Facultad de Ciencias

Qumicas
Curso de Microbiologa
Diagnstica
Enero 2010
CONTROL DE CALIDAD EN LABORATORIOS
M.A. MA. OLGA GONZLEZ RANGEL
Enero 2010
Control de calidad
La organizacin Mundial de la Salud (OMS) estimula la
participacin de los laboratorios centrales de salud
pblica en por lo menos tres valoraciones al ao
mediante encuestas de control de calidad externas.
Los laboratorios nacionales centrales (laboratorios de
referencia) deben trabajar para estandarizar los
procedimientos de los laboratorios locales, regionales
y los de ellos mismos, de manera que las
observaciones puedan ser interpretadas de la misma
manera en todos los lugares.
CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad es la parte fundamental cualquier laboratorio de
anlisis clnicos, ya que son reglas las cuales nos va a decir que
pruebas estamos haciendo bien y cuales no.
El control de calidad se basa bsicamente en:
Estructura y Equipo
Recoleccin de la muestra
Control de los medios y reactivos que se utilizan.
Trabajo
Reporte de Resultados.
Control de calidad externo


NORMAS QUE RIGEN EL FUNCIONAMIENTO DEL
LABORATORIO CLNICO.
NOM 166 SSA1 1997. Organizacin y funcionamiento de los
laboratorios clnicos.

NOM - 168 SSA1 1998. Del expediente clnico.

NOM - 178 SSA1 1998. Establece los requisitos mnimos de
infraestructura y equipamiento de establecimientos para la atencin
mdica de pacientes ambulatorios.

NOM 087 ECOL SSA1 2002. Manejo de residuos peligrosos
biolgicos infecciosos.
ESTRUCTURA Y EQUIPO
Construccin adecuada

Mobiliario adecuado

Aislamiento total de otras reas

Microscopios

Incubadoras

Material microbiolgico (Cepas, reactivos, cultivos)

Extintores




RECOLECCION DE LA MUESTRA
RECOLECCION DE LA MUESTRA
La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso

Evitar la contaminacin con microorganismos saprofitos del rea.

Utilizar la tcnica apropiada y los instrumentos adecuados para su
obtencin.

En el caso de investigar microorganismos anaerbicos, la biopsia y el
aspirado con aguja, son las muestras de eleccin.

Coleccione un apropiado volumen de muestra.

Identificar correctamente cada muestra.

Coloque la muestra en un receptculo adecuado para su transporte,
evitar derrame del espcimen y mantener las medidas de bioseguridad
apropiadas.




PRIORIDAD DE LAS MUESTRAS


MUESTRAS URGENTES

Sangre.

LCR. ( Su estudio tiene Prioridad sobre cualquier otra muestra o
trabajo ).

Aspirado Transtraqueal

Lquido pericardico.

Lquido amnitico.

Tracto respiratorio inferior.

Muestras quirrgicas de la sala de CIC.

Lquido articular ( Artritis sptica ).

Biopsia de Pulmn





MUESTRAS DE RUTINA


Boca.

Lquido pleural.

Quemaduras.

Ocular.

Orina.

Genitales

Muestras quirrgicas.

Lquido peritoneal.




MUESTRAS SELECTIVAS

Lquido asctico.

Bilis.

Lquido articular ( No artritis ).

Lquidos intravenosos.

Genitales

Odo.

Nasofarngeo.

Rectal

Ulceras, vesculas.

Piel.

Post Mortem.


CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
Control de calidad
El control de calidad incluye la
seleccin correcta de los reactivos, la
preparacin de los medios de acuerdo
con las formulaciones aprobadas o con
las instrucciones especficas del
fabricante y el uso de las cepas de
referencia bien caracterizadas para
controlar el medio preparado.
Control de calidad de medios de cultivo
Consideraciones para el control de
calidad de los medios
Esterilidad
Habilidad para soportar el crecimiento
de los organismo (s) especficos.
Habilidad para producir reacciones
bioqumicas de manera apropiada.
PREPARACION DE MEDIOS
Los medios de cultivo deshidratados deben almacenarse siempre en lugares
frescos, a temperatura ambiente protegidos contra la humedad y la luz.

Se debe mantener un registro de cada frasco de medio de cultivo deshidratado,
con el nombre del producto, nombre y nmero telefnico de la casa
proveedora, nmero de control del frasco, fecha de recibo, fecha de expiracin,
nmero de lote y fecha en que se abri el frasco.

El eficacia de un medio deshidratado, depende en gran medida del
procedimiento empleado en la rehidratacin.

El almacenamiento a 4C es el mejor para la mayora de los medios

Los medios deben mantenerse preferiblemente en sitios oscuros, ya que la luz
puede afectar algunos de sus componentes.


FALLAS EN LA PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

.

Valor de pH incorrecto

Turbidez o precipitacin

Gel blando

Crecimiento bacteriano pobre

MEDIOS PREPARADOS

Los medios deben mantenerse preferiblemente en sitios oscuros, ya que la luz
puede afectar algunos de sus componentes.

Para evitar la desecacin se aconseja que se guarden en bolsas plsticas bien
cerradas. Los platos Petri almacenados as, deben mantenerse con el fondo
hacia arriba.

Cada lote preparado de medio de cultivo se prueba antes de su uso rutinario,
por eficiencia o calidad, mediante la inoculacin de microorganismos cuyo
comportamiento conocemos, tanto para reacciones positivas como negativas.

Puede utilizarse para ello cepas bacterianas domsticas o cepas control
comerciales ( ATCC ).

Rotular todos los medios preparados, tanto en platos Petri como en tubos,
indicando adems, la fecha de preparacin y expiracin



EVALUACION DE LA EFICIENCIA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
PREPARADOS
.

MEDIO DE CULTIVO ORGANISMO CONTROL REACCION ESPERADA

TSI E. coli cido/cido
TSI Shigella flexnerii alcalino/cido
TSI Pseudomona aeruginosa alcalino/alcalino
SIM Proteus mirabilis movilidad positiva
SIM K. pneumoniae movilidad negativa
Citrato de Simmons K.pneumoniae color azul. Crece
Citrato de Simmons E. coli color verde. No crece.
Caldo de urea Proteus mirabilis Rojo-Morado. Positivo.
Caldo de urea E. coli color Naranja. Negativo.
Agar sangre Estreptococo Grupo B Crece. Beta hemlisis.
Agar sangre S. pneumoniae Crece. Alfa hemlisis.
Agar sangre K.pneumoniae Crece. No hemoltico.
McConkey E. coli Crece. Colonias moradas.
McConkey Proteus sp Crece. Colonias claras.
McConkey Estafilococos No crece.

CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS

.

Un elemento fundamental en el trabajo diario del laboratorio, lo
constituyen los reactivos, tanto comerciales como de preparacin
domstica, que son utilizados en la caracterizacin de
microorganismos.

Correr controles diarios con las bacterias tipo y seguir estrictamente
las indicaciones en cuanto almacenamiento de los reactivos,
metodologa de la prueba y tiempo de lectura.




CONTROL DE CALIDAD DE LOS TINTES
.


La clasificacin correcta de las bacterias de acuerdo a las reacciones
bioqumicas, dependen de la pureza, reactividad y estabilidad de los
reactivos.

El control de calidad de stos tintes debe realizarse primero con cada
nuevo lote preparado

Se realiza un control cada semana para mantener un grado de
seguridad apropiado en su uso.


CONTROL DE CALIDAD DE ANTISUEROS
.


Estos sistemas actan algunos con solo la muestra del paciente y otros
requieren de la cepa aislada o detectan sus metabolitos. Estos sistemas
se han convertido en un arma imprescindible para el microbilogo y en
muchos casos dan confianza en la seguridad del diagnstico y en otras
se utilizan en la deteccin de microorganismos difciles de cultivar.

En forma general stos kit deben ser probados cada vez que se recibe
un nuevo lote y cada vez que se utilicen, se le deben correr sus
controles positivo y negativo que vienen con cada kit.


CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA DE SENSIBILIDAD
.

Las metas de un programa de control de calidad van destinadas a
monitorear:

La precisin y exactitud del procedimiento de la prueba de
susceptibilidad

El comportamiento de los reactivos utilizados en la prueba

La actuacin de las personas que llevan a cabo las pruebas y sus
resultados.

Los discos deben ser almacenados a un temperatura entre 20 y
+8C.

verificar el estado de los discos de sensibilidad, utilizando cepas
control ATCC.

EL ESTANDAR McFARLAND
.
La densidad de la turbidez del Estndar McFarland deber ser verificada
utilizando un espectrofotmetro con direccin de luz de 1 cm y cubetas
adecuadas para determinar absorbancia. Para realizar el control de un
estndar McFarland de 0.5 , la absorbancia deber leer entre 0.08 a 0.10 a una
longitud de onda de 625 nm.

Estos tubos debern guardarse a temperatura ambiente en un
lugar fresco y oscuro.

Antes de ser usados, los patrones debern agitarse para una
adecuada homogenizacin.

Mensualmente los patrones son descartados y vueltos a preparar, o
en su defecto se debe comprobar su densidad.


METODOS DE CONSERVACION DE CEPAS BACTERIANAS
.


Los mtodos de conservacin de las cepas estndar de control de calidad,
deben asegurar que las mismas mantengan sus caractersticas tpicas y
que puedan ser reproducidas despus.

El medio utilizado para su conservacin debe mantener un mnimo de
mutaciones.

Cultivos Stock, (Ultra congelamiento, Liofilizacin)

Semistock (congelador convencional)

Cultivos de trabajo diario.
Control de calidad de equipos y
materiales de trabajo

Incubadoras
Controlar cada da la temperatura
Si es incubadora de CO2 medir el nivel de gas
diariamente
Poner la muestra en una posicin segura
Limpiarlas mensualmente
Reportar si esta fallando
Tener una bitcora donde se lleve un registro
del funcionamiento

AUTOCLAVES
Checar temperatura, presin, nivel de agua,
vlvula.
Limpiarlas
Utilizar indicadores de esterilidad
Tener una bitcora donde se lleve un registro
del funcionamiento
REFRIGERADORES
Control diario de temperatura

No abrir con frecuencia el refrigerador

Tener una bitcora donde se lleve un registro
del funcionamiento

MICROSCOPIOS
Limpieza de aceite en objetivos, condensador,
etc.

Poner cobertura contra el polvo

Tener una bitcora donde se lleve un registro
del funcionamiento

Supervisin del personal
El personal es el factor ms importante en
la calidad del trabajo en el laboratorio de
microbiologa. Este personal debe tener
una dedicacin y actitud positiva hacia el
trabajo, capacidad acadmica,
actualizacin constante y contar con los
elementos indispensables para su labor.
Evaluacin del personal
La competencia del personal de microbiologa, debe
ser certificada por la revisin de su hoja de trabajo, la
interpretacin de muestras desconocidas , su
habilidad tcnica y exmenes escritos anuales. Se
debe llevar un registro profesional acerca de su
evaluacin acadmica, reporte sobre su capacidad de
trabajo, asistencia a programas de educacin
continuada, responsabilidad, asistencia, trabajos de
investigacin, charlas, conferencias y su evaluacin
profesional anual.
Todo nuevo empleado que se adicione a la plantilla
de la seccin, debe ser documentado, evaluado y
certificado, incluyendo las fases pre-analticas,
analticas y post-analticas de funcionamiento del
laboratorio.
Control de calidad externo:
Es recomendable que los laboratorios de
microbiologa puedan participar en programas
de evaluacin externa. Estos programas miden
la capacidad del laboratorio para evaluar una
muestra desconocida y llegar a un resultado
seguro. Los mismos consisten en la
identificacin de muestras o microorganismos
desconocidos en los cuales se debe informar del
resultado de la identificacin, pruebas
utilizadas para el diagnstico etiolgico y
sensibilidad a los antibiticos.
Quin es responsable de la
calidad?
No es slo quien define el nivel
de calidad esperado por los
clientes. Es una
responsabilidad compartida de
todos los trabajadores