Representa el buffer, solucin o eluente que se emplea para alcanzar el equilibrio despus de cargar la muestra. R: Binding Buffer Es la cantidad mx de muestra que puede ser adsorbida por ml de medio cromatografico. R: Binding Capacity
Es el grado de retencin de un soluto respecto a un componente no retenido. R: Capacity factor
As se le llama a la fase estacionaria tambin llamada resina. Esta es una matriz porosa que es usualmente funcionalizada por ligandos. La matriz esta formada usualmente por partculas llamadas beads. R: Chromatography mdium
Elucin, liberacin o remocin de las sustancias unidas al medio cromatografico. R: Desorption
Asi se le llama a la fase mvil que abandona la columna R: Effluent or eluate
Es el buffer o la solucin empleado en el proceso de separacin cromatografica R: Eluent
Es el buffer o la solucin empleada para eluir o desorber solutos adsorbidos en la columna cromatografica. R: Elution buffer
Es el volumen de buffer o solucin requerido para eluir un soluto por ejemplo una protena. R: Elution volumen
Son las dos maneras en que se le conoce al tiempo requerido para eluir un soluto. R: Elution time or time retention
Material que pasa a travs de la columna durante la carga de muestra sin ser unida. R: Flowthrough
Tipo de filtro profundo usado frecuentemente en la arte superior e inferior de las columnas. R: Frit
Es el empleo de un incremento o decremento de la concentracin de una sustancia que causa la elucin de los solutos adsorbidos. R: Gradient elution
En este mtodo de elucin de los solutos la composicin de la solucin del buffer o disolvente no cambia. R: Isocratic Elution
Es un factor importante para la eficiencia de la columna y se refiere al movimiento de un soluto dentro y fuera de la fase estacionaria. R: Mass transfer
Representa la estructura porosa no funcionalizada que provee una gran cantidad de superficie que puede ser modificada con ligandos para la unin especifica de solutos. R: Matrix
Es la cantidad que es recuperada de un analito despus del proceso cromatografico. R: Recovery
Es una medida de la habilidad o capacidad de una columna empacada para separar dos solutos. R: Resolution
Metodo basado en las interacciones hidrofobicas entre los solutos y los ligandos. R: Reverse phase chromatograhy
Medicin de la retencin relativa de dos solutos en una columna R: Selectividad
Asi se le llama al empacado de: resin, chromatography beads, chromatography material, chromatography medium o media. R: Stationary phase
En una secuencia de elucin asi se le llama a un paso de incremento de concentracin de la fase mvil. R: Step gradient elution
Asi se le llama al volumen de elucin que no entra en los poros o interactua con el medio cromatografico, por tanto representa el volumen que pasa entre las partculas del empacado. R: Void volumen
Asi se le lama al paso de lavado para remover el material no adsorbido o dbilmente ligado al material de la columna despus de haber cargado una muestra. R: Wash
Algunas protenas pueden representar un gran reto de purificacin para obtener sus formas activas por ejemplo (15): R: protenas integrales de membrana, complejos proteicos inestables, protenas expresadas como agregados insolubles, protenas con modificaciones post-traduccionales especificas.
En orden indique cuales son las propiedades empleadas para los siguientes mtodos cromatograficos: AC, IMAC, IEX, GF, HIC, RPC, Chromatofocousing (17). R: intreaccin con ligando especifico, enlace con ion metlico, carga, tamao, hidrofobicidad, punto isoelctrico Cuales son las etapas clave en una operacin de separacin AC (17-18) R: Equilibration, Adsorption of sample and flowthrough of unbound material, washing to remove unbound material, elution of bound proteins, regeneration of media.
De las columnas para afinidad provedas por GE Healthcare a que grupo general de purificacin corresponden las siguientes: HiTrap IMAC, HiScreen, HisTrap FF (19). R: Group-espeific purification, purification of inmunoglobulins, purification of recombinant proteins.
La tecnologa de cromatorafia GF se emplea principalmente con que objetivos (21) R: For desalting or buffer Exchange