ESPECTROFOTOMETRIA

UV-VISVEL
Bruno L. Cortez de Souza
Departamento de Engenharia Qumica DEQUI
ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA EEL/USP
Fundamentos da
Espectrofotometria
Uma maneira boa de cutucar molculas,
com radiao eletromagntica (luz)

A espectrofotometria faz parte da classe dos mtodos
analticos que baseiam-se na interao da matria
com a energia radiante

Luz
incidente
Luz
emergente
Luz absorvida
Perdas:
- reflexes
- disperso
-absoro
Boa
sensibilidade
Baixo custo de
anlise
Fcil operao
Equipamentos
robustos
Fundamentos da
Espectrofotometria
Propriedades da luz

Fundamentos da
Espectrofotometria
Absoro de Luz

Espectro Eletromagntico

Fundamentos da
Espectrofotometria
Absoro de radiao eletromagntica



Fundamentos da
Espectrofotometria
Porque ocorre o fenmeno da absoro?
Molculas que apresentam eltrons que podem ser
promovidos a nveis de energia mais elevados mediante
a absoro de energia
TRANSIES ELETRNICAS
Nveis discretos de energia so absorvidos devido
vibraes e rotaes das molculas
ROTACIONAL E VIBRACIONAL
Por este motivo no se observa uma linha de absoro
ntida, mas sim uma banda de absoro
ESPECTRO UV-VISVEL

Transies Eletrnicas
Energia Rotacional e Vibracional
Espectro UV-Visvel
Fundamentos da
Espectrofotometria
Dois requisitos devem ser observados para que uma
determinada radiao possa ser absorvida por uma
molcula:

1 - A radiao incidente deve ser de freqncia
equivalente aquela rotacional ou vibracional, eletrnica
ou nuclear da molcula,

2 - A molcula deve ter um dipolo permanente ou um
dipolo induzido, ou seja, deve haver algum trabalho que
a energia absorvida possa fazer.
Cores de Radiao
Regio do Visvel
Espectros de absoro de
diferentes substncias
Espectros de absoro diferentes substncias
(1: bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3: clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: beta-caroteno)
Teoria da Espectrofotometria
Lei de Lambert

Lei de Beer

1 cm
I
o
I
T1
I
o
I
T3
3 cm
soluo 10 g/l
I
o
I
T1
soluo 20 g/l

I
T2

I
o
I
t
=

I
o
10
-Kl
I
t
=

I
o
10
-Kc

Lei de Beer-Lambert
A espectroscopia de absoro molecular est
baseada na medida de absorbncia (A) ou
transmitncia (T), que esto relacionadas
atravs das equaes:
Lei de Beer-Lambert
A absorbncia muito importante porque ela diretamente proporcional
concentrao, c, de espcies absorventes de luz na amostra

Desvios da Lei de Beer-Lambert
LIMITAO REAL
A Lei vlida somente para baixas concentraes
Altas concentraes = Interao entre as molculas afeta a
distribuio de carga, alterando o coeficiente de
absortividade molar
DESVIO QUMICO
Surgem quando um analito se dissocia, se associa ou reage
com um solvente para dar um produto que tem um espectro
de absoro diferente

Desvios da Lei de Beer
DESVIO INSTRUMENTAL
A lei s vlida para radiao monocromtica, ou seja,
para um nico comprimento de onda ()
Como minimizar o desvio?
Escolher a regio onde o constante na regio
selecionada

Partes Essenciais de um
Espectrofotmetro
Fontes de radiao;
Monocromador;
Compartimento de
amostra;
Detector.
Espectrofotmetros
Feixe Simples
Feixe Duplo
Espectrofotmetros com duplo
feixe
Espectrofotmetros com duplo
feixe
Fontes de Radiao
Sistema ptico
Celas de Medida
Detectores
Detectores
Detectores
Espectrofotmetros Portteis
Absoro Seletiva de Compostos
Orgnicos e Inorgnicos
A. Compostos Inorgnicos
ABSORO SELETIVA

B. Compostos Orgnicos
Cromforos
Auxcromos
Cromforos Representativos
Composto Cromforo
max
(nm) Log
Octeno-3 C=C 185 , 230 3,9
Acetileno C=C 173 3,8
Acetona C=O 188 , 279 2,9 , 1,2
Acetato de diazoetila N=N 252 , 371 3,9 , 1,1
Butadieno C=C-C=C 217 4,3
Crotonaldedo C=C-C=O 217 , 321 4,2 , 1,3
Dimetilglioxina N=C-C=N 226 4,2
Octatrienol C=C-C=C-C=C 265 4,7
Decatetraenol [-C=C-]
4
300 4,8
Vitamina A [-C=C-]
5
328 3,7
Benzeno 198 , 255 3,9 , 2,4
1,4-Benzoquinona C C 245 , 285 , 435 5,2 , 2,7 , 1,2
Naftaleno 220 , 275 , 314 5,0 , 3,7 , 2,5
Difenilo 246 4,3
Anlises Quantitativas
Anlises Quantitativas
Anlises Quantitativas
Titulaes Espectrofotomtricas
Anlise Qualitativa
240 250 260 270 280 290 300
Comprimento de onda (nm)

2
,
0








2
,
2




2
,
4







2
,
6







2
,
8








3
,
0







3
,
2


L
o
g

A ou B
C
D
C
5
H
11
C
5
H
11
OH
C
5
H
11
R
OH

OH
R
OH

C
5
H
11
OH

OH
OH OH

(A)
(B)
(C) (D)
Espectro de absoro do canabidiol comparado com outros fenis.