MTODO PATRN EXTERNO

Comparacin de las seales de la muestra con un conjunto de seales que

ofrecen individualmente "muestras de calibracin", (disoluciones patrn)
Estndares de diferente concentracin del analito que han sido preparados artificialmente
para que su matriz sea semejante a la de la muestra real.
No deben usarse estndares puros, puede conducir a errores sistemticos
importantes.
Se someten al proceso analtico las muestras de calibracin y la muestra
problema de forma independiente.
MTODOS DE CALIBRADO
En muchos tipos de anlisis qumico se mide la respuesta del
procedimiento analtico a cantidades conocidas de analito, y
basndose en ellas se puede interpretar la respuesta de una muestra
de contenido desconocido
El conjunto de las seales de calibrado permite establecer una relacin
inequvoca entre la seal y la concentracin de analito, que comnmente se
denomina "recta de calibrado" y que idealmente es una relacin lineal seal-
concentracin en el intervalo dado de concentraciones.
La concentracin de analito en la muestra se consigue por interpolacin

REGRESIN LINEAL SENCILLA O DE REGRESIN POR MNIMOS CUADRADOS

Proporciona una relacin lineal entre la cantidad de analito (x) y la magnitud
de la variable medida (y) que incluye a la mayora de los puntos
Los errores en los valores de y son mayores que los errores en los valores de x
Las desviaciones estndar en los valores de y son similares
La mejor lnea recta ser la que se obtiene por minimizacin de las
desviaciones verticales entre los puntos y la lnea (la distancia entre los puntos
experimentales y la recta sean mnimas para todos y cada uno de los puntos)
Desviacin vertical (residual) = d
i

d
i
= y
i
y = y
i
(m x
i
+ b)
Pueden ser + o -, por ello usamos d
i
2

d
i
2

= (y
i
y)
2
= (y
i
m x
i
- b)
2

Si la relacin entre seal y concentracin no es lineal, puede resultar
complejo encontrar la funcin de calibracin correspondiente. Es ms
practico reducir el margen de aplicacin del procedimiento analtico al
rango de concentraciones en el que existe linealidad.













C
Y
Ecuacin de la recta: y = m x + b
m = pendiente =

b = ordenada en el origen cuando x = 0
y
x
xy (x y)/N
x
2
(x)
2
/N
m =
b = y m x
C
Y
x
i
y
i

Coeficiente de correlacin
Se emplea como una medida de la correlacin entre dos variables
Indica si la minimizacin que se ha llevado a cabo es correcta.
Ello indicar que existe el mismo n de puntos por arriba y por debajo de la recta y
r = 1,000 o muy prximo a dicho valor
Curva de calibracin Siempre debe graficarse
El mtodo de la adicin estndar es aconsejable cuando se quiere asegurar la
correcta similitud entre el comportamiento de patrones y el problemas.

En las muestras complejas o con matrices difcilmente reproducibles en los
patrones (alimentos, muestras biolgicas o medio ambientales) es aconsejable
el uso de la adicin estndar.
Son mtodos para estandarizar y analizar dentro de la propia matriz de la
muestra (calibracin metodolgica "in situ").

PROCEDIMIENTO

-Consiste en preparar los patrones con la misma muestra a analizar y
aadir una cantidad conocida de la especie qumica a determinar.

-A n alcuotas de disoluciones de calibracin con concentraciones
crecientes se la aaden la misma cantidad de muestra.
Todas las disoluciones contienen una concentracin de analito que es la
suma de la original de la muestra (se busca) y la aadida

-Se someten las n alcuotas de muestras reales enriquecidas al proceso
analtico, obtenindose una seal para cada alcuota.
2 ADICIONES PATRN (ADICIN ESTNDAR)
-Se representan las seales en funcin de la concentracin del estndar
aadido. Se obtendr una recta de calibrado paralela a la que se obtendra
con los estndares sin adicin de muestra

-La seal sobre el eje de ordenadas es la que origina la muestra no
enriquecida.

-La concentracin de analito en al muestra se obtiene por extrapolacin de la
recta de calibrado, su cruce con la prolongacin del eje de abscisas
proporciona el dato buscado.
C
x

C
s

Y
Siendo C= C
x
+ C
s

Concentracin del patrn adicionado

Concentracin del problema

Y
x
= Seal debida al problema
Y
s
= Seal debida al patrn
Y
3 MTODO DEL ESTNDAR INTERNO

OBJETIVO: -minimizar fluctuaciones instrumentales
-establecer referencias con fines cualitativos y cuantitativos.

Se utiliza un estndar o patrn interno (I) diferente al empleado en la
calibracin convencional. El patrn interno es una cantidad conocida de un
compuesto o elemento, no presente en la matriz de la muestra, que se
adiciona tanto a los estndares como a la muestra problema

PROCEDIMIENTO

Supongamos una muestra que contiene el analito X que queremos
determinar, el procedimiento consiste en preparar:

1.- Mezclas conocidas del patrn interno (I) y de los patrones del
analito/os a determinar (X) para construir una curva patrn.

2.- Cuando una cantidad conocida de patrn se agrega a una muestra
problema, la curva de calibrado puede utilizarse para hallar la
concentracin del problema.
3.-Las fluctuaciones en la seal afectan por igual al analito y al patrn
pero no a la relacin.
Concentracin X
Concentracin I
Seal debida X
Seal debida I
Caractersticas del patrn interno
-compatibilidad (p.e. solubilidad) con la muestra y el patrn
-caractersticas qumicas y fisico-qumicas similares al analito
-respuesta discriminada respecto del analito
Y
X
I