dirigidos por ETAPA, llamado (Categorizacin ambiental
de los ros de la ciudad de Cuenca, a travs de bioindicadores), cuyo
resultado es de tipo III (Aguas muy contaminadas) en la cuenca baja del
Ro Yanuncay.

.

Informacin adicional realizada en el Ro Yanuncay, expone:
alteraciones tanto en su caudal
sus condiciones fsicas y qumicas











Desage de aguas servidas, sector puente de madera de Misicata.
OBJETIVOS
Analizar la factibilidad para la implementacin
de un proceso de biorremediacin del colorante
ndigo, presente en aguas residuales de la
industria textil en la Ciudad de Cuenca, a travs
de hongos ligninolticos
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVOS
6. Determinar y caracterizar hongos ligninolticos nativos biodegradadores del colorante
ndigo.

OBJETIVOS ESPECIFICOS
1. Insolar cepas de hongos Ligninolticos.
2. Determinar las caractersticas microbiolgicas de cepas de hongos
ligninolticos.
3. Formular consorcios de cepas de hongos ligninolticos
4. Evaluar las condiciones idneas de colorante ndigo durante los tratamientos
fngicos a campo abierto.
5. Analizar y valorar los niveles de biodegradacin de cepas de hongos ligninolticos
H0: La actividad biodegradadora de los microorganismos nativos
(hongos ligninolticos) no son similares en el proceso degradativo
del colorante ndigo.

H1: La actividad biodegradadora de los microorganismos nativos
(hongos ligninolticos) son similares en el proceso degradativo del
colorante ndigo.

PROCESOS DE PRODUCCIN DE LA INDUSTRIA
TEXTIL EN CUENCA-ECUADOR
Pre
tratamiento
Teido
Acabado
Desengomado
Se remueve el
agente encolante
Encimado
cido actico +piedra pmez + enzimas
Focalizado.
Permanganato de Potasio; Glucosa de maz + Sosa caustica
Teido: 1 a 2 horas y media
Fijacin: cido actico + perxido de hidrgeno +
metadisulfito de sodio
Pastas de almidn o goma.
Proceso puede ser manual, semiautomtico o
completamente automtico.
PRENDAS AL INICIO PRENDAS FINALIZADAS

COLORANTE MAS USADO EN LA INDUSTRIA TEXTIL
Los colorantes de tipo azo, son los mas usados para la coloracin de fibras.
Se componen de un grupo de tomos denominados:
Cromforos
Auxcromos
Estructura qumica del colorante
ndigo.
Derivados del indl.
Durabilidad del color y estabilidad a los rayos UV.
Sustancia recalcitrante.


C
12
H
10
O
2
N
Industria de los blue jeans.
Punto de fusin (390-392C).
Es insoluble en agua, alcohol o ter.
Soluble en cloroformo, nitrobenceno, o cido
sulfrico concentrado.

Acido actico , sulfato sdico, dicromato sdico, pH variado, altos valores de
DQO, DBO, color , turbiedad, solidos suspendidos y temperatura alta.

Comparacin de los resultados con los limites mximos
permisibles de descargas de aguas residuales
TULSMA
Parmetro
s
Expresa
do
como
Unidad
Lmite mximo permisible
Descarga
al sistema
de
alcantarilla
do
Descarga a un
cuerpo de
agua dulce
Color real
Color
real
unidades
de color
250 * Inapreciable
en dilucin:
1/20
DBO
5

D.B.O
5
. mg/l 500 100
DQO
D.Q.O. mg/l 5-9 250
pH
pH < 40 5-9
Temperat
ura
o
C 220 < 35
Slidos
suspendi
dos
totales
mg/l 0,2 100
Compues
tos
fenlicos
Expresa
do como
fenol
mg/l 250 0,2
Sustancias
solubles al
Hexano
mg/l

100
RESULTADOS ETAPA
Parmetro Mtodo Fecha de
Realizacin
Unidad
es
Efluentes
de
proceso
Color
aparente
SM1220
C
2013/04/18 UC
3190
Color real SM1220
C
2013/04/18 UC
198
DBO5 PEEL/LS/
FQ/01
2013/04/18
2013/04/23
mg/l
51
DQO PEEL/LS/
FQ/06
2013/04/18 mg/l
206
pH SM 4500
H B
2013/04/18 mg/l
9.67
Slidos
suspendi
dos
PEEL/LS/
FQ/04
2013/04/18 mg/l
58
Slidos
Totales
PEEL/LS/
FQ/05
2013/04/17
mg/l
914
Sustancia
s solubles
al Hexano
SM 5520
D
2013/04/19
mg/l
4.0
HONGOS LIGNINOLTICOS DEGRADADORES DEL
COLORANTE NDIGO

Crecen sobre material con alto contenido de celulosa.
Su pared celular (quitina y celulosa).
5-20 m.
esfrica, cilndrica o globosa.
blanco, amarillo, rosa
Divisin Eumycota y subdivisin Basidiomycota.
Son capaces de degradar una gran diversidad de polmeros
orgnicos complejos.



FASE DE CAMPO

Toma de muestras de hongos ligninolticos

Tipo de muestreo: AES


FASE DE LABORATORIO

Tipificacin de muestras



FASE DE LABORATORIO


Aislamiento : Lavado con agua Milli - Q
Siembra : Medio PDA (Patata Dextrosa Agar).
Desarrollo fngico exitoso a los 7 das de 3 cepas.
Conservacin: Cajas petri.
Tubos de ensayo (tcnica a pico de clarn )


FASE DE LABORATORIO


Caractersticas de las cepas de hongos ligninolticos seleccionadas
en procesos de biorremediacin del colorante ndigo a nivel de
laboratorio.
El objetivo de estas prcticas consiste en evidenciar el
comportamiento de los microorganismos seleccionados frente al
contaminante en estudio.

Colorante ndigo vs hongos ligninolticos


Tolerancia de hongos ligninolticos seleccionados frente
al colorante ndigo


Prueba 1: Colorante ndigo en papel filtro


Tolerancia de hongos ligninolticos seleccionados frente
al colorante ndigo


Prueba 2: Colorante ndigo disuelto en agar


Calculo de la velocidad del crecimiento micelial


Desarrollo de hongos ligninolticos con
colorante ndigo.


Prueba de factibilidad de un proceso de biodegradacin
del colorante ndigo en un medio lquido




Sample Comment Con. [ppm] Absor
Prueba H2 Solucin 1:10 0.174673 0.0015
Prueba H3 Solucin 1:10 12.1106 0.1026
Prueba H4 Solucin 1:10 4.47923 0.0379


Prueba de antagonismo con tres cepas de hongos
ligninolticos seleccionados para el proceso de
biorremediacin del colorante ndigo


Frmula de Van Den Heuvel
DELGADO, Ernesto y otros. Op. Cit. p. 32


()% = /100

PRUEBA DE ANTAGONISMOS ENTRE
HONGOS LIGNINOLTICOS
SELECCIONADOS.
Testigo Pruebas de Antagonismo
Frmula de
Van Den
Heuvel
Cdig
o
cm
Cdig
o
Cm Cdigo cm
I%=(R-
r)/Rx100
H2
7 H2 4 H3 5
I%= 20
7 H2 5 H4 4
I%= 25
H3
6 H3 4 H2 5
I%= 20
6 H3 4 H4 5
I%= 20
H4
6 H4 5 H2 4
I%= 25
5 H4 4 H3 5
I%= 20


CASTELLANOS, Guillermo, y otros, Manejo del hongo en el laboratorio, Gua Prctica 1, Editorial CIAT (Centro
Internacional de Agricultura Tropical).


Conteo de UFC (Unidades Formadoras de Colonias)
en hongos ligninolticos H2, H3 y H4.
Vista general
Vista cuadrante superior izquierdo
Agua Milli Q Raspar Filtrar
CARACTERSTICAS MACROSCPICAS DE LOS 3 HONGOS
DEGRADADORES
H2 Rhizopus s.p
Al principio es blanca y al madurar
es gris a caf.

H3 Trichoderma sp.
Las colonias son al principio blancas
y algodonosas. Cuando se
desarrollan bajo condiciones de luz
alterna, presentan una banda
delgada e incolora con otra banda de
un color verde oscuro.

H4 Mucor sp.
Al principio blanco y al madurar gris
o amarilla, la superficie se cubre con
manchas oscuras.
CARACTERSTICAS MICROSCPICAS DE LOS 3 HONGOS
DEGRADADORES
H2 - Rhizopus sp.

100 a 200 m dimetro
Esporagio reventada (forma
de sombrero chino )
Columnela ovoide
Hifas gruesas
CARACTERSTICAS MICROSCPICAS DE LOS 3 HONGOS
DEGRADADORES
H3 Trichoderma sp.

Sistema de ramificacion
apariencia piramidal
Clamidosporas son intercalares y
forman el micelio
Conidioforos verdes
Fialides largas y delgadas
CARACTERSTICAS MICROSCPICAS DE LOS 3 HONGOS
DEGRADADORES
H4 Mucor sp.

Esporangiosporas amarillas
o caf.
Ausencia de rizoides


Variables e indicadores:
a) Temperatura ambiente (
o
C),
b) pH,
c) Concentracin (ppm) del
colorante ndigo
d) Velocidad de decoloracin
(Das).
La actividad microbiolgica
se registr durante ocho das.

Tratamiento H2
Rhizopus sp.
Tratamiento H3
Trichoderma sp
Tratamiento H4
Mucor sp.
Existe diferencia significativa de los tratamientos con respecto al testigo
referencial.
De igual manera podemos establecer que existe diferencia estadstica entre los
tratamientos.

Intervalos de confianza (0,5% segn Murray R. Spiegel, Segunda edicin).

Grafico de Biorremediacin del colorante ndigo mediante
tratamientos fngicos
Tratamiento H4 Tratamiento H3 Tratamiento H2 Testigo
0,397
0,325
0,297
0,207
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i

n

d
e
l

c
o
l
o
r
a
n
t
e

n
d
i
g
o

(
p
p
m
)
.
Biorremediacin del colorante ndigo con tres Tratamientos Fngicos.
Es evidente que las medias procedentes de los tratamientos H3 (0,29) y H4 (0,20) son
significativamente diferentes.
De esta manera aceptamos la hiptesis:
H0: La actividad biodegradadora de los microorganismos nativos (hongos
ligninolticos) no son similares en el proceso degradativo del colorante ndigo.









pH vs Tratamientos fngicos








Temperatura vs Tratamientos fngicos



Tiempo vs Tratamientos fngicos

Durante el proceso de biorremediacin del colorante ndigo, se consider las
siguientes variables: pH, temperatura y tiempo con respecto a la remediacin del
colorante, expresado en (ppm). A continuacin enseamos los resultados:

Menor concentracin de colorante mayor velocidad de biodegradacin
El pH neutro beneficia la biodegradacin

Mejor tratamiento cepa H4 (Mucor sp.),
Concentracin de colorante de 0,117 ppm
17C
pH neutro
6 das

El uso pertinente de los microorganismos nativos (hongos ligninolticos),
presentados en nuestro proyecto de investigacin, nos permite compartir con
entusiasmo una de las alternativas verdes con fines de reducir la contaminacin
de principales fuentes hdricas, alteradas por el desarrollo industrial.

La adecuada manipulacin de los materiales en el laboratorio, certifica el xito en
la investigacin en la microbiologa.

La formulacin de consorcios entre hongos ligninolticos, es factible debido a su
bajo porcentaje de inhibicin, segn la frmula de Van Den Heuvel.

Tres cepas de hongos ligninolticos, identificados como H2 (Rhizopus sp.); H3
(Trichoderma sp.) y H4 (Mucor sp.), presentan mejor desarrollo fngico a
temperatura ambiente.
Mejor tratamiento cepa H4 (Mucor sp.),


Considerar el grado de peligrosidad al que nos sometemos.

Realizar pruebas de biorremediacin del colorante ndigo con factores
controlados como: pH, temperatura y concentracin de colorante ndigo
(ppm)
Establecer el nmero de ciclos que soportan los tratamientos fngicos.

Realizar pruebas de toxicidad del agua residual obtenida despus de la
aplicacin de los tratamientos fngicos en la remediacin del colorante
ndigo.
Continuar con la lnea de investigacin
Disear un birreactor, a escala industrial
Complementar estudios con hongos ligninolticos Trichoderma sp,

Experimentar procesos de biorremediacin de suelos contaminados con
hidrocarburos aplicando tratamientos con hongos ligninolticos.



En la actualidad, una de las medidas para regular la extincin de
especies endmicas y conservar los recursos naturales, consiste
en plantear proyectos sostenibles. Es por ello que sugerimos
ampliar la investigacin con la finalidad de instaurar medidas
amigables para el desarrollo industrial en el Ecuador.

BIBLIOGRAFIA
GUIA PARA EL MONITOREO DE LA CALIDAD DE AGUA DE
CORRIENTES SUFERFICIALES DIRIGIDA A MUNICIPIOS MEDIANOS Y
PEQUEOS DEL ECUADOR. Fundacin Natura
Have, R., Teunissen, (2001). P. J. M. OXIDATIVE MECHANISMS INVOLVED
IN LIGNIN DEGRADATION BY WHITEROT FUNGI., Chem. Rev. 101:3397-
3413.
HUNSSEINY & Radulesco. 2008. INDUSTRIA TEXTIL.
Ing. Nathaly Maldonado & Renato Molina, ESTUDIO PARA LA REDUCCIN
DE COLORANTES DE AGUAS RESIDUALES DE LA INDUSTRIA TEXTIL A
TRAVES DE PROCESOS ELECTROQUMICOS, 2011, Universidad Politcnica
Salesiana. Facultad de Ciencias Agropecuarias y Ambientales. Cuenca-Ecuador.
Ing. Irina Soraya Moncayo Bravo, REMOCIN DE LOS COLORANTES
TEXTILES REACTIVOS ROJO 141, AMARILLO 84 Y AZUL NAVY 171
ELIMINADOS EN EL AGUA RESIDUAL, UTILIZANDO UN INCULO
COMPUESTO SELECCIONADO, BAJO CONDICIONES ANAEROBIAS A
NIVEL DE LABORATORIO. 2010, Escuela Politcnica del Ejrcito. Departamento
de Ciencias de la Vida, Ingeniera en Biotecnologa. Sangolqu.


BIBLIOGRAFIA
Paginas virtuales
http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/4949/2/T-ESPE-033018.pdf
http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis148.pdf
http://www.ehowenespanol.com/contaminacion-quimica-aguas-causada-
detergentes-diario-sobre_124932/
http://bq.unam.mx/wikidep/uploads/MensajeBioquimico/Mensaje_Bioq06v
30p29_55_Rafael_Vazquez.pdf
http://www.inforural.com.mx/spip.php?article40106
http://www.udea.edu.co/portal/page/portal/bibliotecaSedesDependencias/uni
dadesAcademicas/CorporacionAcademicaAmbiental/BilbiotecaDiseno/Arc
hivos/Degradacionlignina.pdf
http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/morelia07/TRABAJOS/Area
_I/Carteles/CI-3.pdf
http://books.google.com.ec/books?id=Nxb3iETuwpIC&pg=PA346&dq=hon
gos&hl=es&sa=X&ei=UToqUbujLIfo9ASmyoGgDw&sqi=2&ved=0CDQ
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