Metabolismo Microbiano

1. Reações catabólicas e anabólicas. Enzimas

(componentes da enzimas e mecanismos de atividade
enzimática)
2. Produção de Energia. Vias metabólicas de Produção
de Energia. Catabolismo de carboidratos (Glicólise, Via
Pentose fosfato, Via Entner-Doudoroff)
• Respiração Celular (aeróbica e anaeróbica).
Fermentação. Catabolismo de lipídeos e
proteínas.Testes Bioquímicos e Identificação
bacteriana.
• Fotossíntese. Fotofosforilação. Reações
independentes da luz: Ciclo de Calvin-Benson.
Resumo dos mecanismos de produção de Energia.
Diversidade metabólica entre os organismos.
• Vias metabólicas de uso de energia. Biossíntese de
polissacarídeos. Biossíntese de lipídeos. Biossíntese
de aminoácidos e proteínas. Biossíntese de purinas e
pirimidinas. Integração do metabolismo.
 Classificação dos
microrganismos de acordo à
Respiração.
•Aeróbios Restritos: Vivem só em presença
de oxigênio.
•Anaeróbios Facultativos: Podem gerar ATP
através da respiração e também da
fermentação utilizando íon nitrato como
aceptor de elétrons.
•Anaeróbios Restritos: Bactérias que
utilizam sulfatos e carbonatos como aceptores
de elétrons e não podem utilizar a respiração
aeróbica como alternativa.
 Respiração Anaeróbica
• Respiração anaeróbia: Um restrito grupo de bactérias utilizam compostos
inorgânicos como aceptor final de elétrons

• O aceptor final de elétrons é uma substância inorgânica diferente de

oxigênio. Geralmente substâncias oxidadas: NITRATOS, SULFATOS E
CARBONATOS.

• Bactérias tais como: Pseudomonas e Bacillus podem utilizar o íon nitrato

(NO-3) como aceptor final de elétrons. O íon nitrato é reduzido a íon nitrito
(NO2-), oxido nitroso (N2O) ou gás nitrogênio (N2).

• Desulfovibrio e Desulfotomaculum: utilizam sulfatos (SO42-) como aceptor

final de elétrons para formar sulfeto de hidrogênio (H2S).

• Bactérias metanogênicas: utilizam carbonato (CO32-) para formar metano

(CH4).

• Rendimento: mais baixo que a respiração aeróbica, somente uma parte do

TCA funciona sob condições anaeróbias e nem todos os transportadores
participam da cadeia.
 Compostos oxidados do Enxofre
como aceptores de elétrons
• Dois tipos de Redução de sulfatos: catabólica ou
desassimiladora e a assimiladora
• Redução do sulfato ligada a síntese (assimiladora):
Plantas verdes, microrganismos eucarióticos e
procarióticos apresentam redução do sulfato ligado à
síntese de aminoácidos enxofrados.
• A redução desassimiladora do sulfato forma H2S e o
libera ao meio.
• Organismos: Anaeróbios restritos.
• Gêneros: Desulfovibrio e Desulfotomaculum (vivem em
solos e matéria orgânica em decomposição).
 Nitrato como aceptor final de
elétrons
• Dois tipos de redução: Assimiladora e Desassimiladora,

Assimiladora: O íon nitrato (NO-3) é reduzido a íon nitrito (NO2-) e depois se

reduze a NH3 que logo é incorporado ao material celular (plantas e
bactérias).
Em enterobactérias: a redução de (NO-3) pode chegar até NH4+ como um
processo respiratório acumulando-se amoníaco (Redução
desassimiladora)
Desnitrificação: Processo de respiração anaeróbia que converte (NO-3) em
N2,,,( N2O) ou uma mescla dos dois.
Redução de Nitratos: Redução incompleta de (NO-3) até (NO2-) que se
acumula no meio. Este é um processo respiratório facultativo. O Oxigênio
reprime a síntese das enzimas nitrato e nitrito redutase, uma vez a enzima
presente o (NO-3) compite com O2.
*Os dois últimos processos podem ser independentes da assimilação.
Grupo microbiano: Enterobactérias (respiração, fermentação e resp.
anaeróbica).
 O que é fermentação?
• 1. Qualquer processo que produza laticínios ou bebidas
acídicos (uso geral)
• 2. Qualquer processo microbiológico em grande escala
ocorrendo com o sem ar (comum na indústria).
• 3. Qualquer processo metabólico que libere energia que
ocorra somente sob condições anaeróbicas (Def. mais
científica)
• *4. Qualquer processo metabolico que libere energia de
um açúcar ou outra molécula orgânica, não requer
oxigênio ou um sistema transportador de elétrons e usa
uma molécula orgânica como aceptor final de elétrons.
(Definição que adotaremos)*
 Fermentação
• Louis Pasteur: reconheceu a função
fisiológica da fermentação explicando o
fenômeno como “a conseqüência da vida
sem ar”.
• Na transformação redox do substrato não
participa o oxigênio=Processo anaeróbio.
Exceto as bactérias ácido-lácticas que
podem manter a fermentação em
presença de O2.
 Características da Fermentação
• Tanto doadores como aceptores de elétrons
são moléculas orgânicas. Em ocasiões a
mesma molécula se oxida e se reduze.
• O processo ocorre em Ausência de O2.
• Existe um balanço rigoroso de C, O, H entre
substratos e produtos.
• Pode utilizar tanto hexoses (via Glicólise, via
Entner-Doudoroff) como pentoses (via das
pentoses) como substrato.
 Fermentação
• Os compostos que se oxidam e reduzem no processo são
geralmente derivados de açúcares (Carboidratos são os
substratos principais).
• *No processo se estabelece um estrito balanço redox.
• *Gera-se ATP através da fosforilação a nível de substrato.
• *O ácido pirúvico (via Glicólise, via Entner-Doudoroff) converte-se
é um o mais produtos orgânicos diferentes, dependendo do tipo
de célula. Esses produtos podem ser, ácido lático, etanol, ácido
acético etc.
• Não há ciclo de krebs nem cadeia de transporte de életrons.
• Utiliza moléculas orgânicas como aceptor de elétrons.
• *O rendimento de ATP é muito baixo, somente uma ou duas
moléculas de ATP para cada molécula de material inicial (Grande
parte da energia permanece nas reações químicas dos produtos
finais tais como ác. Lático e etanol)
 Principais vias metabólicas utilizadas
pelos microorganismos fermentativos
1. Glicólisis ou frutose –difosfato (FD) ou
Embdem-Meyerhoff (EM).
2. Via das Pentosas-Fosfato.
3. Via Entner-Doudoroff (restringida a
procarióntes)
 Fermentação:
• Através da Glicólise: fosforilação em nível de
substrato (2 ATP/ molécula de Glicose).
• Através da via das Pentoses: Ocorre o
processo oxidativo a partir da Glicose até a
formação de Ribulose-5-fosfato. Esta via é
cíclica por natureza e acontecem
descarboxilação, epimerização e
deshidrogenação.
Esta via subministra para os processos
biossintéticos: pentosa-fosfato, eritrosa-fosfato,
3-fosfogliceraldeído e NADPH+ + H+.
.
 Fermentação:
• Através da Via Entner-Doudoroff:
- É típica e exclusiva de alguns procarióntes
- De natureza simples: deshidrogenação, deshidratação e
a conversão de Glicose em ácido pirúvico e 3-
fosfogliceraldeído (que é convertido a ácido pirúvico vía
frutosa difosfato).
- Por cada mole de Glicose se produze 1mole de ATP e 2
moles de NADH+ + H+.
- Seu significado básico provém da obtenção de ácido
glucónico por alguns microorganismos: E. coli e
Clostridium obtém os ácidos glucónicos do metabolismo
intermediário por esta via a partir de glicose
 Via Entner-Doudoroff
• A partir de cada molécula de glicose está via
produz duas moléculas de NADPH e uma
molécula de ATP para utilizar nas reações
biossintéticas celulares.
• As bactérias que possuem as enzimas para
está via podem metabolizar a Glicose sem a
Glicólise ou a vía das pentosas fosfato.
• Esta via é encontrada em algumas outras
bactérias Gram – incluindo: Rhizobium,
Pseudomonas e Agrobacterium.
 Tipos de Fermentação
• Segundo os produtos segregados que predominem
quantitativamente se diferenciam em:
• Alcoolica (produção de etanol).
• Lática (homolática: ác. Lático e heterolática: ác.
Lático+etanol+CO2;
• Propiónica (ácido propiónico)
• Fórmica (mixtura de ácidos)
• Butírica (ácido butírico, butanol, acetona, isopropanol
e outros ác. Orgânicos)
• Acética (ácido acético)
• Com produção de metano.
 Fermentação Microorganis Via Produto Uso
mo metabólica Principal Comercial
Alcoólica Saccharomyce Glicólise, Etanol+CO2 Bebidas
s cerevisiae; Glicólise,
Sarcina Entner-
ventriculi; Doudoroff
Zymomonas
mobilis
Lática lactobacillacea Glicólise, Ácido lático, Iogurte;
s Via Pentose- Ácido Kefir,
fosfatos lático+etanol+ conservas
CO2
Resumo das Propiónica Propionibactér Glicólise Ácido
características ias propiónico

principais das Fórmica Enterobactéria

s
Glicólise Ácido acético,
fórmico,
Produtos
industriais
fermentações (Photobacteri
um)
málico,
Lático, etanol,
típicas glicerina, CO2
e H2.
]
Butírica- Clostridios Glicólise Ácido Produtos
butanólica butírico, industrias
butanol,
acetona,
isopropanol
Acética Clostridios Glicólise Ácido acético Produtos
industriais
 Fermentação Lática
• Uma molécula de Glicose é oxidada em duas moléculas
de ácido pirúvico gerando-se 2 moléculas de ATP.
• As moléculas de ác. pirúvico são reduzidas por duas
moléculas NADH para formar duas moléculas ácido
lático.
• O ácido lático é o produto final: não sofre mais oxidação
e armazena a energia produzida pela reação
• Rendimento de energia baixo.
• Microorganismos homoláticos ou homofermentativos:
Streptococcus e Bacillus,
• Produtos: iogurte, leite, repolho azedo e conservas de
pepino.
 Fermentação alcoólica
• Através da Glicólise uma molécula de Glicose produze
duas moléculas de ácido pirúvico e duas de ATP.
• As duas moléculas de ác. Pirúvico são convertidas em
duas de acetaldeído e duas moléculas de CO2.
• As duas moléculas de acetaldeído são reduzidas por 2
NADH para formar duas moléculas de etanol.

• Microorganismos heteroláticos ou heterofermentativos:

Saccharomyces (produze alcool e CO2 como resíduos).
Podem utilizar a via Pentose-fosfato.
 Testes Bioquímicos e Identificação
Bacteriana
• Identificar microorganismos pelos tipos de enzimas que produzem:
Tipos de testes:
1.Detecção de enzimas que catabolisam aminoácidos (formação de Indol a
partir do triptofano-enzima: triptofanase)
2.Teste de oxidação aeróbia ou fermentação de açúcares (produção de ácidos)
3.Hidrólise do amido (amilases),
4.liquefação da gelatina (enzimas proteolíticas),
5. Efeito sobre o leite: Proteolisis da caseína e utilização de latose.
6.Formação de amoníaco a partir de aminoácidos
7. Formação de H2S a partir de aminoácidos que contem enxofre (cisteína,
metionina),
8. Redução de nitratos (enzima nitrato redutase)
9. Crescimento em meio sem nitrogênio (crecem só microorganismos que
fixam o nitrogênio molecular)
10. Relação com o Oxigênio:
 Catabolismo de Lipídeos
• Os microorganismos também oxidam lipídeos e
proteínas:
Lipídeos:Gorduras constituídas de ácidos graxos e
glicerol.
Lipases: Enzimas produzidas pelos microorganismos que
quebram os lipídeos em seus componentes, sendo cada
componente metabolizado separadamente.
Glicerol: é convertido em diidroxiacetona fosfato e
catabolisado via Glicólise e Ciclo de Krebs.
Ácidos graxos: β-Oxidação: degradação dos ácidos
graxos em que fragmentos de carbono são liberados de
dois em dois para formar Acetil-CoA que é catabolisado
via Ciclo de Krebs
 Catabolismo de Proteínas
• As proteínas são muito grandes para atravessar
a membrana.
• Os microrganismos produzem peptidases
extracelulares=aminoácidos.
• Para os aminoácidos serem catabolisados
precisam ser convertidos a outras substâncias
para entrarem no ciclo de Krebs através de
reações de: desaminação, descarboxilação e
desidrogenação.
Desaminação: o grupo amino é removido e
convertido em íon amônia e o ácido orgânico
restante entra no ciclo de Krebs