Destino de sustancias orgnicas en el ambiente

Medicin de susceptibilidad al ataque biolgico depende de condiciones: Biodegradable Recalcitrante o resistente Persistente

BIODEGRADACION/BIOTRANSFORMACION

Transformacin biolgica de una sustancia qumica de una forma en otra.

Biodegradacin
Ataque biolgico de sustancias orgnicas No involucra la extensin del ataque Tiempo de permanencia en el ambiente: determina adaptabilidad evolutiva de organismos . No implica un resultado benigno: . Una sustancia inocua en toxica . una toxica en inocua . Cambio de la especificidad de la toxicidad . Cambio en la intensidad de la toxicidad . cambio en su metabolicibilidad

BIODEGRADACION
TIPOS

TOTAL

PARCIAL

PRIMARIO

Tipos de comportamiento

Degradables Recalcitrantes o resistentes Persistentes

Factores de Biodegradabilidad
Peso molecular Xenobiticos y/o Biogenicos Complejidad Cantidad Pureza.

INICIO DE BIODEGRADACION

Materia Orgnica : C-0H y C-0 Catabolismo : Deshidrogenaciones H ( e ) : NAD (P) - Cadena respiratoria ATP: - Cadena respiratoria - Fosforilizacin a nivel de sustrato - Sistema de fosfotransferasa Inicio: fosforilizacion simple

Sustancias bioquimicamente inertes

Sin oxigeno en sus molculas No pueden sufrir deshidrogenaciones Bacterias nicas en capacidad de iniciar su oxidacin directa con oxigeno molecular Prosigue su degradacin secuencial hasta alcanzar vias catablicas comunes (beta oxidacin)

BIODEGRADACION

BD depende de actividad microbiana BD de mat. org. mediada por hongos y bacterias. (Ubicuos / gran versatilidad metablica) Bacterias: crecimiento rpido metabolismo rpido plasticidad gentica alta adaptabilidad

Aspectos claves de mineralizacin de contaminantes

Deben ser convertidos en intermediarios que participan en las vas catablicas centrales (VCC). Gran variedad de mecanismos que llevan a VCC ya han sido esclarecidos (por estudio de efluentes parciales y totales). Rol importante de los consorcios microbianos en naturaleza (cometabolismo/cooxidacin) - CACl + consorcio = BD - CACl + (anlogo o Cl metabolizable) +consorcio = BD + - Base: enzimas BD de especificidad dbil

BIODEGRADACION DE HIDROCARBUROS

Branched alkanes

Pseudomonas

Sphingomonas Pseudomonas

n-alkanes

Low-molecular weight aromatic compounds

Burkholderia
Polar compounds (resins y asphaltenes) Cicloalkanes

Cellulomonas Cladophialophora

Condensed cicloalkanes and aromatic compounds

Alcaligenes Phormidium Oscillatoria

Caso 1

Introduccin de -OH a un anillo saturado Posterior oxidacin puede facilitar rotura de anillo Hay generacin de fragmentos moleculares susceptibles a ingresar a vas catablicas comunes

Caso II

Benceno insustituido: ncleo de resonancia inerte Sustitucin de dos OH Inicia ataque enzimtico: rotura de anillo Hay generacin de cidos orgnicos Fcil degradacin posterior

Conclusin: Reacciones concertadas entre oxigeno y compuestos orgnicos

SOLUCION
Elementos de transicin con electrones no apareados en orbitales Fcil reaccin directa entre estos elementos y oxigeno molecular

BACTERIAS Monooxigenasas Dioxigenasas

Biodegradacin de hidrocarburos: via oxigeno electroflico

Monooxigenasa

Porfirina ferrica

Proteina
.

Oxidacin de un substrato organico por monoxygenasa citocromo P450

Citocromo reductasa

Citocromo reductasa

BIODEGRADACIN DE ALCANOS POR ATAQUE MONOTERMINAL

BIODEGRADACION DE ALCANOS VIA OXIDACION OMEGA ATAQUE DITERMINAL

BIODEGRADACION DE ALCANOS VIA -OXIDATION U OXIDACION DI-TERMINAL

-Hidroxiacido

-oxidacin

BIODEGRACION DE ALCANOS VIA -OXIDACION

Oxidacin terminal

-Oxidacin

BIODEGRADACION DE CICLOALCANOS

02
HOOC- (CH2)3-COOH

-oxidacin

BIODEGRADACIN DE CICLOALCANOS VIA LACTONIZACIN

(Hidroxiacido)

Acetil

-oxidacin

Biodegradacin de saturados
Monooxigenasa NADP H + E-FAD E- FADH2 + O2 + AH E- FADH2 E- FAD + AOH + H2O

Dioxigenasa E + 02 + AH2 AH A (OH) 2 (Dihidroxi forma) AOH AOH

E + 02 +

AH

COFACTORES DE OXIGENASAS

Hemo Cobre

Flavinas Fierro no hemo

Pterinas Mn

Reaccionan con O2 y lo activan

Reaccin de monooxigenasas: R-H + NAD(P)H + H + O2------ R-OH + NAD(P) +H2O (formacin de -OH) Requieren NADPH o NADH Dioxigenasas Fijan directamente oxigeno molecular a compuestos orgnicos: R + O2-------- R02

Degradacin anaerbica de sustancias orgnicas aromticas

1.- Anillo aromtico + H ---- ciclohexanonas 2.- ciclohexanona----- cidos alifticos 3.-Ac. Alifticos----- catabolismo comn
Requerimiento: coenzimas reducidas

Sustancias orgnicas halogenadas.

mayora: xenobioticos naturales

Hay m.o. que los degradan AEROBIOSIS: 1.- rotura de haloaromaticos con deshalogenacion de restos alifticos y formacin de doble enlace o 2.- Deshalogenacion seguida de rotura de anillo Participan mono /dioxigenasas: haluros reemplazados por OH ANAEROBIOSIS: - haluro reemplazado por H AMBIENTE: critico para la degradacin

Condiciones DE BIODEGRADACION

Presencia de organismos capaces Oportunidad para sntesis de enzimas (inductores, represores,etc) Ambiente optimo para mxima tasa BIODEGRADACION: PROCESO ALTAMENTE ESPECIFICO

DEGRADACION DE XENOBIOTICOS

BASE Estereospecificidad enzimtica no tan exacta MECANISMOS Degradacin gratuita Cometabolismo

BIODEGRADACIN GRATUITA
Principal especificidad enzimtica: tipo de reaccin * Especifidad enzimtica menor: Enlace a sustrato No es raro enlace de enzimas a xenobioticos que son anlogos de los sustratos naturales ( grupos comunes) Grupos funcionales de xenobioticos no deben alterar la carga de sitios activos Principal mecanismo de degradacin de xenobioticos

Degradacin gratuita Condiciones

Concentracin atoxica para bacterias del xenobiotico Capacidad del xenobiotico de inducir enzima Grado de similaridad de grupos funcionales entre xenobiotico y sustrato natural Numero de sustituciones Tipo o posicin de la parcela xenobiotica Biodegradacion solo en presencia de S natural si xenobiotico no actua como inductor Naturaleza del producto formado

Degradacin gratuita: Consecuencias adversas potenciales

Productos de mayor toxicidad para el microbio u otros del ecosistema Productos de menor susceptibildad a posterior ataque microbiano que xenobiotico Producto mas susceptible a bioacumulacion (efecto deletereo mayor en cadena alimenticia Hay induccin coordinada de sistemas enzimticos (operones) Vias complementadas por consorcios Cultivos simples eficaces si usan a xenobiotico como fuente de C y energia o agregar la fuente requerida

COMETABOLISMO

Transformacin de sustrato que no promueve crecimiento en presencia obligatoria de sustrato que si favorece crecimiento u otro compuesto transformable Degradacin gratuita: transformacin no requiere energa para transportar el xenobiotico o iniciarla Cometabolismo: transformacin requiere energa para tranportar xenobiotico o iniciarla

CLAVE PARA BIODEGRADABILIDAD

Evaluarla

en cultivo mixto. Evaluarla en sistemas de mezcla de sustratos. Tomar en cuenta cometabolismo e interrelaciones microbianas. No es til evaluacin de uso como fuente de C y de cultivos puros.

Sistemas mixtos de sustratos Requerimientos

Control

enzimtico: constitutivas e inducibles INDUCCION Y REPRESION Inhibicin de actividad y admisin intracelular Concentracin y tasa de reaccin (cultivo continuo a bajas u para fuente de C y )

Sistemas de interaccin microbiana

Mi/Mj

Efecto

positivo

ausente
Comensalismo neutralismo amensalismo

negativo
Parasitismo predacion amensalismo competencia

Positivo mutualismo

Neutro

Comensalismo negativo Parasitismo predacion

Interaccin microbiana

Provisin de S especficos entre miembros Remocin de P inhibidores Estabilidad por modificacin de parmetros de crecimiento de ciertos miembros Efectos concertados o sinrgicos Presencia de estados de cometabolismo Transferencia de H+ Presencia de varios consumidores de S primario

Evolucin de nuevas vas Mecanismos de transferencia de genes

Mutacin Transformacin Transduccin Conjugacin

Sustratos de Vas mediadas por Plsmidos

Plasmido OCT TOL SAL CAM NIC pJP1 Sustrato Compuestos lifaticos:octano,decano HC aromaticos y polinucleares(Tolueno,xileno HCAyPN : salicilato,benzoato,terpenos HCPN: alcanfor.alcaloides Nicotina.nicotinato HC clorinados

pAC21 pAC25

P Cl difenilo 3 Cl benzoato

Vas metablicas de BD de xenobiticos

Catabolismo: fuente energa y molculas bsicas para sntesis. Principales vas: EMP, HMP, Krebs y cadena respiratoria Reaccin general: CH2O (complejo) + O2 = CO2 + H2O + energa (mineralizacin) BD de compuestos complejos : + comn biotransformacin (algunas peligrosas: lindano) Bioemulsificadores o biosurfactantes favorecen movilidad y biodisponibilidad (HCPA)

Monomeric Biosurfactant

Micella

Gota de petroleo celula en interfase

Oil droplet

Cell in the aqueous phase

Cell

Adsorbed oil droplet Absorbed oil droplet Cell Oil droplet

MICROSCOPIA DE TRANSMISION MOSTRANDO ESTRUCTURAS INTRACITOPLASMATICAS ASOCIADAS A CELULAS QUE CRECEN EN HYDROCARBUROS

Microscopia de arrastre mostrando apndices intercelulares