Controle do Crescimento

Microbiano

Universidade Federal de Ouro Preto

Objetivos da aula:
Terminologia do controle microbiano.
Fatores que influenciam a efetividade dos
tratamentos antimicrobianos.
Mtodos Fsicos e qumicos de Controle
Microbiano.
Caractersticas e controle microbiano.


Histrico
Experimentos de
Pasteur.
O Controle do crescimento cientfico comeou h cerca de 100 anos.

A vida microbiana pode ser destruda pelo calor, e que mtodos podem ser
elaborados para impedir o acesso dos microrganismos presentes no ar aos
ambientes nutritivos.
Tcnicas de Assepsia que impedem a contaminao por microrganismos no-
desejados, prtica rotineiras utilizada nos laboratrios e em muitos procedimentos
mdicos.
O mdico hngaro Ignatz Semmelweiss e o ingls Joseph Lister utilizaram essa
ideia em algumas das primeira prticas de controle microbiano para procedimentos
mdicos e tcnicas cirrgicas asspticas.
Terminologia do controle
microbiano
Definio Comentrios
Esterilizao
-Calor
-Radiao
-Filtrao
Destruio de todas as
formas de vida
microbiana, incluindo os
endosporos
Normalmente feito com
vapor sob presso ou um
gs esterilizante como o
xido de etileno


Esterilizao comercial
Tratamento de calor
suficiente para matar os
endosporos de Clostridium
botulinum nos alimentos
enlatados
Os endosporos mais
resistentes das bactrias
termfilas podem sobreviver,
mas no iro germinar e
crescer sob condies de
armazenamento normais.


Desinfeco
Destruio de
microrganismos nocivos
normalmente refere-se a
destruio dos patgenos
vegetativos- no formadores
de endosporos

Pode fazer uso de substncias
qumicas, radiao
ultravioleta, gua fervente ou
vapor.
Terminologia do controle
microbiano
Anti-sepsia
Quando esse tratamento
dirigido ao tecido vivo.
O produto qumico
denominado um anti-
sptico.
Tratamento quase
sempre por
antimicrobianos
qumicos
Degerminao Remoo mecnica, em
vez da morte de
micrbios em uma rea
limitada.
Usa-se um algodo
embebido em lcool.



Sanitizao
Tratamento destinado a
reduzir as contagens
microbianas a nveis
seguros de sade pblica
e minimizar as chances
de transmisso de
doena de um usurio
para o outro.
Normalmente obtido
por lavagem em altas
temperaturas ou
mergulhando em um
desinfetante qumico.
Terminologia do controle
microbiano
Os nomes dos tratamentos que causam a
morte direta dos micrbios possuem o sufixo
cida
GERMICIDA mata todos os microrganismos
FUNGICIDA mata os fungos
BACTERICIDA mata as bactrias
VIRICIDA inativa os vrus.
A Taxa de Morte Microbiana
Fatores que influenciam a efetividade
dos tratamentos antimicrobianos
1.O nmero de micrbios


2. Influncias ambientais:
A presena de matria orgnica frequentemente inibe a ao dos
antimicrobianos qumicos.
Em hospitais, a presena da matria orgnica como sangue,
vmito ou fezes influencia a seleo de desinfetantes.
Locais que apresentam gorduras e protenas estas protegem os
micrbios que tero uma taxa de sobrevivncia maior.
Os micrbios em biofilmes sobre superfcies, so mais difceis
de serem atingidos pelos biocidas com eficincia.


Staphylococcus aureus

3.Tempo de exposio: Os antimicrobianos qumicos
frequentemente requerem exposio prolongada para
que os micrbios ou endosporos mais resistentes sejam
afetados.
4. Caractersticas microbianas: A estrutura que o
micro-organismo apresenta.
Ex: Mycoplasma pneumoniae
Aes dos agentes de Controle
Microbiano
Alterao na Permeabilidade da
Membrana
Danos as protenas e aos cidos nuclicos:
As enzimas so vitais para todas as atividades celulares.
A leso aos cidos nuclicos pelo calor, radiao ou
substncias qumicas frequentemente letal para a clula; essa
no pode mais se replicar, nem realizar as funes metablicas
normais como a sntese de enzimas.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Calor
Causa a morte microbiana atravs da desnaturao das
protenas (mido) ou oxidao (seco).


Ex: Muitos meios, vidrarias de laboratrios e
instrumentos hospitalares.

A resistncia ao calor varia entre diferentes
micrbios.

PONTO DE MORTE TRMICA (PMT): A MENOR
TEMPERATURA EM QUE TODOS OS
MICRORGANISMOS EM UMA SUSPENSO LQUIDA
SERO MORTOS.

TEMPO DE MORTE TRMICA (TMT): PERODO
MNIMO EM QUE TODOS OS MICRORGANISMOS
SO MORTOS EM UMA CULTURA LQUIDA, EM
UMA DADA TEMPERTATURA.

TEMPO DE REDUO DECIMAL(TRD): TEMPO EM
MINUTOS EM QUE 90% DE UMA POPULAO, EM
UMA DADA TEMPERATURA SERO MORTOS.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
O CALOR USADO NA ESTERILIZAO PODE
SER APLICADO EM DUAS DIFERENTES
FORMAS:
CALOR MIDO: Mata os microrganismos principalmente pela
coagulao das protenas, que causada pela desnaturao destas.
Ex: fervura, vapor de fluxo livre, autoclave, pasteurizao.

CALOR SECO: chama direta e ar quente (incubadora).
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
CALOR MIDO
- FERVURA
(100C ao nvel do mar)
Mata as formas vegetativas de
bactrias, quase todos
os vrus, fungos e seus
esporos em 10 minutos.
Normalmente muito mais rpido.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
CALOR MIDO
-VAPOR DE FLUXO LIVRE - no
pressurizado
(temperatura semelhante fervura =100C ao nvel do mar)
Os endsporos bacterianos e alguns vrus no so destrudos
to rapidamente.
Obs: Alguns tipos de vrus da hepatite, podem sobreviver a
at 30 minutos de fervura, e alguns endosporos bacterianos
podem resistir fervura por mais de 20 horas.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
CALOR MIDO
- AUTOCLAVE
Mtodo preferencial de
esterilizao, usada a
menos que o material
possa ser danificado pelo
calor ou umidade.
Aumenta a presso interna,
e consequentemente a
temperatura: 1 atm e
121C.

A esterilizao em uma autoclave mais efetiva quando
os organismos entram em contato com o vapor
diretamente ou esto contidos em um pequeno volume
de soluo aquosa;

Sob estas condies, o vapor
em uma presso de cerca de
1 atm (15 psi) e 121C,
matar todos os organismos e
seus endsporos em cerca de
15 minutos.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
CALOR MIDO
- Pasteurizao: o processo utilizado em alimentos para
destruir microrganismos patognicos ali existentes. Foi criado
em 1864, levando o nome do qumico francs que o criou:
Louis Pasteur.
Produtos como leite, iogurte, sorvete e cerveja apresentam
seus prprios tempos e temperaturas de pasteurizao. Uma
vez que o aquecimento menos eficiente em alimentos mais
viscosos, e as gorduras podem ter um efeito protetor para os
microrganismos nos alimentos.
As indstrias de laticnios realizam o teste da fosfatase.


Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Pasteurizao lenta: em que se aplicam temperaturas mais
baixas durante maior tempo (65C por 30 minutos).
Pasteurizao rpida: quando se aplicam temperaturas mais
altas (75C) durante alguns segundos - HTST (High Temperature
and Short Time) ou "alta temperatura e curto tempo".
Pasteurizao muito rpida, quando a temperatura vai de
130C a 150C, durante trs a cinco segundos UHT (Ultra High
Temperature) ou "temperatura ultra-elevada".
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Esterilizao por calor seco:
O calor seco mata por efeitos da oxidao.
*Chama direta ou incinerao - utilizado para esterilizar
alas de inoculao. Mtodo efetivo para esterilizar e
eliminar papel, copos, sacos contaminadas, material
hospitalar.


Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Esterilizao por calor seco:
* Em ar quente: Os itens a serem esterilizados por esse
procedimento so colocados em um forno, geralmente
uma temperatura de cerca de 170C mantida
aproximadamente 2 horas

Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
FILTRAO
Passagem de lquido ou gs atravs de um material
semelhante a uma tela com poros pequenos o suficiente
para reter os microrganismos.

Usada para esterilizao de materiais sensveis ao calor:
meios de cultura, enzimas, vacinas, antibiticos.

Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Nos dias atuais utilizam-se os filtros de membrana compostos
de substncias como steres de celulose ou polmeros plsticos
em uso industrial e laboratorial.


Apresentam 0,1mm de espessura
Os poros de filtro de membrana:
0,22 m e 0,45 m Bactrias
0,01 m Bactrias como
os espiroquetas e os vrus
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Baixas temperaturas:
O efeito depende do microrganismo e da intensidade da
aplicao.
Temperaturas de 0 a 7C a taxa metablica da maioria dos
microrganismos reduzida.
Psictrofos-crescem lentamente em temperaturas de refrigerador
alteram o aspecto e sabor dos alimentos.
Patognicos no crescem em temperaturas de refrigerador.
Temperaturas baixas (abaixo do ponto de congelamento) obtidas
RAPIDAMENTE tendem a tornar os micrbios dormentes no
necessariamente os mata.
O congelamento LENTO mais nocivo os cristais de gelo que
se formam e crescem rompem a estrutura celular e molecular dos
microrganismos.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Alta presso:
um mtodo muito utilizado no Japo e nos Estados
Unidos na conservao de sucos de fruta.


aplicado uma presso em suspenses lquidas e esta transferida
instantaneamente e uniformemente para a amostra, alterando as estruturas
moleculares das protenas e dos carboidratos- inativao das clulas
bacterianas vegetativas.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Dessecao:
Na ausncia de gua, os microrganismos no podem crescer ou
ser reproduzir, mas podem permanecer viveis por anos.
A resistncia das clulas vegetativas ao ressecamento varia com a
espcie e o ambiente do organismo.
Ex: Neisseria gonorrhoeae Mycobacterium tuberculosis



Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
PRESSO OSMTICA
Uso de altas concentraes de sais e acares.
Criam um ambiente hipertnico que ocasiona a
sada da gua da clula microbiana
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
Radiao
Tem vrios efeitos sobre as clulas, dependendo de seu
comprimento de onda, intensidade e durao.
H dois tipos de radiao:
- Ionizante: raios gama, raio X e feixes de eltrons
de alta energia
- No ionizante: luz ultravioleta (UV)
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
RADIAO IONIZANTE
Comprimento de onda curto (menos de 1 nm)
altamente energtico.
O principal efeito a ionizao da gua, que forma
radicais hidroxila altamente reativos - estes radicais
reagem com os componentes orgnicos celulares,
especialmente DNA.

utilizada na esterilizao de produtos farmacuticos
e materiais dentrios e mdicos.
Mtodos Fsicos de Controle
Microbiano
RADIAO NO IONIZANTE (UV)
Mtodos qumicos de Controle Microbiano
So usados para controlar o crescimento de micrbios em
TECIDOS VIVOS e OBJETOS INANIMADOS.

Infelizmente poucos agentes qumicos obtm a esterilidade; a
maioria deles meramente reduz as populaes microbianas em
nveis seguros ou removem as formas vegetativas.

O grande problema a seleo de um agente, pois nenhum
desinfetante isolado apropriado para todos as circuntncias.
Princpios da desinfeco efetiva:

Ler o rtulo do produto: quais grupos microbianos
capaz de controlar e a concentrao de uso;

Natureza do material a ser desinfetado (pH e matria
orgnica);

Contato microrganismo X desinfetante;

Temperatura de ao (quanto maior melhor a ao).
Mtodos qumicos de Controle
Microbiano
Tipos de desinfetantes: Fenol e compostos fenlicos

Agente Qumico Mecanismo de Ao Uso Preferencial Comentrio

1- Fenol
Ruptura da m.
plsmtica e
desnaturao das
enzimas

Raramente utilizado Usa-se pouco devido
possibilidade de
causar irritao e odor
desagradvel.


2- Compostos
Fenlicos
Ruptura da m.
plsmtica e
desnaturao das
enzimas

Superfcies
ambientais,
instrumentos,
superfcies cutneas
So reativos mesmo
em presena de
material orgnico



3- Bifenis
Provvel ruptura da
m. plsmtica
Sabonetes para as
mos e loes
hidratantes
Ampla utilizao,
porm mais eficaz
contra gram-
positivos
Mtodos qumicos de Controle
Microbiano
Agente Qumico Mecanismo de Ao Uso Preferencial Comentrio
1-Biguanidas

Ruptura da m.
plsmtica
Desinfeco da pele Bactericida contra
Gram- positiva e
negativa

2-Halognios
o iodo inibi a
funo das
protenas, o cloro
altera os
componentes
celulares
Utilizado para
desinfectar
equipamentos de
laticnios (Cloro)

3- lcoois
Desnaturao das
protenas e
dissoluo dos
lipdios
Limpeza da pele
antes das injees e
de superfcies
Bactericida e
fungicida, mas
ineficaz contra
endosporos ou vrus
no- envelopado.
4- Metais pesados e
seus componentes
Desnaturao das
enzimas e de outras
protenas
O nitrato de prata
pode ser usado para
prevenir oftalmia
gonorrica neonatal;
O mercrio desinfeta
a pele e as
membranas mucosas.
Cloreto de zinco
Anti-sptico bucal
Mercrio-biocida
Mtodos qumicos de Controle Microbiano
Agente Qumico Mecanismo de Ao Uso Preferencial Comentrio

1- sabes e
detergente
Remoo mecnica
dos micrbios
atravs da escovao
Limpeza da pele
E remoo de
resduos
Muitos sabes
antibacterianos
contm
antimicrobianos

2-Detergentes
cidos-aninicos
Incerto-Pode
envolver a inativao
ou ruptura das
enzimas
Sanitizao em
industrias de
processamento de
laticnios e alimentos
So de ao rpida


3- Detergentes
catinicos
(compostoss de
amnio quaternrio)
Inibio de enzimas,
desnaturao das
protinas e ruptura
das membranas
plasmticas
Anti-sptico para
pele, instrumentos,
utenslios, objetos de
borracha
Bactericidas,
fungicidas e viricidas
contra vrus
envelopados.
Agentes de superfcie:
Mtodos qumicos de Controle Microbiano
Agente Qumico Mecanismo de Ao Uso Preferencial Comentrio
cidos orgnicos Inibio metablica,
afetando
principalmente os
bolores
Muito utilizado para
controlar bolores e
algumas bactrias

Aldedos
Desnaturao de
protenas
Utilizado para
desinfeco de
equipamentos
mdicos
Antimicrobiano muito
efetivo
Esterilizantes
gasosos
Desnaturao de
protenas

Excelente
esterilizante
especialmente para
objetos que seriam
danificados pelo
calor


Peroxignios
(agentes oxidantes
Oxidao Ferimentos
profundos
O perxido de
hidrognio um anti-
sptico fraco,ma um
bom desinfetante.
Mtodos qumicos de Controle
Microbiano
ANTIBITICOS
Compostos qumicos produzidos por microrganismos
que inibem ou matam outros microrganismos.


Caractersticas e controle
microbiano
Aula Prtica
Vamos realizar a prtica do dedo sujo
1lcool;
2 hipoclorito de sdio
3 iodo
4 Lavar com sabo
5 nada


Exerccios
1) Qual dos seguintes no pode ser usado para
esterilizar uma soluo ao calor armazenado
em um recipiente plstico?
a) Radiao gama
b) xidos de etileno
c) Radiao no ionizante
d) Autoclave

2) Quais so os principais modos de ao dos
antibiticos sobre as bactrias?
Referncias Bibliogrficas
Gerard J. Tortora ; Berbell R. Funke ; Christine L.
Case. Microbiologia. 8 edio-2005
Michael T. Madigan, John M. Martinko, Jack Parker ;
traduo e reviso tcnica Cynthia Maria Kyaw. -
Microbiologia de Brock .10 Edio- 2004
Patrick R. Murray et al. ; traduzido por Eiler Fritsch
Toros. - Microbiologia mdica 4 Edio- 2004.

Obrigada