Universidade Federal do Cear Faculdade de Medicina de Sobral Microbiologia Mdica

Controle do Crescimento Microbiano

Profa. Camila Coelho

Histrico
O controle microbiano iniciou-se h cerca de 100 anos

Estudos de Pasteur

Mtodo de aquecimento leve da

cerveja e do vinho, prevenindo a

deteriorao sem alterar o sabor

Joseph Lister

Lavagem das mos com CaCl3 Tcnicas de cirurgia assptica

Importncia
Preveno e controle de infeces em servios

mdico-hospitalares
Preveno e controle de infeces alimentares Segurana biolgica na manipulao de

microrganismos no laboratrio

Esterilizao
Processo de destruio, inativao definitiva e /ou

remoo de todas as formas de vida de um

objeto ou material. Inclui os esporos que so a forma mais resistente de vida. um processo absoluto, no havendo graus de esterilizao

Desinfeco
Destruio (morte) de microrganismos patognicos.

Geralmente so usadas substncias qumicas que

so aplicadas em objetos ou materiais. Reduzem ou inibem o crescimento, mas no esterilizam

necessariamente
Quando este tratamento dirigido aos tecidos

vivos, pele e mucosas denominado ANTI-SEPSIA

Degermao
Remoo mecnica de microrganismos de uma rea limitada (ex: pele)

Ex: antes das injees, o algodo

embebido em lcool passado na pele; igualmente o lcool-iodado, preparando

o campo cirrgico

Assepsia
Ausncia de microrganismos em uma rea.
Tcnicas asspticas previnem a entrada de microrganismos

Ao microbicida
Nesta condio ocorre a perda irreversvel da

capacidade de multiplicao do microrganismo, o que

culmina com sua morte. Se o agente (substncia ou condio) for retirado, o crescimento no recomea.

Bactericida

Virucida

Fungicida

Esporocida

Ao microbiosttica
Nesta condio o crescimento microbiano est

inibido, mas o microrganismo no est morto. Se o

agente (substncia ou condio) for retirado, o crescimento pode recomear

Ex:

baixas

temperaturas,

substncias

qumicas,

quimioterpicos

Aes dos agentes de controle microbiano

Alteraes na permeabilidade da membrana celular

Dano s protenas

Dano aos cidos nuclicos

Condies que influenciam na atividade antimicrobiana

Tamanho da populao microbiana - quanto > mais tempo

para morrer

Concentrao do agente microbicida - quanto < a [ ]

mais tempo leva para destruir

Tempo de exposio ao agente microbicida - quanto > o

tempo de exposio > n de clulas mortas

Condies que influenciam na atividade antimicrobiana

Temperatura em que so expostos ao agente

microbicida - quanto mais alta a temperatura mais rapidamente a populao morta

Caractersticas dos microrganismos que esto

presentes

Controle do crescimento microbiano

Mtodos fsicos e qumicos

IMPORTANTE: A escolha do processo de controle microbiano

depende do artigo a ser tratado

Mtodos fsicos
Calor

- Calor mido: fervura, autoclave - Calor seco: flambagem, incinerao, forno

Radiao: ionizante e no ionizante Microondas Filtrao Baixas temperaturas

Calor seco
Mec. ao: oxidao
Flambagem ala microbiolgica

Incinerao

- cinzas
Forno Pasteur (170C - 2h)

Obs: Tempo e temperatura maiores so necessrios em relao ao calor mido

Calor seco

Forno

Incinerador

Calor mido
Mec. ao: desnaturao protica - rompimento de

pontes de hidrognio de protenas

Fervura

- Mata formas vegetativas de patgenos, vrus, fungos - 10 min.

- Vrus da hepatite A: pode sobreviver a at

30 min. de fervura - Esporos: podem resistir > 20h

Calor mido
Autoclave
Vapor sob presso Mtodo prefervel Material no pode ser danificado pelo calor ou umidade

121C / 15 min / 15 psi Ex: Meios de cultura, bandagens, instrumentos, solues, aplicadores, etc.

Autoclave
Tempo x temperatura x presso

Autoclave

Calor mido
Quanto > a presso na autoclave > a temperatura

Materiais slidos e grandes requerem tempo extra para

alcanar a temperatura adequada, pois, no desenvolvem correntes de conveco eficientes como ocorrem nos lquidos

Evitar uso de papel alumnio - imunes ao vapor

Mtodos de controle de esterilidade

Controles Biolgicos:
Monitorar o processo de esterilizao Populao padronizada de microrganismos viveis

(usualmente esporulados)
Ex: tiras de papel impregnada com esporos dos bacilos
Bacillus subtilis B. stearothermophillus

Mtodos de controle de esterilidade

Usos: validao das autoclaves e ao trmino de todas as manutenes realizadas (preventivas ou corretivas)

Controle qumico

Radiaes
Comprimento de onda, intensidade e durao

Ionizantes Ionizantes:

No ionizantes

Raios gama, raios X, feixes de eltrons de energia Mec. ao: ionizao da gua - radicais hidroxila

altamente reativos
Reagem com o DNA destruio do DNA

Radiaes
No utilizada na rotina

Cobalto raios gama

Penetrao profunda Esterilizao de produtos farmacuticos e suprimentos

mdicos e dentrios Ex: Seringas plsticas, luvas cirrgicas, compressas, materiais de sutura e cateteres

Radiaes

Radiaes
No ionizantes:
Luz ultravioleta (UV) Mec. ao: Ligaes entre timinas adjacentes

dmeros de timina
Inibem replicao correta do DNA durante

reproduo celular Ex: lmpada UV em salas de hospitais, enfermarias, salas de cirurgia e refeitrios

Formao de dmeros de timina

Radiaes
Desvantagens:
penetrao

Exposio direta luz UV

Organismos protegidos por papel, vidro e tecido no

so afetados
Leso de olhos Exposio prolongada: queimaduras e cncer de pele

Microondas
Mecanismo de ao indireto

Gerao de calor
Poucos estudos mostrando tempo e potncia

necessrios para esterilizao

Microondas caseiros no esterilizam

Filtrao
Remoo mecnica

Materiais sensveis ao calor

Normalmente no esteriliza

Ex: meios de cultura, vacinas, enzimas, solues antibiticas

Filtrao

Filtrao

Filtrao
Filtros HEPA

Filtros de partculas de ar de

alta eficincia
Ex: Salas de cirurgia, salas pacientes queimados

Remoo de microrganismos >

0,3m dimetro

Filtrao

Baixas temperaturas
Efeito depende do microrganismo e intensidade da

aplicao Mec. ao: reduo do metabolismo

Efeito bacteriosttico Psicrfilos Bactrias patognicas no crescem

Mtodo
Calor mido: 1. Fervura 2. Autoclavao

Mecanismo de ao
Desnaturao de protenas Desnaturao de protenas Oxidao Oxidao

Comentrios
Mata bactrias, vrus e fungos em 15 min. No eficaz para esporos Mtodo eficaz de esterilizao. Ateno ao trinmio: tempo x temperatura x presso Mtodo eficaz de esterilizao Mtodo eficaz de esterilizao

Uso preferencial
Processo de desinfeco de larga utilizao caseira Meios de cultura, solues e utenslios que toleram temperatura e presso Ala, fio e garfo microbiolgicos Papis, restos de curativos, algodo e gazes utilizados em hospitais Vidraria e outros materiais resistentes altas temperaturas Eliminao de bactrias e fungos em lquidos termolbeis e filtrao do ar em cmaras e salas

Calor seco: 1. Flambagem 2. Incinerao

3. Fornos

Oxidao

Mtodo eficaz de esterilizao. Ateno ao binmio: tempo x temperatura Separa bactrias e fungos em meios ou solues lquidas e gases

Filtrao

Remoo mecnica

Radiaes: 1. Ionizantes
2. No ionizantes Baixas temperaturas

Destroem DNA, formam radicais superativos

Formao de dmeros no DNA Interrupo do metabolismo

Mtodo eficaz de esterilizao, mas de custo elevado (raios gama)

Raios ultravioleta tem emprego restrito Efeito microbiosttico

Esterilizao de produtos cirrgicos

Lmpadas germicidas (UV) Preservao de microorganismos

Mtodos qumicos
lcoois

Aldedos
Bifenis

Ao: pH, temperatura, matria orgnica

Halognios
Biguanidas Quartenrios de amnio Metais pesados e derivados Agentes oxidantes

Presena de matria orgnica dificulta a ao de agentes qumicos

lcoois
Mec. ao: desnaturao protica e solubilizao de

lipdeos
Bactericidas e fungicidas Ineficaz contra esporos, vrus no envelopados Usos: termmetros e outros instrumentos, limpar a pele

antes de injeo, etc.

Ex: Etanol, isopropanol
Etanol puro menos efetivo que as solues

aquosas, pois a desnaturao requer gua

Aldedos
Formaldedo e glutaraldedo

Mec. ao: inativao protica

Agentes esterilizantes ou desinfetantes Formaldedo: irritante e carcinognico Ardor, lgrimas, tosse, cefalia, insnia, taquicardia

uso de EPIs
Bactericida, fungicida, virucida, esporocida Instrumentos hospitalares

Bifenis
Derivados do fenol Mec. ao: ruptura da memb. plasmtica / desnat. protica

Hexaclorofeno

- Staphylococcus e Streptococcus - Controle de infeces em berrios

Triclosano

- Sabonetes antibacterianos e pasta de dente

- Bactrias gram positivas e gram negativas

- Pseudomonas aeruginosa

Halognios
Iodo
Bactericida, fungicida, esporocida Mec. ao: combinao irreversvel com protenas e

oxidao
Tintura e iodforo Combinao de iodo + molcula orgnica

liberao lenta do iodo Ex: Betadine, Isodine Usos: Desinfeco da pele e tratamento de feridas

Halognios
Cloro
Amplamente utilizado Mec. ao: oxidante de sistemas enzimticos celulares Hipoclorito de sdio, hipoclorito de clcio

Ex: lquido de Dakin (hipoclorito de sdio 0,5%)

1840: usado por Semmelweis para controlar

infeces hospitalares no parto

Biguanidas
Clorhexidine
Assepsia da pele, lavagem de mos de cirurgies e

pessoal mdico em geral

Mec. ao: ruptura da membrana plasmtica

Usos: Urologia, obstetrcia e ginecologia, queimados,

desinfeco da pele para escovao cirrgica, preveno

e tratamento de doenas orais

Biguanidas
0,5%: bacteriosttico
4%: bactericida

Quartenrios de amnio
Detergentes catinicos
Mec. ao: afetam a membrana plasmtica Bactericidas, fungicidas, virucidas (vrus envelopados) Mais ativos contra Gram positivos Interferncia de matria orgnica

Ex: Cloreto de benzalcnio, cetilpiridnio

Pseudomonas crescem ativamente

Metais pesados e derivados

Prata , mercrio, cobre

Mec. ao: desnaturao protica

Ao oligodinmica Nitrato de prata, mercrio cromo, sulfato de cobre

- Oftalmia gonorrica neonatal, algicida, preveno de mofo em tintas

Agentes oxidantes
Mec. ao: oxidao de sistemas enzimticos dos

microrganismos
Substncias orgnicas efeito
Sem efeito residual

Ex: gua oxigenada 3%, permanganato de potssio,

oznio, cido peractico Usos: lavagem de feridas e mucosas com tecidos mortos

Caractersticas de um agente qumico ideal

ATIVIDADE ANTIMICROBIANA - a capacidade de

uma substncia de inibir ou preferencialmente matar os microrganismos

ESTABILIDADE - o armazenamento da substncia

durante um perodo razovel no deve resultar em uma perda significativa de ao antimicrobiana

Caractersticas de um agente qumico ideal

AUSNCIA DE TOXICIDADE - no deve prejudicar o

homem ou os animais

INATIVAO MNIMA POR MATERIAL ESTRANHO

- alguns compostos qumicos antimicrobianos se

combinam facilmente com protenas, diminuindo a quantidade de substncia qumica disponvel para agir contra os microrganismos

Caractersticas de um agente qumico ideal

ATIVIDADE EM TEMPERATURA AMBIENTE OU

CORPORAL - no deve ser necessrio aumentar a

temperatura alm daquela normal encontrada no ambiente, onde os compostos qumicos so utilizados
BOM PODER DE PENETRAO
CAPACIDADE DETERGENTE - um agente antimicrobiano

que tem propriedades detergente tem a vantagem de ser

capaz de remover mecanicamente os microrganismos da superfcie que est sendo tratada

Caractersticas de um agente qumico ideal

AUSNCIA DE PODERES CORROSIVOS E

TINTORIAIS - os componentes no devem corroer ou

desfigurar metais nem corar ou danificar os tecidos
PODER DESODORIZANTE - o desinfetante ideal deve

ser inodoro ou apresentar um odor agradvel

DISPONIBILIDADE A BAIXO CUSTO - o produto deve

ser facilmente encontrado e de baixo custo

Efetividade dos agentes

Prions Esporos bacterianos Micobactrias Vrus no envelopados Fungos Bactrias vegetativas

Vrus envelopados