El

Agar Citrato de Simmons es un medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias en base a su capacidad de utilizar el citrato. Este medio es recomendado para el estudio de enterobacterias a partir de muestras clnicas, de agua y alimentos. En base a la capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energa

 Resultados

-Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad. -Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color.
MICROORGANI SMO Klebsiella pneumoniae S. typhimurium E. coli CITRATO PERMEASA POSITIVO POSITIVO NEGATIVO COLOR DEL MEDIO AZUL AZUL VERDE

S. flexneri

NEGATIVO

VERDE

 El

agar Hierro de Kliger (KIA), es un medio slido y diferencial. El fundamento se basa en la capacidad de fermentacin de dos azucares (glucosa y lactosa), en la produccin de cido sulfhdrico y en la produccin de gas.

Resultados Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa. Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, y lactosa. Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azcares. La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas.

El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce cido sulfhdrico.

 El

Agar de Hierro y Lisina es un medio utilizado para la diferenciacin de microorganismos entricos. Basandose en su capacidad para desaminar o descarboxilar la lisina y de producir sulfuro de hidrgeno. Este medio tambin es conocido como LIA

1- Decarboxilacin de la lisina:
-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta. -Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo.

2-Desaminacin de la lisina:
Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas del gnero Proteus, Providencia y alguna cepas de Morganella spp. 3-Produccin de cido sulfhdrico: -Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio (especialmente en el lmite del pico y fondo)

 El

Medio MIO es utilizado para la diferenciacin de enterobacterias en base a su movilidad, capacidad para descarboxilar la lisina y la produccin de indol. Este medio tambin es conocido como Medio para Movilidad Indol y Ornitina.

RESULTADOS 1-Movilidad: -Resultado positivo: presencia de turbidez o crecimiento mas all de la lnea de siembra. -Resultado negativo: crecimiento solamente en la lnea de siembra. 2-Ornitina decarboxilasa: -Resultado positivo: color prpura. -Resultado negativo: color amarillo. A veces se puede desarrollar un color violceo en la superficie del medio. 3-Prueba del indol: La prueba de indol se realiza una vez que se ha determinado la movilidad y la prueba de ornitina. -Resultado positivo: color rojo al agregar el reactivo revelador. -Resultado negativo: el color del reactivo revelador permanece incoloro-amarillento.

 Determinar

si la bacteria puede utilizar, ese carbohidrato. El Caldo Rojo de Fenol y Sacarosa es utilizado para la diferenciacin de cultivos puros, en base a su capacidad para fermentar la sacarosa.
Sirve

para detectar si los grmenes son capaces de fermentar el manitol liberando productos cidos que sern detectados gracias al indicador rojo de fenol que cambiar a color amarillo.

Sacarosa para la identificacion de enterobacterias. Bacterias manitol (-) son, dentro de las enterobacterias, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris y Shigella dysenteriae. Entre las bacterias de importancia clnica, la prueba del manitol sirve para diferenciar Staphylococcus aureus (+) de Staphylococcus epidermidis (-). POSITIVO: Amarillo (produccin de cidos, fermentacin del carbohidrato). Puede haber produccin de gas NEGATIVO: Rojo, aumento o quedo igual del pH (produccin de sustancias alcalinas por utilizacin de peptonas)

 Medio

utilizado para la identificacin de microorganismos, en base a la actividad uresica. Es particularmente til para diferenciar Proteus spp. de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae.

TCNICAS DE ANTIBIOGRAMA Las tcnicas de antibiograma son las utilizadas en el laboratorio de microbiologa para estudiar la actividad de los antimicrobianos frente a los microorganismos responsables de las infecciones. Se considera como antimicrobiana cualquier sustancia con capacidad de matar o al menos de inhibir el crecimiento de los microorganismos y que sea susceptible de utilizacin como tratamiento en los pacientes.

Mtodo de la difusin en medio slido Se siembra el microorganismo a estudiar esparcindolo por toda la caja de Petri. Las pinzas de diseccin se colocan en un vaso precipitado con alcohol al 96%. Se toman las pinzas de diseccin se pasan por la llama del mechero y se toma un disco de papel filtro estril y se coloca sobre la superficie del medio Se repite los paso 2,3 y 4 por cada disco Se le agrega a cada disco 5 l de un determinado antibitico o quimioteraputico. Para que la concentracin de antibitico que impregna los discos no sea ni excesiva ni insuficiente, realizar un banco de diluciones. La concentracin de 100 g/ml ya es adecuada para trabajar. Incubar a 37C por 24 hrs.

Cada multidisco contiene aproximadamente: Ampicilina AM Cefalotina CF Cefotaxima CTX Ceftazidimina CAZ Cefurexima CMX Dicloxacilina DO Eritromicina E Gentamicina GE Pefloxacina PEF Penicilina PE Tetraciclina TE TrimetoprimSulfametoxazol SXT

10mcg 30mcg 30mcg 30mcg 30mcg 1mcg 15mcg 10mcg 5mcg 10mcg 30mcg

25mcg

 Las

cepas se clasificaran en: Resistentes(R) (no provoca inhibicin) Intermediarias (I) (menos de 5mm) Susceptibles (S) (mayor de 5mm) Todo esto depende del dimetro del halo en inhibicin (incluyendo la medida del disco).

La utilidad bsica del antibiograma es la instauracin de un tratamiento antibitico correcto al paciente. Es necesario conocer si el microorganismo responsable de la infeccin posee mecanismos que le confieran inmunidad frente a algn antibitico para no incluirlo como terapia. En cuanto al tratamiento el antibiograma no slo es necesario en la instauracin, tambin resulta til en el seguimiento e incluso en la confirmacin de tratamientos empricos. En ocasiones la enfermedad infecciosa resulta grave y se comienza el tratamiento antes de conocer los datos de sensibilidad de la cepa. El antibiograma tiene que confirmar, o en su caso corregir el tratamiento. Otra aplicacin de las tcnicas de estudio de resistencia es la epidemiologa. Es necesario detectar el aumento de los niveles de resistencia en los aislamientos clnicos para tomar medidas correctoras. Por otro lado tambin puede tener utilidad diagnstica porque el perfil de resistencia puede en algn caso orientar en la identificacin bacteriana.

hTtp://www.mcd.com.mx hTtP://biology.uprm.edu/files/pruebas_bioquimi cas.pdf http://perso.wanadoo.es/microdominguez/a.ht m http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/ b02/ http://www.uprm.edu/biology/cursos/micro/pr uebas.htm http://www.scribd.com/doc/3288800/pruebasbioquimicas-fundamentos-microbiologia# http://www.scribd.com/doc/38192348/pruebasbioquimicas-n