Autoanalizador BC-2800

Franco Pavez Armijo

Hematologa Clinica

Recuentos celulares

Los Recuentos Celulares son una serie de procedimientos que tienen por objeto determinar el nmero de cada uno de los tipos celulares que estn comprendidos en una unidad de volumen de sangre, generalmente, en 1 mm3.

Tres Fases: 1.Dilucin de la sangre. 2.Cmputo del nmero de clulas. 3.Clculo matemtico del nmero de clulas presentes en 1 mm3 de sangre. Dichos recuentos pueden realizarse mediante dos modalidades: Mtodos manuales , recuentos tradicionales en cmaras y ledos en Microscopios. Mtodos Automticos, recuentos en contadores electrnicos.

Automatizacin

Mayor exactitud y precisin. Optimizacin de tiempo empleado. Reduccin del margen de error (<1%). No informa estado madurativo de los leucocitos (revisar en frotis siempre).

Propiedades de las clulas sanguneas

Malas conductoras de electricidad. Poseen diferentes tamaos. Poseen diferente densidad. Cada una dispersa la luz con intensidad diferente. Relacin ncleo/citoplasma diferente.

Principios generales: IMPEDANCIA

Corresponde a la deteccin y medicin de cambios en la resistencia elctrica. Mientras que las clulas sanguneas conducen mal la electricidad, el lquido diluyente es un buen conductor de la electricidad. El dispositivo de medida consiste en un pequeo orificio, a travs del cual se hace pasar la sangre diluida. Tiene colocados un electrodo a su entrada y otro a su salida. Tambin se hace pasar una corriente elctrica constante a travs de ese mismo orificio.

Principios generales: DISPERSIN PTICA

La dispersin es el fenmeno de separacin de las ondas de distinta frecuencia al atravesar un material. Todos los medios materiales son ms o menos dispersivos, y la dispersin afecta a todas las ondas.

Diagrama de un contador hematolgico 1/20.000 DILUTOR

Eritrocitos

DILUTOR

Compresor aspirador

Transductor Discriminador
DILUTOR

Recuento Leucocitos
1/300

Diferencia los impulsos

Lector de Impresor

Sistema de apertura

Dos compartimientos

Cmara de Blancos: Elimina los GR, por lisis de ellos, lo que adems libera la Hb, que se puede medir su espectro.

segn

Cmara de Rojos: Elimina los GB por tamao, deja pasar y rojos, pero el orificio que comunica ambas cmaras es muy estrecho, de manera que casi exclusivamente pasaran rojos y plaquetas.

Desventajas entre ambos mtodos

Ventajas de ambos mtodos

Histograma

Los datos se trazan en un grfico de distribucin de frecuencia, o Histograma de distribucin de tamao. Representa la distribucin del volumen de las clulas contadas. Nmero relativo en eje Y, y el tamao en el eje X. ADE (o RDW) se calcula directamente a partir del histograma, como el CV de la distribucin del volumen eritrocitario.

Histograma Eritrocitario

La curva normal de eritrocitos es cnica, modal y se encuentra representada en tamaos de 60-110 fL.

ADE usada para diagnosticar anisocitosis en los eritrocitos, se observa en el histograma.

Histograma Leucocitario

Los Leucocitos se agrupan en tres curvas claramente definidas:

-Curva de linfocitos cncava 50-100 fL. -Curva de mononucleares plana a cncava 100-150 fL. -Curva de granulocitos cncava 150-380 fL.

Histograma Plaquetario

Es una curva cnica sin distribucin normal cuyos tamaos se encuentran entre los 2 a 20 fL.

Determinacin de Hemoglobina

La hemoglobina presente en la muestra, en presencia de ferrocianuro, se oxida a metahemoglobina, a su vez, sta se combina con iones cianuro a pH=7,2 convirtindose en cianmetahemoglobina. Medicin de absorbancia a una longitud de onda de 530 nm

Analizador BC -2800

Es un analizador hematolgico automtico cuantitativo y contador diferencial de leucocitos para uso de diagnstico in vitro en laboratorios clnicos.

Su propsito es identificar al paciente normal utilizando todos los parmetros generados por el sistema y alertar o identificar resultados de pacientes que requieran estudios adicionales.

El anlisis comprende 19 parmetros hematolgicos, a travs de 3 histogramas; de la serie blanca, roja y plaquetaria

Obtencin de parmetros eritrocitarios

Directo
-Recuentro eritrocitos -Hemoglobina -Volumen Corpuscular Medio (VCM)

Clculo -Hematocrito -HCM -CHCM

Componentes qumicos del sistema.

El autoanalizador consta de reactivos, calibradores y controles.

Estos son componentes de un sistema integral y deben utilizarse como un sistema nico. No se debe usar reactivos o controles de diferentes orgenes, ello podra arrojar un mal anlisis ms an daar el sistema.

Cada reactivo debe ser examinado previo a su aplicacin; fecha de vencimiento, filtraciones, etc.

Reactivos

Diluyente; adems de diluir la muestra de sangre, proporciona un entorno similar al del plasma sanguneo para conservar el mismo tamao de las clulas dentro de un cierto periodo de tiempo, y posee una conductividad apropiada para el anlisis celular.

Lisante; rompe rpidamente las membranas de los glbulos rojos y reduce sus restos a un tamao suficientemente pequeo de modo de no interferir con el anlisis de glbulos blancos. Estos pueden luego ser segregados en tres sub-poblaciones para su anlisis diferencial. La absorbancia de la mezcla formada por el lisante y la hemoglobina est determinada por la hemoglobina.

Reactivos.

Detergente; se usa para el lavado de las tubuladuras y para humectar el tubo volumtrico.

Limpiador E Z; corresponde a una solucion de limpieza enzimtica, isotnica y humectante, usada para enjuagar las tubuladuras y los baos. Este limpiador no daa las partes plstica del analizador.

Los calibradores y controles son productos de sangre entera preparados para calibrar y verificar la operacin de los instrumentos que constituyen el analizador

Principios de la operacin

El analizador adopta el principio Coulter para el recuento de la serie blanca, roja y plaquetaria y el trazado los 3 histogramas.

La concentracin de hemoglobina es obtenida por mtodo colorimtrico.

Todos los dems parmetros tales como porcentajes, diferencias de tamaos, VCM, CHCM, RDW, son derivados de los parmetros previamente obtenidos.

Dos tipos de diluciones : Sangre entera

Dos tipos de diluciones: Sangre

Cuando se analiza una muestra preluda, el operador toma una muestra de 20 uL de sangre capilar y la prediluye dispensando 1,6 Ml de diluyente desde el analizador. Luego presenta la muestra as preluda al analizador, el que aspira 0,7 mL

Control del volumen de muestra

Este analizador emplea un sistema ptico de medicin volumtrica para determinar el volumen de muestra aspirada a travs de un orificio.

Cada ciclo de conteo, comienza cuando la superficie del liquido pasa por el sensor superior del tubo volumtrico y finaliza cuando alcanza el sensor inferior.
Si se detectan burbujas o una velocidad anormal del flujo, el sistema producir una alarma de error.

SIGLAS PARMETROS

Obtencin de Parmetros.

El autoanalizador tiene la capacidad de contar 1.000.000.000 de leucocitos directamente, ntese que si al microscopio se observa la presencia de NRBCs, los cuales no reaccionan con el lisante, y pueden ser tomados errneamente por el analizador como leucocitos, por lo que el resultado informado debe ser corregido.

Con la ayuda del diluyente y del lisante, este analizador puede clasificar los leucocitos en tres sub-poblaciones, linfocitos, clulas medias y granulocitos. Linfocitos de 30 fL 85 fL, granulocitos son los mayores con un tamao superior a 125 fL. En cambio las clulas medias poseen un tamao entre 85 fL y 125 fL.

GRACIAS!