CULTIVO DE BACTRIAS Prof.

Ctia Primon

Cultivo das Bactrias Cultivo dos microrganismos, pr-requisito em para condies seu estudo

laboratoriais adequado.

Para isso, necessrio o conhecimento de suas

exigncias requeridas. nutritivas e das condies fsicas

Tipos Nutritivos das Bactrias Bactrias - podem ser divididas em grupos de acordo com suas exigncias nutritivas. A principal separao corresponde aos grupos: - fototrficos - organismos que utilizam a energia radiante como fonte de energia; - quimiotrficos organismos incapazes de utilizar a energia radiante; dependem da oxidao de compostos qumicos para a obteno de energia.

 Fototrficos
- Existem bactrias que utilizam o CO2 como principal fonte de carbono - so as fotolitotrficas.

- Outras
cidos

exigem
graxos,

um composto orgnico (lcoois,

aminocidos) so as

fotorganotrficas.

 Quimiotrficos
- Bactrias carbono e que utilizam o CO2 como fonte de oxidam compostos inorgnicos (ex. nitritos)

ou elementos qumicos (ex. enxofre) par obteno da fonte de energia, so chamada quimiolitotrficas. - As que utilizam compostos orgnicos para obter e quimiolitotrficas so ao passo

energia, so chamadas quimiorganotrficas.

- As bactrias fotolitotrficas conhecidas, comumente, como autotrficas,

que

as

espcies

fotorganotrficas

quimiorganotrficas so designadas heterotrficas.

Principais Tipos nutritivos de Bactrias

Bactrias heterotrficas Apresentam exigncias nutritivas mais simples. O fato de um organismo poder crescer e se reproduzir numa mistura de compostos qumicos

simples

indica

que

ele

possui

uma

grande

capacidade de sntese. Foram estudadas mais profundamente porque, h um interesse mais imediato.

 Neste

grupo

se

encontram

todas

as

bactrias

patognicas para o homem, para outros animais e para os vegetais, assim como a maior parte da populao microbiana do ambiente humano.

Variam quanto aos nutrientes especficos exigidos

para o crescimento

 Podem ser: Consumidoras alimentando-se de outros

organismos vivos;
- Saprfitas - se alimentam de matria orgnica morta. - Simbiontes mantm uma relao estreita com um organismo de espcie diferente. Estas simbiontes

que so comensais, que nem ajudam, nem prejudicam

seu hospedeiro, ou que so parasitas, que causam dano ao hospedeiro (caso das bactrias patognicas).

Exigncias nutritivas mnimas de algumas bactrias heterotrficas.

Meios Bacteriolgicos Para o cultivo rotineiro de microrganismos heterotrficos, utilizam-se certas matrias-primas

complexas, tais como as peptonas, os extratos de carne e de levedura. Resultado um meio que promove o

desenvolvimento de grande variedade de bactrias e

de outros microrganismos. Quando se deseja um meio slido, adiciona-se o gar como agente solidificante.

 O caldo e o gar nutritivos so exemplos de meios lquidos e slidos, relativamente simples, indicados

para a cultura de microrganismos heterotrficos

comuns. Alguns nestes microrganismos meios, pois especficos, microrganismos no como se desenvolvem exigncias e bem de outras de demonstram

nutrientes Esses

vitaminas

substncias estimulantes.
so chamados heterotrficos fastidiosos, e necessitam de meios

especiais

para

seu

cultivo,

isolamento

reconhecimento.

 Os meios de cultura, de acordo com a sua aplicao ou funo, podem ser classificados como: o Meios Enriquecidos - a adio de sangue, soro ou extratos de tecidos animais ou vegetais ao caldo ou

gar nutritivos proporciona nutrientes acessrios,

permitindo fastidiosos. o Meios Seletivos - a adio de certas substncias qumicas especficas ao gar nutritivo previne o o crescimento de heterotrficos

crescimento de um grupo de bactrias sem agir

sobre outras.

o Exemplo

cristal

violeta

em

uma

dada

concentrao, impede o crescimento de bactrias gram-positivas, sem afetar o desenvolvimento das bactrias gram-negativas. o Meios Diferenciais a incorporao de certos

reagentes ou substncias qumicas no meio pode

resultar num tipo de crescimento ou modificao, que permite ao observador distinguir os tipos de

bactrias.

o Exemplo: inoculando-se uma mistura de bactrias num meio de gar sangue, algumas das bactrias podem hemolisar (destruir) as clulas vermelhas e

outras no.
o A zona clara ao redor da colnia a evidncia de ter ocorrido a hemlise. Assim, pode-se estabelecer distino entre bactrias hemolticas e no-

hemolticas, de acordo com o seu desenvolvimento.

Caractersticas de vrios produtos complexos, usados como ingredientes dos meios de cultura

Condies Fsicas Necessrias ao Crescimento Bactrias: o variam com relao s exigncias nutritivas;

o demonstram respostas diversas s condies fsicas

do ambiente.

Temperatura

Crescimento bacteriano - pode ter seu ritmo e

quantidade determinados pela temperatura, pois influencia as reaes qumicas do processo de crescimento.

Cada espcie de bactria cresce sob temperaturas

situadas em faixas caractersticas e, sendo assim, so classificadas nos seguintes grupos:

o Bactrias psicrfilas - so capazes de crescer a 0 C

ou menos, embora seu timo seja entre 15 C a 20

C. o Bactrias mesfilas: crescem melhor numa faixa de 25 a 40 C. o Bactrias termfilas: crescem melhor a temperaturas

de 45 a 60 C.
o A temperatura tima de crescimento a temperatura de incubao que possibilita o mais rpido crescimento, durante curto perodo de tempo (12 a 24 horas).

Exigncias atmosfricas
Os principais gases que afetam o crescimento bacteriano
so o oxignio e o CO2. Apresentam grande variedade de resposta ao oxignio livre e so divididas em: o Bactrias aerbias: crescem na presena de oxignio livre. o Bactrias anaerbias: crescem na ausncia de oxignio livre.

o Bactrias
o Bactrias

anaerbias

facultativas:
crescem

crescem
na

tanto

na
de

presena como na ausncia do oxignio livre. microaerfilas: presena

quantidades pequenas de oxignio livre.

Acidez e alcalinidade (pH) Para a maioria das bactrias, o pH timo de

crescimento entre 6,5 e 7,5.

Embora poucos microrganismos possam desenvolverse nos limites extremos de pH, as variaes mnimas e mximas, para a maior parte das espcies, esto entre pH 4 e pH 9.

Reproduo e Crescimento O termo crescimento refere-se, usualmente, s alteraes ocorridas na cultura das clulas e no s alteraes de um organismo isolado.

Reproduo
Bactrias quando ocorre geralmente a replicao do reproduzem-se cromossomo assexuadamente por fisso binria transversa, bacteriano e a clula desenvolve uma parede celular

transversa,
clulas.

dividindo-se

ento

em

duas

novas

 Aps

replicao

do

cromossomo,

parede

transversa forma uma invaginao da membrana plasmtica e da parede celular.

Embora

no

ocorra

uma

reproduo

sexuada

complexa nos moneras, algumas vezes as bactrias realizam troca de material gentico.

Fisso Binria

Crescimento O processo de reproduo prevalecente entre as

bactrias a fisso binria; uma clula se divide,

formando duas clulas. Partindo de uma nica bactria, o aumento populacional se faz em progresso geomtrica: 1 - 21 - 22 - 23 - 24 - 25 ... 2n

Tempo necessrio para que uma clula se divida - ou

para que a populao duplique - conhecido como tempo de gerao, que no o mesmo para todas as bactrias.

 Ex. Escherichia coli = de 15 a 20 minutos; para

outras pode ser de muitas horas. O tempo de gerao est na forte dependncia dos nutrientes existentes no meio e das condies fsicas de incubao.

Principais Grupos de Bactrias

Referncia padro para a classificao e taxonomia

bacterianas o Bergey's manual of determinative bacteriology (Holt et al., 1993). Este manual divide as bactrias em 19 grupos.

Grupos de Bactrias

Bactrias Patognicas

Muitas doenas de plantas esto associadas com

bactrias; quase todos tipos de plantas so suscetveis a um ou mais tipos de doenas bacterianas. Os sintomas destas doenas variam, mas elas

geralmente se manifestam como manchas de vrios

tamanhos nos caules, folhas, flores ou frutos; murchido, definhamento e razes moles; necrose, ferrugem observados. e cancros tambm so sintomas

 Bactrias tambm causam muitas doenas humanas, incluindo clera, hansenase, ttano, pneumonia bacteriana, etc. Vrios gneros de bactrias patognicas so de

importncia particular para o homem.

Espcies do gnero Streptococcus esto associadas com a escarlatina, febre reumtica e outras infeces. A bactria da escarlatina produz seus sintomas e

toxinas fatais somente se ela estiver infectada com o

bacterifago apropriado.

gnero

Staphylococcus

um

dos

principais

responsveis pela infeces hospitalares.

A sndrome do choque txico causada por algumas linhagens de Staphylococcus aureus. Esta doena caracteriza-se por febre, erupes cutneas, que aparecem primeiro nas palmas das mos e nas solas dos ps e depois

espalham-se para outras partes do corpo, e

queda brusca de presso.

Aproximadamente 85% dos casos de sndrome do choque txico registrados nos Estados Unidos ocorreram em mulheres menstruadas, que estavam usando absorventes internos na poca em que apareceram os sintomas. No entanto, homens e mulheres podem contrair

esta doena.

 Muitas

doenas

bacterianas

so

dispersas

pelo

alimento ou gua, como por exemplo a disenteria bacilar, e as febres tifide. A disenteria bacilar causada por algumas espcies do gnero Shigella.

A febres tifide uma doena intestinal infecciosa

agudas causada pela bactria Salmonella typhi.

 A bactria Brucella abortus causa a doena chamada brucelose, tambm conhecida como febre ondulante, no homem, e aborto contagioso, no gado.

O contgio se d atravs da ingesto de leite oriundo

de gado contaminado. Como as bactrias so destrudas pelo processo de pasteurizao do leite, esta doena est se tornando rara.

 A clera uma gastroenterite causada pela bactria

Vibrio cholerae, que transmitida pelo contato com guas ou alimentos contaminados pelas excrees de pacientes ou de portadores convalescentes. Os sintomas compreendem vmitos e fezes diarreicas

profusas (aspecto de gua de arroz), que do lugar a

uma severa desidratao, com perdas de eletrlitos e acidose, muitas vezes fatais.

 A bactria Clostridium botulinum a causadora do botulismo, uma intoxicao alimentar grave, e s

vezes fatal.
A doena contrada pela ingesto de alimentos contendo A crie a toxina botulnica provocada (principalmente por bactrias, enlatados, em conserva ou defumados). dentria

principalmente pela espcie Streptococcus mutans.

pode ser fatal.

 As leses cariosas se desenvolvem sob densas

massas
Algumas

de

bactrias,

conhecidas
so

como

placas

dentais, aderentes superfcie do dente. doenas bacterianas sexualmente transmitidas. Entre as mais comuns esto a gonorria, causada

pela bactria Neisseria gonorrhoeae, e a sfilis,

causada pela Treponema pallidum, uma espiroqueta. Ambas doenas so facilmente controladas com penicilina.

 A gonorria muito mais comum e menos sria que

a sfilis, que pode ser fatal.

Referncias: BURTON, G.R.W.; ENGELKIRK, P.G. Microbiologia para as Cincias da sade. 7 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005.

PELCZAR JR., J.M.; CHAN, E.C.S. & KRIEG, N.R.

Microbiologia: conceitos e aplicaes. Vol.1, 2a ed. So Paulo, Makron Books. 1996. 524p.