INTRODUO

Lipossomas so estruturas esfricas, em que uma fase aquosa totalmente cercada por uma ou mais bicamadas de fosfolipdeos em forma de vesculas, sendo amplamente utilizadas como modelo simplificado de membranas proporcionando a encapsulao de substncias ativas hidroflicas e lipoflicas. Servem como carreadores de frmacos,biomolculas ou agentes de diagnstico. (Gregoriads,1995; Lasic, 1989; Chorilli et al, 2004).

INTRODUO
LIPOSSOMAS: Pequenas vesculas esfricas formadas por bicamadas concntricas de fosfolipdios que se organizam espontaneamente em meio aquoso e podem englobar uma outra substncia, chamada de princpio ativo, que pode ou no ser instvel fora da vescula. Estes ativos, portanto, so levados at o seu stio de ao sem sofrer alteraes que danifiquem a sua funo no organismo. Esta tecnologia de liberao controlada chamada de Delivery System. Os lipossomas podem ter de 20nm a > de 1m de tamanho.

O Lipossoma contendo o ativo encapsulado absorvido

Por ser substantivo ao organismo o lipossoma biodegradado liberando o ativo intacto

Alm disso o lipossoma apresenta alta afinidade pelas membranas biolgicas e por si s independentemente do ativo tambm acentua a hidratao natural da pele e cabelo

 Os lipossomas foram descobertos em 1960 pelo cientista ingls Alec Bangham.

INTRODUO
LIPOSSOMA

Quem primeiro utilizou o termo lipossoma (corpo gorduroso), foi Weissman em 1965.
Allison e Gregoriadis demonstraram, em 1971, as propriedades imunoadjuvantes dos lipossomas. A partir da muitos estudos foram desenvolvidos, e a primeira vacina associada aos lipossomas, contra hepatite A, foi licenciada para uso em humanos em 1995

Dupla camada da membrana

Ncleo

cidos graxos

rea Lipoflica

rea Hidroflica

Fosfolipidio (molcula)

OBTENO
Os lipossomas podem ser preparados atravs de diversos processos: agitao, sonicao,extruso, liofilizao, congelamento e descongelamento, evaporao em fase reversa, entre outros.

Dependendo do modo de preparo, muitas formas vesiculares lipdicas podem ser obtidas,com dimetros variando entre 400 e 3500 nm.

Classificao
Os lipossomas podem ser classificados tanto com relao ao seu tamanho e nmero de lamelas quanto a sua interao com o meio biolgico. De acordo com os dimetros mdios em trs categorias: Vesculas Multilamelares (MLV Multilamelar Vesicles): Os lipossomas de preparao mais imediata so as vesculas multilamelares (MLV), constitudas por vrias bicamadas lipdicas. A partir destas, so obtidas as demais espcies. Formas lipossomais formadas por bicamadas fosfolipdicas concntricas intercaladas por compartimentos aquosos, cujo dimetro varia de 400 a 3500 nm. Vesculas unilamelares grandes (LUV Large Unilamelar vesicles): formas lipossomais constitudas por apenas uma bicamada fosfolipdica, mas com uma grande cavidade aquosa. Dimetro varia de 200 a 1000 nm. Vesculas unilamelares pequenas (SUV Small Unilamelar Vesicles): formas lipossomais constitudas por apenas uma bicamada fosfolipdica e um pequeno compartimento aquoso. Dimetro varia de 20 a 50 nm (Scarpa et al.,1998).

Classificao
De acordo com a carga, lipossomas podem ser classificados como catinicos (carga positiva), aninicos (carga negativa) e neutros (sem carga). Lipossomas catinicos so os mais frequentemente utilizados na terapia gnica humana, pois o DNA possui uma carga efetiva negativa.
Lipdeos apresentando carga efetiva negativa ou positiva tambm podem ser includos na bicamada fosfolipdica lipossomal. Isso pode influenciar a taxa de incorporao de substncias,impedir a agregao/fuso das vesculas lipdicas e modular seu destino no organismo.

A composio influencia a absoro e a carga que vai ter a lipossoma. Estas vesculas so constitudas basicamente por fosfolipdeos (podendo ser de natureza sinttica ou natural),esteris e um antioxidante Os lipdeos mais utilizados nas formulaes de lipossomas so as fosfatidilcolinas, fosfatidilserina, fosfatidilglicerol e esfingomielina, que tendem a formar uma bicamada estvel em soluo aquosa. As fosfatidilcolinas so as mais empregadas em estudos de formulao de lipossomas, pois apresentam grande estabilidade frente a variaes de pH ou da concentrao de sal no meio.

Classificao
Lipossomas convencionais; Lipossomas de longa circulao; Lipossomas polimrficos;
Lipossomas sensveis ao Ph, Lipossomas termo-sensveis, Lipossomas catinicos.

Lipossomas stio-especficos;
Imunolipossomas, Lipossomas como carreadores de protenas e peptdeos, Virossomas.

LONGA CIRCULAO:
A camada hidroflica superficial destes polmeros aumenta o tempo de circulao dos lipossomas prevenindo o reconhecimento e conseqente associao com as clulas do plasma, desse modo, inibindo o processo de reconhecimento molecular e a captura pelas clulas do sistema fagocitrio mononuclear, principalmente as clulas de Kupffer no fgado.

STIO-ESPECFICO:

Na tentativa de aumentar a especificidade de interao de lipossomas com clulas alvo e elevar a quantidade do frmaco liberado nestas clulas, a pesquisa neste campo foi focada no desenvolvimento de lipossomas direcionados ou stioespecficos. Estes utilizam ligantes acoplados em sua superfcie, que conferem seletividade para distribuir o frmaco encapsulado no stio de ao desejado.
A superfcie dos lipossomas pode ser modificada atravs da escolha de lipdeos que permitam a conjugao de uma variedade de elementos de reconhecimento. Alguns exemplos de ligantes de reconhecimento so os anticorpos, glicopeptdeos, polissacardeos,protenas virais e lectinas

Imunolipossomas Lipossomas contendo ligantes capazes de aumentar o acmulo de frmacos encapsulados nas clulas e tecidos alvo. Imunoglobulinas (Ig) da classe (IgG) e seus fragmentos so os ligantes mais empregados

Lipossomas como carreadores de protenas e peptdeos Contm na superfcie compostos biologicamente ativos de origem protica ou peptdica, como enzimas, hormnios peptdicos e citocinas. Estes lipossomas vm sendo utilizados no tratamento de doenas hereditrias e do cncer.

 Virossomas funo de liberar o antgeno no rgo alvo.

Os virossomas contm hemaglutinina na superfcie, a qual age como direcionador ligando-se a resduos de cido sialco na membrana das clulas do vrus.
Aps endocitose dos virossomas o meio cido dos endossomas promove modificao conformacional na hemaglutinina e em conseqncia os virossomas tornam-se fusognicos e fusionam com a membrana endoctica do vrus. Os virossomas so utilizados para potencializar o efeito de vacinas encapsuladas com liberao especfica do antgeno.

Lipossomas polimrficos so aqueles que se tornam reativos devido mudana na sua estrutura desencadeada por uma alterao de pH, temperatura ou carga eletrosttica. Lipossomas sensveis ao pH Estes carreadores so preparados com constituintes sensveis ao pH como as fosfatidiletanolaminas insaturadas e hemissuccinato decolesterila. Esses lipossomas so utilizados para libera ro frmaco no citoplasma ou no tecido intersticial de clulas tumorais, visto que o pH desse meio reduzido,comparado com o pH fisiolgico normal . Lipossomas termo-sensveis So formados por mistura de lipdeos sintticos, como a dipalmitoil-fosfatidilcolina (DPPC) e diestearoilfosfatidilcolina(DSPC), que possuem uma Tc alguns graus acima da temperatura fisiolgica, temperatura essa facilmente alcanada em local de hipertermia como o tecido tumoral . Lipossomas catinicos Como o nome sugere, estes lipossomas apresentam carga positiva na superfcie. H duas dcadas, com a descoberta de lipdeos catinicos,estes lipossomas tm sido utilizados para liberao de cidos nuclicos dentro das clulas . Os lipdeos catinicos so molculas anfiflicas compostas de uma ou duas cadeias de cido graxo acopladas a um grupo ster e um grupamento aminco hidroflico.

Classificao

Estabilidade
A estabilidade de lipossomas pode ser afetada por processos qumicos, fsicos e biolgicos.

Instabilidade qumica Os processos qumicos de instabilidade so dependentes da composio dos lipossomas, a qual implica na preveno da hidrlise do ster e da oxidao da insaturao localizada na cadeia lipdica.

Estabilidade
A estabilidade de lipossomas pode ser afetada por processos qumicos, fsicos e biolgicos.

Instabilidade fsica Alguns dos principais processos que causam a instabilidade dos lipossomas so a agregao e fuso das vesculas e o extravasamento do frmaco encapsulado.

Estabilidade
A estabilidade de lipossomas pode ser afetada por processos qumicos, fsicos e biolgicos. Instabilidade biolgica Os lipossomas devem circular e reter o frmaco por tempo suficiente para o acesso efetivo e interao com o alvo, normalmente no sangue, nas paredes dos capilares e, em certos casos, em clulas de reas extra vasculares.

Mtodos de preparao
Inicialmente, os componentes lipdicos so dissolvidos em um solvente adequado(clorofrmio, por exemplo) isento de toxidade residual. Aps remoo do solvente, a baixa temperatura e presso reduzida, obtm-se um filme lipdico bem fino.

Este ento hidratado com uma soluo tampo (glicina com gua), em temperatura acima da temperatura de transio de fase, de modo que ocorra a fuso do lipdio.
Na sequncia,a soluo submetida a vrios ciclos de agitao/aquecimento, obtendo-se ao final dessa etapa umasuspenso de MLV e ento os outros tipos de lipossomas: SUV preparado atravs do processo de sonificao, LUV atravs do processo extruso,usando homogeneizadores de alta presso, enquanto MVL obtido atravs de congelamento e liofilizao Em todas as situaes so realizadas operaes complementares de modo a garantir homogeneidade e pureza s preparaes

Mtodos de preparao

Mtodo de preparao de lipossomas baseado no processo de hidratao do filme lipdico

Aplicaes
APLICAES TERAPUTICAS
Lipossomas no tratamento do cncer Lipossomas no desenvolvimento de vacinas Lipossomas na terapia gnica

Lipossomas na terapia de doenas infecciosas e parasitrias

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS

Na rea dermocosmtica os lipossomas vm sendo utilizados, tanto para aumentar a incorporao de substncias ativas s clulas, quanto como veculo para liberao controlada de princpios ativos. (MAGDASSI, 1997; HAYWARD & SMITH, 1990;
SUZUKI & SAKON, 1990).

Eles tm sido empregados na preveno da queda de cabelos, promoo do crescimento capilar, desacelerao do processo de envelhecimento da pele, clareamento da pigmentao cutnea e preveno e tratamento da lipodistrofia ginide, etc.
(DI SALVO, 1996; SUZUKI & SAKON, 1990).

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS
A transferncia ou troca de fosfolipdios tem um efeito especial em aplicaes cosmticas, visto que os lipossomas podem alterar as propriedades da pele (rigidez, elasticidade) por fornecimento de fosfolipdios requeridos e outros componentes de membranas da pele
(REDZINIAC & PERRIER, 1996).

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS

Alm disso, os lipossomas aumentam as concentraes do princpio ativo nas camadas da pele (epiderme e derme), enquanto reduz a absoro sistmica. IMBERT et al. (1994)

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS

provvel que o uso de produtos dermocosmticos que contm lipossomas tenham efeitos positivos na aparncia da pele, como aumento da hidratao cutnea.
(REDZINIAC & PERRIER (1996)

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS
JI & JEON (1997), ao estudarem a estabilidade, eficcia e efeito de um creme contendo 5% de palmitato de retinil (77 Infarma, v.16, n 7-8, 2004 ), observaram que quando o princpio

ativo foi encapsulado em lipossomas, ele foi mais estvel e promoveu hidratao do estrato crneo por diminuio da perda de gua transepidermal.

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS
J SICILIANO (1985) observou em estudos da encapsulao de glicerol, uria e PCA-Na que a ligao de gua ao estrato crneo desidratado foi de 110% a 240% maior com os lipossomas do que com um produto controle no encapsulado.

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS
EGBARIA & WEINER (1991) citam como principais vantagens de formulaes tpicas de lipossomas : 1) - De forma semelhante s clulas, os lipossomas podem armazenar substncias hidrossolveis em seu interior e substncias lipoflicas e anfiflicas em suas membranas, onde as substncias ativas ficam retidas para serem transferidas a outras membranas, como a pele;

Aplicaes
EM DERMOCOSMTICOS
EGBARIA & WEINER (1991) citam como principais vantagens de formulaes tpicas de lipossomas : 2) - A maioria dos veculos convencionais no so eficazes para a administrao de substncias ativas atravs da pele devido a dificuldade de penetrao pela camada crnea. Todavia, os lipossomas proporcionam uma penetrao eficiente;

Aplicaes
Lipossomas so usados tanto para aumentar a incorporao de ativos nas clulas, como para prolongar a liberao destes ativos;

Aplicaes

Tem sido empregados na preveno de queda de cabelos e promoo de crescimento capilar;

Aplicaes

Empregado tambm em produtos capilares, no tratamento dos fios do cabelo;

Aplicaes
APLICAES

Na desacelerao no processo de envelhecimento da pele;

Aplicaes

No clareamento da pigmentao cutnea ;

Aplicaes

Na preveno e tratamento da lipodistrofia ginide;

APLICAES

Em emulses cremosas do tipo O/A ou A/O;

Aplicaes

Em cremes e leites;

Aplicaes

Em protetores solares e loes ps-sol;

Aplicaes

Em sistemas oil free, gis, etc.

ANTIPARASITRIOS
Estudos utilizando drogas antimoniais pentavalentes encapsulados em lipossomas tiveram incio em 1977 com pesquisadores ingleses e americanos.

Esses pesquisadores observaram que o frmaco encapsulado era 200 a 700 vezes mais eficaz contra leishmaniose visceral em ratos, cobaias e cachorros. Isso

possvel porque, alm da capacidade de liberao contnua dos frmacos, os

lipossomas so depurados do plasma por macrfagos fixos do fgado, bao e medula ssea, os principais stios de infeco pelo parasita, resultando assim em maior eficcia do frmaco encapsulado, quando comparado ao frmaco livre

IMUNOTERAPIA
As imunoterapias muitas vezes usam alrgenos livres que podem causar efeitos colaterais sistmicos. A liberao lenta dos alrgenos poderia fazer com que o paciente adquirisse tolerncia,diminuindo assim os riscos de efeitos colaterais mais srios. Os lipossomas atuam nesse sentido, fazendo com que o alrgeno seja liberado em pequenas concentraes no organismo do paciente

TRATAMENTO DE CANCER
O uso de lipossomas como vetor de quimioterpicos abrem grandes

perspectivas para o tratamento do cncer, pois possibilita maior

eficcia,reduzindo a toxicidade e a dosagem do medicamento antineoplsico . possvel ainda adicionar mais de um frmaco ao lipossoma, gerando assim

um complexo farmacolgico sinrgico .

Ainda a adio de ligantes superfcie lipossomal, com afinidade para receptores especficos para clulas tumorais, direcionam o frmaco exclusivamente aos tecidos que apresentam clulas neoplsicas. Isso aumenta a eficcia teraputica do frmaco encapsulado e reduz seus efeitos colaterais em relao queles convencionais

VANTAGENS
Lipossomas funcionam como um sistema de liberao de frmacos at os
tecidos-alvo,disponibilizando apenas uma frao controlada da droga para o stio de ao. Apresentam a vantagem de contornar propriedades fsico-qumicas limitantes das drogas no encapsuladas (como sua solubilidade em gua ou em membranas), melhorando assim a farmacodinmica (potencializao do efeito teraputico), a farmacocintica (controle da absoro e distribuio tecidual) e seus efeitos toxicolgicos(reduo da toxicidade local e sistmica).