RADICAIS LIVRES E SISTEMAS ANTIOXIDANTES

Prof. Dr Uderlei D. Silveira Covizzi

2 a 5% do oxignio respirado acaba gerando radicais livres (espcies instveis altamente reativas)

compostos txicos que podem ser

responsveis por uma srie de doenas e pelo envelhecimento

ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO (EROs)

HOe-

O2
Oxignio molecular

O2.Radical nion superxido

e2H+

H2O2
Perxido de hidrognio

e+ HO.
Radical hidroxil

e2H+

2 H2O
gua

ESPCIES REATIVAS DE OXIGNIO:

radicais livres:
nion superxido (.O2),
radical hidroxil (.OH), radical xido ntrico (.NO), etc.

no-radicais:
perxido de hidrognio (H2O2 ),

cido hipocloroso (HClO)

oxignio singlet (1O2), etc.

O oxignio passa de mocinho em bandido

durante a CADEIA DE TRANSPORTE DE

ELTRONS A CoQ pode doar o eltron diretamente para o O2 (on superxido) Enzimas oxidases, oxigenases e peroxidases geram superxido e perxidos Radiao ionizante: ionizam gua formando radicais hidroxil

CADEIA DE TRANSPORTE DE ELTRONS

Espao intermembranas

MI

Matriz mitocondrial

Problema: nem sempre O se transforma diretamente em H2O, pois em alguns pontos da mitocndria ocorrem vazamentos. Ao ganhar um eltron, graas ao vazamento da mitocndria, o oxignio se transforma em nion superxido (.O2) .O O2 + eltron 2

nion superxido (.O2) pode reagir com outro superxido gerando perxido de hidrognio (H2O2) gua oxigenada no um radical e no reage no mesmo lugar onde formada. Porm, as molculas de H2O2 so capazes de passar de uma clula para outra.

Trnsito

de

H2O2

aumenta

probabilidade de esbarrarem em um tomo

de ferro.

combinao entre

H2O2

tomos de

ferro gera o terceiro e mais terrvel dos

radicais:

radical

hidroxila

(OH),

altamente reativo

REAO DE FENTON
+ H2O2 Fe3+ + O2 Fe2+ + O2 _________________________________ H2O2 + O2 OH- + OH + O2 Fe3+

Fe2+

+ OH + OH

O radical hidroxil pode danificar:

Peroxidao dos c. Graxos insaturados da membrana celular

Altera estrutura terciria das protenas Induzem mutaes no DNA

As Espcies Reativas de Oxignio (EROs) so produzidas regularmente durante o processo respiratrio Os EROs so mantidos em nveis mnimos atravs dos mecanismos defensivos enzimticos e no-enzimticos, conhecidos como antioxidantes.
Antioxidantes: so capazes de anular o efeito dos radicais de oxignio.

Indivduo Normal: equilbrio entre a produo de EROs e antioxidantes

EROs

ANTIOXIDANTES

Na maioria das vezes esses mecanismos agem impedindo a reao entre H2O2 e superxido (O2) na formao do radical hidroxil (OH).
Quando a produo de radicais livres est aumentada e os sistemas de defesa esto diminudos estabelece-se uma situao de estresse oxidativo.

ESTRESSE OXIDATIVO
ANTIOXIDANTES

EROs

DEFESA ANTIOXIDANTE ENZIMTICA

Sistemas enzimticos mais importantes:

superxido dismutase (SOD) glutationa peroxidase catalase

SUPERXIDO DISMUTASE
A SOD considerada a enzima central do sistema de defesa contra o estresse oxidativo. Esta enzima catalisa a reao entre radicais superxido produzindo perxido de hidrognio

O2 + O2

SOD

H2O2 + O2

Dismutao: reao na qual 2 molculas idnticas so transformadas em compostos diferentes.

diminui a taxa de nion superxido e consequentemente, reduz a formao de radicais hidroxila.

A SOD

CATALASE E GLUTATIONA PEROXIDASE

Catalases e peroxidases capturam o H2O2, e promovem sua degradao. CATALASES: convertem o H2O2 em H2O e O2
CATALASE

2H2O2

2H2O + O2

GLUTATIONA PEROXIDASE:

liquida definitivamente radicais livres, pois gera apenas gua. pode reagir tanto com a gua oxigenada quanto com os ons hidroxil. Consome glutationa.
GLUTATIONA PEROXIDASE

H2O2 + 2GSH

2H2O + GSSG

GSH Glutationa reduzida GSSG Glutationa oxidada

Glutationa um tripeptdeo-tiol (gamaglutamilcisteinilglicina) presente na maioria das clulas para neutralizar os radicais livres.
No processo, forma-se glutationa oxidada (GSSG), que regenerada pela Glutationa redutase (que usa NADPH).

GLUTATIONA REDUTASE

GSSG + NADPH + H+

2 GSH + NADP+

Estrutura da Glutationa

RELAO ENTRE AS ENZIMAS DE DEFESA ANTIOXIDANTE

DEFESA ANTIOXIDANTE NO-ENZIMTICA

inclui certos micronutrientes presentes na dieta, que tm propriedades antioxidantes. Estes incluem vitaminas como: cido ascrbico (vitamina C), a-tocoferol (vitamina E), b-caroteno (Vitamina A), alm de outros carotenides micronutrientes.

antioxidantes naturais ajudam a proteger: membranas celulares, protenas e DNA e outras macromolculas, dos danos provocados por espcies reativas de oxignio (EROs).

VITAMINA E (a-tocoferol)
vitamina E: lipossolvel, pode reagir com hidroperxido (HO2) e radical hidroxila (OH), protegendo a membrana dessas espcies reativas.

VITAMINA E (a-tocoferol)
maior ao antioxidante em membranas biolgicas est em sua reao com os radicais peroxil (ROO) e alcoxil (RO), formados por ataque de radicais e propagadores da peroxidao lipdica ao reagirem com cidos graxos poliinsatutados

lipoperoxidao: reao radicalar em cascata que tem como uma das conseqncia a diminuio da fluidez, podendo levar perda completa da integridade das membranas biolgicas.
vitamina E (tocoferol) atua como um antioxidante doando seu hidrognio lbil e assim interrompendo a reao em cadeia da peroxidao lipdica.

(Peroxil) ROO + TOH ROOH + TO (tocoferil) (alcoxil) RO + TOH ROH + TO

Durante sua ao como um antioxidante em membranas, o a-tocoferol (TOH) consumido e convertido na forma de radical a-tocoferil (TO).
Reciclagem feita in vivo pelo ascorbato (AscH). Um sinergismo entre vitamina E e vitamina C, mostra que esta ltima pode reduzir o radical a-tocoferil de volta a atocoferol.

AscH

TO

Asc +

TOH

O radical ascorbil (Asc) pode ser removido por dismutao, produzindo ascorbato e desidroascorbato. Ambos podem ser reduzidos por um sistema de enzimas que usam NADH ou NADPH com fonte redutora, e assim, o ascorbato reciclado

b-CAROTENO
Os carotenides, como o b-caroteno, apresentam propriedades antioxidantes de lipdios.
pouca informao est disponvel sobre o mecanismo dessa atividade antioxidante.

Existe a hiptese de que o b-caroteno no atue como um antioxidante, como o ascorbato e a-tocoferol, mas que de alguma forma, atue no processo de peroxidao lipdica, sinergicamente com atocoferol, com efeito antioxidante em membranas biolgicas impedindo a reao em cadeia.

RADICAIS LIVRES: EFEITOS BENFICOS

Os radicais livres so usados em nosso organismo como sistema de defesa contra organismos invasores
Leuccitos (neutrfilos e moncitos) so armados com mecanismos dependentes e independentes de oxignio para matar microorganismos.

H dois mecanismos dependentes de oxignio: o sistema da mieloperoxidase e o sistema gerador de radicais de oxignio livres.
Aps a fagocitose do microorganismo, a NADPH Oxidase (localizada na membrana do leuccito) converte O2 em superxido O2.. A seguir, a superxido dismutase (SOD) converte o O2. em H2O2.

Perxido de Hidrognio pode matar bactrias diretamente ou ser convertido em ons Hidroxila (OH-) ou hipoclorito (HClO, tambm chamado cido hipocloroso, principal componente de desinfetantes industrialmente produzidos). A mieloperoxidase, presente no lisossoma (ento, tambm no fagolisossoma), catalisa a converso de H2O2 em HOCl. Os trs radicais so bactericidas potentes.

DOENAS COM ENVOLVIMENTO DE RADICAIS LIVRES

Aterosclerose Cncer Diabetes mellitus Doenas respiratrias Doenas do sistema nervoso central

Doenas de Parkinson, Alzheimer e Huntington esto associadas com leses oxidativas na mitocndria.

Danos dos cromossomos pelas EROs.

HO. HO.

HO.

HO.

Peroxidao lipdica
Reao em cadeia entre EROs e os cidos graxos polinsaaturados dos fosfolipdios de membrana

Influncia de EROs na formao da aterosclerose

Glicose

Hexoquinase

Glicose-6-P-Desidrogenase

Glicose 6-P NADP

6-P-Glucolactona Deficincia de NADPH diminui GSH

NADPH Aldose redutase ( KM )

NADP

Sorbitol
NAD NADH
Poliol desidrogenase

Frutose

Diabetes: Hiperglicemia: sorbitol, osmolaridade no cristalino = CATARATA