ESTERILIZACIN DE MEDIOS

LQUIDOS
Cintica de muerte de los microorganismos

La cintica de inactivacin de los m.o es una cintica de primer orden
respecta al nmero de m.o.
Se expresa como:
dN/dt = - k
d
N (1)

Donde:
N: Nmero de m.o en el tiempo t
k
d
: Constante de decaimiento o muerte,
es funcin de la temperatura, concentracin de agentes nocivos (cloro,
ozono)
Su dependencia con la
temperatura es del tipo Arrhenius:.

Cintica de Inactivacin
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1 3 5 7 9 11 13
Tiempo
N
u
m
e
r
o

m
.
o
.
) (
RT
E
o d
d
e k k
A

=
Si se integra la expresin (1) se tiene:



) exp( ln dt k N N dt k
N
N
t
o
d o d
o
= =
|
|
.
|

\
|
} }
Si se trabaja a temperatura constante se tiene:

donde N
o
es el nmero de m.o iniciales en el sistema.
) exp( t k N N
d o
=
Parmetros de las cinticas de desactivacin de diferentes m.o.

Microorganismo T
C
Constante
decaimiento
k
d
sec
-1

Energa de
activacin
AE
d
kcal/mol
Esporas de B.subtilis 121 0.0051 74
B.stearothermophilus 104
131
0.57
250
68.7
C.Botulinum 104 7 82.1
E.coli 127
Esporas en general 121 0.0167
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1 21 41 61 81 101 121
Tiempo
N
u
m
e
r
o

m
.
o
.
Esporas Bacillus Bacillus Esporas
Ef ecto de la Temperatura T3>T2 > T1
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
1 3 5 7 9 11 13
Tiempo
N
u
m
e
r
o

m
.
o
.
T1 T2 T3
Comparacin de Cinticas de
decaimiento a diferentes temperaturas
Comparacin de cinticas de
decaimiento de diferentes m.o
Ms resistentes
Diseo de procesos de esterilizacin
Se define el factor DEL, V, como:
V
Total
= Ln (N
o
/ N
t
)

Donde N
o
nmero de microorganismos iniciales
N
t
nmero de microorganismos finales.

Considerando la ecuacin




Se tiene que

dt k
N
N
T
To
d
o
t
=
|
|
.
|

\
|
}
ln
dt k
N
N
T
To
d
t
o
Total
=
|
|
.
|

\
|
= V
}
ln
Los criterios de diseo son:
1. Si no se conoce k
d
, destruir las esporas.
2. Imposibilidad de esterilidad absoluta, se espera que sobreviva
a lo ms 10
-3
esporas, ie,
1 de 1000 fermentaciones se contamine (Nt = 10
-3

esporas). Puede usarse otro criterio.
3. Si la esterilidad inicial es desconocida, se asume una
concentracin, [N
o
], del orden de 10
3
esporas/ml (10
9

esporas/m
3
)
Procesos de esterilizacin
El proceso de esterilizacin comprende tres etapas:

a) Etapa de calentamiento
b) Etapa de mantencin
c) Etapa de enfriamiento

Por lo tanto el factor DEL puede
dividirse en estas tres etapas:



to enfriamien mantencin nto calentamie Total
V + V + V = V
Puede ser llevado a cabo en:
Forma Batch
Continua
V
TOTAL

k
d
Esterilizacin Batch
Las etapas de calentamiento y/o enfriamiento pueden ser:
Para Calentamiento
a) Vapor Directo (Modelo hiperblico)
b) Resistencia Elctrica (Modelo Lineal)
c) Camisa de calefaccin con fuente isotrmico (Modelo Exponencial)
Vapor
Camisa de Vapor
Resistencia
Elctrica
Esterilizacin Batch

Para Enfriamiento
d) Camisa de enfriamiento alimentada con fuente no-isotrmica y
recirculacin.
Camisa de
Enfriamiento
Los factores DEL


Calentamiento o enfriamiento


donde la temperatura es una funcin del tiempo, ie. T = f(t)
Dependen del tipo de calentamiento o enfriamiento utilizado.

Mantencin
V
mantencin
= k
d

mantencin
* At

dt
RT
E
k
d
T
To
do to enfriamien nto calentamie
|
.
|

\
|
A
= V
}
exp
/
Perfiles de temperatura
Calentamiento
a) Con vapor directo (Modelo hiperblico)

T = T
o
+ (H * m
s
* t)/ (c* (M+m
s
*t)


T
o
: temperatura absoluta inicial del medio [K]
c: calor especfico del medio [J/Kg K]
H: Entalpa del vapor relativa a la temperatura del medio
H =H
Presin saturacin
H
Tmedio
[J/Kg]
m
s
: Flujo msico de vapor [kg/s]
M: Masa inicial de medio a esterilizar [kg]
m
s

M
Perfiles de temperatura
Calentamiento
b) Con flujo de calor constante, resistencia elctrica (Modelo Lineal)
T = To + q* t/(c* M)

T
o
: temperatura absoluta inicial del medio [K]
q: velocidad de transferencia de calor [J/s]
c: calor especfico del medio [J/Kg K]
M: Masa inicial de medio a esterilizar [kg]
Perfiles de temperatura
Calentamiento
c) Camisa de calefaccin con fuente isotrmico (Modelo exponencial)
T = T
H
+ ( T
o
T
H
)* e
(-U*A*t/c*M)

T
H:
Temperatura absoluta de la fuente de calor [K]
T
o
: temperatura absoluta inicial del medio [K]
c: calor especfico del medio [J/Kg K]
M: Masa inicial de medio a esterilizar [kg]
U: Coeficiente de transferencia global [J/s m
2
K]
A: Area de transferencia [m
2
]
Perfiles de temperatura

Enfriamiento
d) Camisa con fuente no isotrmica y recirculacin (Modelo exponencial)
T = T
co
+ ( T
o
T
co
)* exp [(1- e
(-U*A/c*mc)
) m
c
*t /M]

T
CO
: Temperatura absoluta de la fuente enfriadora
T
o
: temperatura absoluta inicial del medio [K]
m
c
: Flujo msico del refrigerante [kg/s]
c: calor especfico del medio [J/Kg K]
M: Masa inicial de medio a esterilizar [kg]
U: Coeficiente de transferencia global [J/s m
2
K]
A: Area de transferencia [m
2
]




T
e
m
p
e
r
a
t
u
r
a

Perfiles Temperatura v/s Tiempo para diferentes
tipos de calentamiento y enfriamiento
Algoritmo para el diseo del proceso de esterilizacin batch.
El objetivo es determinar el tiempo que debe durar la etapa de
mantencin, dado el tiempo de las etapas de calentamiento y
enfriamiento dependen del proceso de transferencia utilizado.

a) Calcular V
Total
= ln (N
o
/N
t
)
b) Determinar perfiles de T v/s tiempo de duracin de las etapas
c) Graficar k
d
v/s t, dependiendo del proceso de calentamiento y
enfriamiento.
d) Integrar el rea de k
d
v/s tiempo para las etapas de calentamiento y
enfriamiento. Integracin grfica, algebraica o numrica.
mantencin d
to enfriamien nto calentamie total
mantencin d
mantencin
mantencin
k k
t

V + V V
=
V
=
) (
Ejemplo
Un fermentador contiene 40 m
3
(25C). Dicho fermentador ser
esterilizado por inyeccin directa de vapor saturado.
El medio contiene 5 *10
12
[bacterias/m
3
] y necesita ser reducido a los
niveles estndar (1* 10
-3
bacterias )
El vapor (345 KPa) puede ser inyectado a un flujo de 5000 [kg/hr] y se
detendr cuando el sistema alcance 122C.
Durante la mantencin la prdida de calor ser despreciable.
Una vez producida la esterilizacin se pasarn 100 [m
3
/hr] a 20C de agua
para enfriar hasta 30C. El serpentn tiene un rea de 40[m
2
] y un
coeficiente de transferencia de calor para el enfriamiento de 2500 [kJ/hr
m
2
K]
La resistencia de las esporas se puede caracterizar por :
k
d
= 5.7 10
39
e
( -2.834 105/ RT)

[hr
-1
]
La capacidad calrica del medio y la densidad son : 4.187kJ/kg K y
1000 kg/m
3

La entalpa del vapor saturado a 345K , H
Presin saturacin
= 2731 KJ/Kg
La entalpa a 25C, H
temp medio
= 105 KJ/Kg

Estime el tiempo necesario para realizar una esterilizacin adecuada.
Calculo de V
Total

V
total
= ln (No/N) =
] [ 8 . 39
10 * 1
] [ 40 * ] [ 10 * 5
ln
3
3 3 12
=
(

m m
Perfiles de calentamiento y Enfriamiento
T
Calentamiento
= 298+ 78.4* t /(1+.0125*t)
Si T
final
= 122C = 395K t = 1.46 [h]
V
calentamiento
= 14.8 [-]



T
Enfriamiento
= 39.8 - 102* e
(-0.674*t)
-Si T
final
= 30C = 303 K t = 3.45 [h]
V
enfriamiento
= 13.9 [-]


mantencin d
to enfriamien nto calentamie total
mantencin d
mantencin
mantencin
k k
t

V + V V
=
V
=
) (
[min] 37 . 3 ] [ 056 . 0
6 . 197
9 . 13 8 . 14 8 . 39
= =

= hr t
mantencin
Diseo de sistemas de esterilizacin continua

Los equipos de esterilizacin continua pueden ser de dos tipos:
Inyeccin directa de vapor.
Resultan ser ms eficientes dado que no hay barreras entre el medio y el vapor.
Ventajas
Son ms baratos que los sistema que incluyen intercambiadores de calor
Desventajas
Dilucin del medio por la condensacin del vapor
La produccin de espuma por la inyeccin de calor puede producir problemas en el
evaporador flash.
Diseo de sistemas de esterilizacin continua


Intercambiadores de calor.
Placa
Los que deben trabajar a bajas presiones, pero presentan una mayor rea de
transferencia de calor









Tubo y carcaza
Se recomiendan cuando se utilizan lquidos viscosos

Desventaja
Ensuciamiento en
paredes internas
produce disminucin
de la eficiencia
Ventajas que presenta la forma de operacin continua v/s la batch

1. Presentan mayor reproducibilidad
2. Operan en forma ms rpida
3. Pueden operar a temperaturas ms altas
4. Son fciles de automatizar
5. Se puede recuperar el calor
Diseo para sistemas de esterilizacin continua

Resultan ser anloga a la forma batch salvo que se debe disear el largo de la
zona de esterilizacin, L en vez del tiempo de esterilizacin.

El tiempo de retencin de una partcula en el esterilizador, t
mantencin
, se puede
determinar considerando el largo del esterilizador, L y la velocidad promedio a
la que se mueven las partculas, .
Asi:
t
mantencin
= L/

L
El algoritmo de resolucin debe considerar que en este tipo de proceso de
esterilizacin los tiempos de calentamiento y enfriamiento son despreciables
(V
calentamiento continuo
= V
enfriamiento continuo
= 0)

por lo cual se cumple que:
V
mantencin continuo =
ln (N
o
/N
t
) = k
do
e
(-AEd/RT)
*t
mantencin


El tiempo de mantencin es:

t
mantencin =
ln (N
o
/N
t
)/( k
do
e
(-AEd/RT)
)

El largo del esterilizador se puede calcular por:

L = t
mantencin
*
Ejemplo

Se requiere disear el sistema de esterilizacin para esterilizar un
flujo de 2 m
3
/hr. La esterilizacin del medio debe realizarse en
forma continua durante 5 semanas. Los niveles de esterilidad
deben ser tales que la probabilidad de contaminacin sea de 1 en
100.
Se utilizar un esterilizador continuo tubular de 10 cm de
dimetro para calentar el medio a 125C. Calcule el largo
requerido del esterilizador.
Nota:
La cintica de muerte est dado por la expresin:
k
d
= 5.7 10
39
exp ( -2.834 10
5
/ RT) [hr
-1
]
La constante ideal de los gases R, es igual a 8.31 [J/K mol]
La densidad y viscosidad del medio son: 1000 [kg/m
3
] y 3.6 [kg/m h] respectivamente
El diseo debe considerar el total de m.o que pudieran ingresar al fermentador, durante
todo el tiempo de la fermentacin.

Efecto de dispersin

Existe una desviacin del frente de avance del fluido por efectos de la
viscosidad, las turbulencias y la friccin con las paredes de la tubera. Esto
provoca que se genere un frente de velocidades en el interior de la tubera,
lo que conlleva a una esterilizacin desigual llegando a casos extremos
en que haya una parte del fluido que no se esterilice.
u
m
Velocidad mxima

u
m
>
Si se considera un modelo dispersin, en la direccin x, para evaluar esta
situacin se tiene :


(A)






Donde D: Coeficiente de difusividad
: Velocidad promedio del fluido
Muerte Conveccin Difusin

) u d(
-
) (
O N k
dx
N
dx
D d
d
dx
dN
=

Si se adimensionalizan las variables de la ecuacin anterior:

N = N/No x`= x/L
= F/A = Flujo volumtrico / rea Transversal

Si se definen los nmeros adimensionales

Nmero de Pecler
Pe = * L /D
Z
= Transferencia de masa convectiva
Transferencia de masa difusiva
donde

L: Largo del esterilizador
D
z
: Difusividad en el sistema, se puede utilizar correlaciones o con la
siguiente grfica en funcin del Nmero de Reynold Modificado,

N
Re Modificado
=

d
t
* */


Correlacin para estimar la Difusividad de un sistema, en funcin del
Nmero de Reynold Modificado
N
Re
Modificado
=

d
t
* */
D
z
/(d
t
*)

d
t
: Diametro de la tubera

Nmero de Dahmkoler

Da = k
d
*L/

= Velocidad de reaccin (muerte)
Transferencia de Masa

Sustituyendo en la ecuacin (A) y resolviendo se llega a:


(B)


Donde




) 5 . 0 exp( ) 1 ( ) 2 exp( ) (1
) 2 exp( 4

) (
2 2
Pe Pe
Pe
N
L N
o
+

=


Pe
Da
+ =
4
1
Grficamente la ecuacin (B)
queda de la forma:
Figura B

) (
o
N
L N
Da = k
d
*L/
Pe = * L /D
Z
Algoritmo para determinar el largo, L, de un sistema de esterilizacin
continuo

1.- Calcular el Nmero de Reynold Modificado (N
Re Modificado
)

N
Re Modificado =
d
t
* */

donde d
t:
Dimetro de la tubera
, y : Densidad, viscosidad y velocidad media del fluido

2.- Es base al Nmero de Reynold Modificado determinar la difusividad (Dz) en
el sistema (usar correlaciones o Figura A)

3.-Asumir un largo, L, de esterilizacin y calcular el Nmero de Pecler y
Nmero de Dahmkoler

4.- En base a la figura B determinar N/No. Grafica de la ecuacin (B)

5.- Si cumple con el nivel deseado OK, sino volver al paso 3.

Ejemplo

Se desea esterilizar un medio de cultivo con un caudal de 2 m
3
/hr
mediante intercambio de calor con vapor en un esterilizador
continuo. El lquido contiene esporas bacterianas con una
concentracin de 5*10
12
[bact/m
3
]. La energa de activacin y
constante de Arrhenius para la destruccin trmica de estos
contaminantes son 283 [kJ/mol] y 5.7*10
39
[hr
-1
],
respectivamente. Se considera aceptable un riesgo de
contaminacin de un organismo sobreviva en cada 60 das de
operacin. La tubera del esterilizador tiene un dimetro de 0.1 m
y la longitud de la seccin isoterma es de 24 metros. La densidad
y viscosidad del medio son: 1000 [kg/m
3
] y 3.6 [kg/m h]
respectivamente.

Qu temperatura se necesita en el esterilizador?
Nota: Considere los efectos de dispersin axial.