BIOREACTORES

TIPOS Y FUNCIONAMIENTO
Dr, Blgo Carlos E. Villanueva A.

Ingeniera Gentica

Microbiologa Industrial
Bioqumica

BIOTECNOLOGIA

Ingeniera Qumica

REACTORES BIOQUIMICOS

! EL CEREBRO !

Biorreactor
Software Hardware

Es el corazn de cualquier proceso de fermentacin o conversin enzimtica

Tipos de biorreactores

SU FUNCION PRINCIPAL
Proveer un medio controlado para alcanzar el crecimiento y formacin de productos ptimos

Su funcionamiento: depende bsicamente de :

1. 2. 3. 4. 5. Biomasa: concentracin Condiciones estriles: mantenimiento Agitacin: efectiva Calor: eliminacin Corte: condiciones correctas

 Se utilizan tres grupos de biorreactores en la bioindustria. 1. No agitados sin aireacin 2. No agitados con aireacin 3. Agitados con aireacin 86 % 11 % 13 %

Ingeniera de Biorreactores
Configuracin Tamao Condiciones del proceso Modo de operar

Biorreactores: configuracin
Tanque agitado (agitacin mecnica) Columna de burbujeo Air lift (de elevacin con aire) Lecho empaquetado Lecho fluidizado Lecho de goteo Fibra hueca

Reactor de Tanque Agitado

Typical stirred-tank fermenter for aerobic culture

BIOREACTOR DE TANQUE CON AGITACION MECANICA

Salida de gas

agitador

Sellado asptico

Separador de espuma
Serpentn de refrigeracin

Salida de agua de refrigeracin

Relacin altura / dimetro: variable, la mas barata es 1 Enfriamiento: serpentines internos. De acero inoxidable > 20 L. Poseen rodetes (agitadores)

Deflectores

Capacidad: se utiliza solo al 70-80 % para dar espacio a espuma.

Uso: El mas utilizado en la industria por bajos costos de operacin. Reacciones con enzimas libres e inmovilizadas, Cultivo de clulas en suspensin e inmovilizadas.

Turbina de palas planas

Entrada de aire Difusor

Entrada del agua de

Mezclado
Combinacin de componentes solubles. Dispersin de gases en pequeas burbujas. Mantenimiento en suspensin de partculas slidas (clulas). Dispersin de lquidos inmiscibles para formar emulsin o suspensin fina. Mejora de la transferencia de calor hacia y desde el lquido.

Difusores
Porosos. De orificios De boquilla

Baffles

Impeller

Baffle arrangements.
(a) Baffles attached to the wall for low. viscosity liquids. (b) Baffles set away from the wall for moderateviscosity liquids.

(c) Baffles set away from the wall and at an angle for high-viscosity liquids.

Impeller designs.

Anchor

Propeller

6-flat-blade dise turbine

Paddle

Gate Anchor

Helical screw

Viscosity ranges for different impellers.

Tipos De Flujo
Circular. Axial Radial. Depende de:
Diseo de la paleta. Propiedades el fluido. Tamao y proporciones del recipiente, bafles y agitador.
Circular flow in an unbaffled stirred tank viewed from above.

Circular flow: formation of vortex

Radial-flow impeller :
Flow pattern produced by a in a baffled tank.

(a) side view

(b) bottom view.

Axial-flow impeller:
Flow pattern produced by an in a baffled tank.

(a) side view

(b) bottom view

Transmisin de Calor
Calentamiento (vapor). Enfriamiento (agua de refrigeracin).

Equipos de Transmisin de Calor

Intercambiadores de tubos concntricos (operacin en contracorriente y cocorriente). Intercambiadores de carcasa y tubos.

Annulus fluid in

Double-pipe heat exchanger

Tube fluid out

Tube fluid in

Annulus fluid out

Jacketed vesel

External coil

Internal helicoidal coil

Internal baffletype coil

External heat exchanger

Coil Interno: Desventajas

Interferencia en el mezclado. Dificultades en la limpieza.

Posibilidad de crecimiento celular en la superficie.

Reactor de Columna de Burbujeo

Bubble Column Bioreactor

Salida de gas

BIOREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJAS

El flujo depende de:

Caudal de aire. Diseo del difusor. Dimetro de la columna. Propiedades del lquido.

Suministro de aire

BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJAS

Estructura sencilla: cilindros: alturas dobles al dimetro. Agitacin, aireacin y mezcla; inyeccin de gas (aire) con difusor. Estructuras internas No presentan. Costo: baratos, sin partes mviles. por

Rendimiento: adecuado en la transferencia de materia y transmisin de calor.

Usos: produccin de levaduras, cerveza, vinagre y tratamiento de aguas residuales.
HETEROGENEOUS FLOW IN A BUBBLE COLUMN

Reactor Air Lift

BIOREACTOR DE ELEVACION CON AIRE

Gas exhaust

Gas exhaust

Gas exhaust

Draft tube Downcomer Riser Riser

Downcomer

sparger

sparger

Air

Airlift reactor configurations

Air

Air

Estructura sencilla Agitacin: por inyeccin de aire

Bajo shear
Rasgo caracterstico: separacin fsica de corrientes (flujo liquido) ascendente y descendente) El gas se inyecta por el riser y baja a travs del downcomer por diferencia de densidad. Tipos: de bucle interno y bucle externo (el mas efectivo). Relacin altura dimetro: 10.1 Usos: produccin de protena unicelular de metanol y gasoil, cultivo de clulas animales, vegetales, tratamiento de aguas, procesos con catalizadores inmovilizados

A Comparison of Mechanically and Pneumatically Agitated Bioreactors

Mechanical agitation (Stirred Tank) 1) 2) 3) 4) 5) Pneumatic Agitation (Airlifts, Bubble Columns) Mechanically complex (stirrers, shaft, seals, Mechanically simple and robust bearings) Often high shear Gentle, low shear levels (suitable for tissue culture, plant cells, fragile genetically engineered microorganisms) Gas throughput limited by impeller flooding High gas throughputs possible (particulary in airlift devices) Difficult to clean due to mechanical Easy to clean. Extended asceptic operation complexity; greater possibility of possible (useful in continuous operation) contamination over extended operation Turbulence confined to impeller zone en More uniform distribution of turbulence viscous on-Newtonian media. Gas channels througth the impeller zone while the rest of reactor remains stagnant Operationally flexible (controlled by impeller Limited operational flexibility. Require more speed and by gas flow rate) careful design.

6)

Reactor de Lecho Empaquetado

BIORREACTOR DE LECHO EMPAQUETADO

Salida de gas
Medio recirculado

Aire
LECHO RELLENO DE PARTICULAS DE CATALIZADOR

Recipiente agitado

Agitador Difusor

Packed-bed reactor with medium recycle.

Bomba

BIOREACTOR DE LECHO EMPAQUETADO

Estructura: tubos verticales rellenos empaquetados con con biocatalizadores inmovilizados o en forma de partculas. Las partculas deben ser incompresibles. Medio de recirculacion: debe ser lmpido.Se alimenta por la parte superior o inferior y se recircula. Pantallas: a la salida para evitar la salida de partculas. La agitacin y aireacin: en recipientes separados. La aireacin no debe realizarse en el lecho empaquetado (columna). Uso: No apta para procesos productores de gas. Clulas y enzimas inmovilizadas para producir aspartato y fumarato. Conversin de penicilina a 6 - aminopenicilnico. Resolucin de ismeros de aminocidos.

Reactor de Lecho Fluidizado

Fluidised-bed reactor

Catalizadores empaquetados se mantienen en suspensin por movimiento ascendente del liquido impulsado por gas.

Salida de gas
BIOREACTOR DE LECHOS FLUIDIZADOS

El medio es recirculado
Modificacin del biorreactor de lecho empaquetado. Uso: tratamiento de residuos con arena o material similar que soporta mezclas de poblaciones microbianas. Uso organismos floculantes en la fabricacin de cerveza y vinagre.

Recirculacin de liquido

Entrada de gas pump

Reactor de Lecho de Goteo

Trickle-bed reactor

Salida de gas
Distribuidor por nebulizacin o spray
Liquido: se roca (spray) sobre la parte superior del empaquetado y las gotas descienden a travs del lecho como pequeas corrientes.

BIOREACTOR CON LECHOS DE GOTEO

Aire o gas: se introduce por la base y sube con facilidad ya que la fase liquida no es continua a travs de la columna.
Modificacin del biorreactor de lecho empaquetado.

Recirculacin de liquido

Uso: tratamiento aerobio de aguas residuales. Entrada de

gas

pump

Reactor de Fibra Hueca

inoculation port

water jacket

product

nutrients

product

nutrients

cells in annular space

lumen

inner membrane outer membrane

Hollow fiber perfusion bioreactor

Parameters Measured or Controlled in Bioreactors

Physical Temperature Pressure Reactor weight Liquid level Foam level Agitator speed Power consumption Gas flow rate Medium flow rate Culture viscosity Gas hold - up Chemical PH Dissolved O 2 Dissolved CO 2 Redox potential Exit gas composition Conductivity Broth composition (substrate, product, ion, concentrations, etc.) Biological Biomass concentration Enzyme concentration Biomass composition (such as DNA, RNA, protein, ATP/ADP/AMP NAD/NADH levels) Viability Morphology

Bibliografa
1. Doran, P. (1988) Bioprocess Engineering Principles. Academic Press Limited. London 2. Scragg, A. (ed). (1966) Biotecnologa para ingenieros. Sistemas biolgicos en procesos tecnolgicos. Editorial Limusa S.A. De C.V. Mxico

Gracias

Parameters and Other Factors in rDNA Fermentation

Inoculum preparation
Stable maintenance of recombinant cells during inoculum development.

Media desing
Medium desing for maintenance of recombinant cells

Oxygen transfer
Increased oxygen demand Sensitivity to oxygen perturbation.

Process control and optimization

Fine control of process variables (pH, temperature, DO level, etc.)

Other
Reduced shear rate when protein is secreted into medium. Optimization of dilution rate in continuous fermentation Biosafety guidelines

Los Dispositivos de medida usados en la Industria tienen que cumplir los siguientes requisitos: Precisin dentro del 1 - 2 % de la escala completa. Operacin fiable durante al menos 80 % del tiempo. Bajo costo de mantenimiento. Esterilizables por vapor. Sencillez de manejo.