Biotecnologia:

A aplicao industrial da Microbiologia

1. Introduo

Biotecnologia: uso industrial de microrganismos

Biotecnologia
Conjunto de tcnicas que: Permite Indstria Farmacutica cultivar microrganismos para produzir os antibiticos que sero comprados na Farmcia. Permite cultivar clulas de pimenta longa em biorreator para produo de safrol, um importante leo essencial. Permite o tratamento de despejos sanitrios pela ao de microrganismos em fossas spticas.

Abrange diferentes reas do conhecimento:

- Cincias bsicas (Biologia Molecular, Microbiologia, Biologia celular, Gentica,
Genmica, Embriologia etc.),

- Cincias aplicadas (Tcnicas imunolgicas, qumicas e bioqumicas) e outras tecnologias (Informtica, Robtica e Controle de processos).

A Biotecnologia transforma nosso dia a dia

O seu impacto atinge vrios setores produtivos, gerando novas oportunidades de emprego:

plantas resistentes a doenas, plsticos biodegradveis, detergentes mais eficientes, biocombustveis, processos industriais e agrcolas menos poluentes, mtodos de biorremediao do meio ambiente, testes diagnsticos e novos medicamentos.

Setores

Bens e servios adubo composto, pesticidas, silagem, mudas de plantas ou de rvores, plantas transgnicas, etc pes, queijos, picles, cerveja, vinho, protena unicelular, aditivos, etc. butanol, acetona, glicerol, cidos, enzimas, metais, etc biosensores etanol, biogs recuperao de petrleo, tratamento do lixo, purificao da gua embries antibiticos, hormnios e outros produtos farmacuticos, vacinas, reagentes e testes para diagnstico, etc.

Produtos de origem biotecnolgica

Agricultura Alimentao Qumica Eletrnica Energia Meio Ambiente Pecuria Sade

2. Processos biotecnolgicos

Existem 5 grandes grupos de interesse comercial:

1. 2. 3. 4. 5.

Produo de biomassa microbiana Produo de enzimas microbianas Produo de metablitos Produo de produtos recombinantes Modificao de compostos

1. Biomassa microbiana
Divide-se em vrios processos:
Produo de leveduras para panificao. Foi utilizada como alimento na Alemanha durante a I Guerra Mundial. Leveduras para a fabricao de etanol. Bactrias para tratamento biolgico de efluentes. Na alimentao do homem e de animais (SCP single cell protein) - concentrados protico-vitamnicos: algas e leveduras; Como fixadores do nitrognio do ar na agricultura (Rizbios). No controle biolgico de pragas (Bacillus).

Na produo de vacinas (Corynebacterium, Bordetella, Neisseria, Mycobaterium).

2. Enzimas microbianas

Enzimas so obtidas a partir de plantas, animais e microrganismos. As enzimas microbianas tem grandes vantagens: possvel produzir em grandes quantidades via processos biotecnolgicos; infinitamente mais fcil melhorar a produtividade de um sistema microbiano comparado com plantas e animais; Sua produo controlada para o aumento da produtividade (indutores no meio, aumento dos genes de expresso, ...).

3. Metablitos microbianos

Durante a fase exponencial de crescimento os microrganismos produzem substncias essenciais ao crescimento: Aminocidos Nucleotdeos Protenas cidos nuclicos Lipdeos Carboidratos, etc.

- So referidos como produtos do metabolismo primrio. - Normalmente sintetizam quantidades suficiente para suas necessidades mnimas.

- Produtos do metabolismo secundrio

Durante a fase estacionria muitos microrganismos (comum nos fungos, nas bactrias esporulantes e nas filamentosas) sintetizam produtos que no so sintetizados na fase de crescimento. - Pode no ter funo bvia para o metabolismo da clula.

As rotas primrias so comuns na maioria dos microrganismos, mas cada produto secundrio sintetizado por poucos microrganismos diferentes.

Metablitos secundrios
Atividade antimicrobiana Inibidores especficos de enzimas Promotores do crescimento Propriedades farmacolgicas

Formam a base de um grande nmero de processos biotecnolgicos. Os microrganismos produzem baixas concentraes, da ...

4. Produo de recombinantes
Substncias produzidas por animais e plantas sintetizadas por microrganismos.

Tecnologia do DNA recombinante: clonagem molecular

Exemplos:

- Hormnio GH (US$ 20 milhes/Kg)

- Hormnio Insulina (A Biobrs possui uma das quatro patentes no mundo 1990)

5. Modificao de compostos

Processos microbianos so mais especficos que processos puramente qumicos. Permitem a adio, remoo ou modificao de grupos ou stios especficos em molculas complexas.

Reaes que podem ser biocatalizadas:

Desidrogenao Oxidao Hidrogenao Desidratao e condensao Descarboxilao Aminao Desaminao Isomerao

Etapas que compem um processo biotecnolgico

Independente do tipo, um processo pode ser dividido em seis etapas bsicas:
1. Formulao do meio de cultura 2. Esterilizao do meio, equipamentos e acessrios 3. Produo do inculo em quantidade suficiente para inocular o volume de processo 4. Crescimento do microrganismo no biorreator em condies timas para formao do produto 5. Extrao do produto e sua purificao 6. O tratamento/eliminao dos efluentes gerados pelo processo.

Principais etapas de um processo biotecnolgico:

A maioria dos biorreatores em uso so de tanque agitado (STR)

Um biorreator pode ter inmeras concepes

3. Produtos da degradao microbiana

lcool e Vinagre (vin aigre)
* fermentao do acar
anaerobiose

lcool

vinagre
aerobiose

Principais microrganismos: Acetobacter spp.

cido ltico
* derivado de mltiplos usos:
lactato de sdio: deficincia de clcio lactato de ferro: tratamento da anemia * matria prima: amido, melao, soro de leite * Etapas: hidrlise do amido a glicose (cidos ou enzimas) C12H22O11 + H2O 2C6H12O6 fermentao da glicose 2C6H12O6 4CH3CHOHCOOH * Microrganismo: Lactobacillus bulgaricus

* Resduo de biomassa: alimentao animal

Outros produtos da degradao (desassimilao) microbiana:

Produto Produto B A C T R I A S Acetona e butanol 2,3-Butanediol cido 2-cetoglucnico

Microrganismo Microrganismo C. acetobutylicum e outros clostrdios Bacillus polymyxa; Enterob. aerogenes Pseudomonas spp.

Uso Uso Solventes, fabricao de produtos qumicos Solvente, hidratatante intermedirio qumico Intermedirio na fabricao de cido isoascrbico (isovitamina C) Fabricao de cido ascrbico (vitamina C)

Sorbose

Gluconobacter oxydans

F U N G O S

cido ctrico cido glucnico cido itacnico cido fumrico

Aspergillus niger Aspergillus niger Aspergillus terreus Rhizopus nigricans

Alimentos e bebidas, cosmticos, couro Alimentos, clarificadores Fab. de resinas acrlicas Fab. de resinas e agentes umectantes

Produtos de sntese microbiana

Antibiticos
Penicilina
1928 (descoberta) a 1941 (industrializao): produtividade foi aumentada em 1000 x 1990 - 500 milhes de dlares somente nos EUA

Seleo de microrganismos

Produtos de sntese microbiana

Enzimas
* amilases: * invertase (sacarose): * proteases: * pectinases: adesivos, sucos cremes, xaropes couro, seda, detergentes sucos, linho

* condroitinase:

recuperao de injrias da coluna

Exemplos de enzimas e suas aplicaes

Enzima Produto
B a c t r i a s Estreptoquinase Glicose isomerase DNA polimerase (Taq)

Microrganismo Microrganismo
Streptococcus spp. Streptomyces spp.; Bacillus spp. Thermus aquaticus Escherichia coli (recombinante)

Aplicaes Uso
Tratamento de pacientes com ataques cardacos Produo de xaropes com alto teor de frutose PCR

Reaes
Dissolve fibrina no sangue Converte glicose em frutose Sntese de DNA

Lipase

Rhizopus spp.

F u n g o s

Celulases Glicose oxidase

Trichoderma reesii Aspergillus spp.; Penicillium spp.

Flavorizante de alimentos Hidrolisa lipdios a glicerol e aumenta poder clareador cidos graxos de detergentes Digestivo Hidrolisa celulose a celobiose Remove glicose de ovos Oxida glicose a cido glucnico p/ secagem, remove oxignio de alimentos enlatados, refrigerantes e cerveja; usada tambm para fabricao de papis teste para controle diabete

Enorme potencial de aplicao das Archaea: indstria do amido, papel e celulose.

Aminocidos
cido glutmico: condimento, flavorizante * glutamato monossdico * microrganismo: Corynebacterium glutamicum (mutante) Lisina: suplemento para a protena vegetal *Corynebacterium glutamicum (mutante com alta atividade de DAP descarboxilase) *Brevibacterium flavum

4. Produtos farmacuticos
Insulina humana:
1 biofrmaco produzido pela engenharia gentica
1982 - produo nos EUA pela empresa Lilly Microrganismo produtor: Escherichia coli com o gene humano para produo de insulina

Insulina
Protena produzida no pncreas Regulao do metabolismo de carboidratos Produo original Extrao a partir de animais: porcos, bois Eficincia de ao

Vacina contra hepatite B (HBV): 1982

- Vrus difcil de cultivar em laboratrio - Protena viral HBsAgs (antgeno) altamente imunognica - Altas doses: rpido e elevado nvel de imunidade Microrganismo: Saccharomyces cerevisiae com o gene para a protena

Hormnio do crescimento humano (GH):

1982 - Escherichia coli com o gene do hormnio de crescimento humano

Mecanismo para expulsar o hormnio

5. Biocontrole

Bacillus thuringiensis
cr

end

Cristais proticos contendo toxinas com propriedades inseticidas

Bacillus thuringiensis

6. Biominerao

* Reduo das reservas mundiais

* Explorao de minrios de baixa qualidade

* Poluio causada pelos mtodos tradicionais de extrao uso de microrganismos mineradores

Thiobacillus thioxidans e Thiobacillus ferroxidans

cidos oxidao do minrio precipitao

Thiobacillus ferrooxidans

A Companhia Vale do Rio Doce tem um projeto em Biominerao

7. Engenharia Gentica aplicada as plantas

A bactria Agrobaterium tumefaciens possui um plasmdeo com genes que mobilizam a transferncia de DNA para a planta.

Vetor (ferramenta) de clonagem em plantas

Obteno de planta transgnica com o gene da toxina de Bacillus thuringiensis

Perspectivas da biotecnologia
Vacinas de DNA: - baixa toxicidade - inocuidade - estabilidade Plantas transgnicas para produo de frmacos - interferon - anticorpos vegetais - vacinas comestveis