Neisseria Meningitidis

Neisseria meningitidis
Agente

etiolgico de enfermedad neningococica. La bacteria N. meningitidis es encapsulada y se clasifica en serogrupos, segn la reactividad inmunolgica del polisacrido de la capsula Los serogrupos que causan enfermedad ms comnmente son A, B, C, Y y W135

Medidas de precaucin
El

personal de laboratorio en riesgo de exposicin a aerosoles de N. meningitidis debe mantener actualizadas sus vacunas. Trabajar en gabinetes de seguridad bilgica. Debe considerarse la quimioprofilaxis con antimicrobianos para aquellos laboratoristas que manipulan aislamientos de N. meningitidis en una muestra abierta.

PRUEBAS DIAGNOSTICAS DE LABORATORIO

Muestras

Sangre (cultivo Lquido cefalorraqudeo (frotis) Exudado nasofarngeo Puncin de petequias

Frotis
Diplococo

gramnegativo carente de motilidad, de 0,8um. Por lo general muestran las neisserias tpicas dentro de los leucocitos polimorfonucleares

Cultivo

Medio de cultivo sin sulfanato de polianetol sdico (muestras de sangre). Agar chocolate (lquido cefalorraqudeo) Incubar a 37C en una atmosfera de 5% de 2 . Medio de ThayerMartin favorece el crecimiento de neisserias.

El crecimiento en agar sangre o chocolate es grisceo, no hemoltico, redondo, convexo, liso, hmedo, de colonias relucientes con bordes claramente definidos.

Prueba de oxidasa de Kovac

Determina

la presencia de citocromo oxidasa. El reactivo de oxidasa de Kovac (1% tetrametil-p-hidroclorofenilendiamina) se torna en un compuesto purpureo por la presencia de microorganismos que contienen citocromo.

Procedimiento
a) b)

c)

Separar la porcin de la colonia que deseemos poseer a la prueba. Frotarla sobre un papel filtro tratado utilizando un asa de inoculacin de platino. No se debe utilizar un asa de Nicromo porque puede producir reaccin falsa positiva. La reaccin positiva se vera en solo 10 segundos.

Resultados Reaccin positiva color purpura Reaccin negativa ningn color

Prueba de aglutinacin en lamina para la seroagrupacion de los aislamientos con sospecha de ser N. meningitidis.
Este mtodo requiere: o Solucin salina fisiolgica formalizada para hacer la suspensin. o Solucin fisiolgica no formalizada (buffer) para mezclar con el antisuero.

En una lamina de vidrio de 25mm x 75mm, dividir en tres secciones. Tomar una colonia, utilizando un asa de inoculacin. Preparar la suspensin medianamente lechosa en 0,25 ml de solucin salina fisiolgica formalizada, mesclar bien. Transferir una gota de la suspensin a la lamina. Agregar una gota de antisuero A encima de la gota de suspensin, en la otra seccin aadimos una gota del antisuero W135 y en la tercera seccin aadimos una gota de solucin salina .

cada uno de los antisueros con la gota correspondiente de suspensin utilizando un palillo. Mover suavemente la lamina durante un minuto Solo las reacciones fuertes de aglutinacin (3+ o 4+) se leen como positivas Resultados

Mezclar

Utilizacin de los carbohidratos : Mtodo de agar cistina tripticasa

Tomar

una pequea cantidad de crecimiento de un cultivo, utilizando una aguja de inoculacin. Inocular pinchando varias veces los 10 mm superior del medio. Usar otra aguja estril, o flamear la misma aguja, antes de inocular cada uno de los cuatro carbohidratos que se van a probar. Cerrar bien las tapas de los tubos y ponerlos a incubar a 35C (sin 2 ) por 72 horas antes de descartarlos como negativos.

 Si

se genera una turbidez visible y un color amarrillo en la porcin superior del medio, es indicador de crecimiento y la produccin de acido se interpreta como una prueba positiva.

Prueba de susceptibilidad a antimicrobianos de N. meningitidis

los

Los cepas de N. meningitidis no muestran resistencia a muchos agentes antimicrobianos. Por lo general, hay un bajo nivel de resistencia a la penicilina. La sensibilidad del meningococo a las sulfonamidas, la rafampicina y el clorafenicol.