Vas de sealizacin implicadas en la megacariopoyesis

Javiera Inostroza Ziga Tecnologa Mdica

Introduccin
Objetivo de la revisin: actualizacin de la megacaripoyesis y de las vas de sealizacin involucradas en el proceso Vanadio: megacariocitosis y trombocitosis

Plaquetas
Fragmentos de citoplasma del megacariocito. Forma de disco , 2-4 m. Rango: 150.000-400.000 l. Vida media: 7- 14 das (10 das) Produccin medular:1 x 10^11 plq por da.

Funciones de las Plaquetas

Hemostasia.

Actividad fagoctica y bactericida. Biologa de las metstasis tumorales.

Alteraciones de las plaquetas

Alteraciones

Cualitativas

Cuantitativas

Trombocitosis

Trombocitopenia

Megacariopoyesis y trombopoyesis
Megacariopoyesis: diferenciacin de lnea megacarioctica. Trombopoyesis: liberacin de plaquetas a partir del citoplasma del megacariocito maduro.

Ocurren en Mdula sea y pulmn *

Megacariocito
150 m de dimetro. Ncleo poliploide Endomitosis Citoplasma granular: grnulos alfa y densos Fragmentacin de citoplasma da origen a plaquetas ( 10.000)

De progenitores a clulas precursoras depende de:

La activacin de genes especficos

Presencia de factores de crecimiento, citocinas y quimioquinas

Diferenciacin eritroide y megacarioctica

PU.1 GATA-1

GATA-2
FOG

CFU-MEG 4n

64 n

BFU-Meg y CFU-Meg: CD33, CD34 y CD41 Megacarioblasto: 15-50 m, no tiene grnulos. Promegacariocito: 20-80 m, tiene grnulos.Ya tiene CD41, CD42, y CD61 y FvW Megacariocito: hasta 150 m

Liberacin de plaquetas
Protrusiones citoplasmticas Fragmentacin del citoplasma Activacin de caspasas Reorganizacin de los filamentos de actina y extensin de microtbulos

Citoquinas y quimiocinas y las vas de sealizacin implicadas en la megacariopoyesis

Megacariopoyesis

Dependiente de trombopoyetina

Independiente de trombopoyetina
SDF1/FGF4 Gp130 NOTCH BMP4 NMDA

Jak/STAT Ras/MAPK P13K/AKT

Trombopoyetina (TPO)
Principal hormona reguladora de la produccin plaquetaria Glucoprotena de 353 aa, 30 kDa Gen en cromosoma 3q27 Producida por hgado, rin y estroma de mdula sea Receptor: Mpl (protooncogen)

Trombopoyetina y su receptor Mpl

1992: descubrimiento de c-Mpl, protooncogen celular. De familia de receptores de citocinas hematopoyticas 1994:Clonamiento de TPO

Aumento de TPO
Aumento de colonias de progenitores megacariocticos Incremento de n de megacariocitos y plaquetas Incremento en tamao de megacariocito y volumen de plaquetas Anemia

Lnea eritroide *Administracin exgena: megacariocitosis y trombocitosis

Niveles de trombopoyetina
Produccin en hgado y rin es constitutiva Unin de TPO a Mlp: internalizacin. Mayor n de PLQ, menor TPO Menor N de PLQ, mayor TPO Otros factores: Aumentan produccin de TPO en M.o: PDGF y FGF-2. Disminuyen la produccin de TPO en M.o: TGF- y, factor-4 plaquetario, trombospondina

Excepciones: Trombocitopenia por destruccin (menor TPO) Trombocitosis reactiva secundaria a inflamacin (aumento de TPO) TNFIL-6 estimulacin de transcripcin en hgado

Va de sealizacin (1)

Caja 1 y Caja 2

Jak-2

Va de sealizacin (1)

Va de sealizacin (1)

Adaptador Shc se une a Mlp

Va de sealizacin (2)

Proliferacin y poliploidizacin de megacariocitos

Diferenciacin de megacariocitos

Va de sealizacin (3)

Promueve la supervivencia y entrada al ciclo celular

P P

Regulacin negativa de las vas de sealizacin activadas por TPO

SHP1: desfosforilacin directa. Mut: aumento en proliferacin e hipersensibilidad a factores de crecimiento en general SOCS: unin directa a JAK-2, compite con STAT o se puede unir a STAT impidiendo dimerizacin

Regulacin negativa de las vas de sealizacin activadas por TPO

Lnk: Disminuye progresin a fase S del ciclo celular inducida por TPO Disminuye el crecimiento de megacariocitos de mdula sea en cultivo Media proceso de unin de megacariocito con VCAM-1 de clulas endoteliales : disminuye la activacin de MAPK y STAT-5 (regulacion (-) de liberacin de PLQ a circulacin)

Regulacin negativa de las vas de sealizacin activadas por TPO

Lyn: regula
proliferacin inducida por TPO, disminuyendo duracin y actividad de MAPK

FAK (kinasa de adhesin focal):

tienen dominio FERM (unin a Mpl) y se unen a Lyn.

Enfermedades involucradas
Ausencia de TPO o mut.en Mlp: trombocitopenia y disminucin de stem cells y clulas progenitoras de todos los linajes Trombocitopenia amegacarioctica congnita: mut en Mlp, anemia aplstica Mutaciones activantes en el promotor del gen TPO y Mlp (c-Mlp Baltimore): trombocitemia escencial familiar Trombocitemia escencial adquirida: mut Jak2 (JAK2V617F)

Citoquinas y quimiocinas y las vas de sealizacin implicadas en la megacariopoyesis

Megacariopoyesis

Dependiente de trombopoyetina

Independiente de trombopoyetina
SDF1/FGF4 Gp130 NOTCH BMP4 NMDA

Jak/STAT Ras/MAPK P13K/AKT

Megacariopoyesis independiente de TPO

IL3, IL6 e IL11 Factor -1 derivado del estroma (SDF1 o CXCL12) Factor de crecimiento fibroblstico-4 (FGF4 o CXCL4) GP 130 NOTCH BMP4 NMDA

SDF1/FGF4
Nicho osteoblstico: promueve quiescencia y autorenovacin Nicho vascular: promueve proliferacin, diferenciacin y transmigracin endotelial *FGF4: aumenta tamao de magacariocitos y n de plaquetas

SDF1/FGF4

SDF1/FGF4

Aplicacin de SDF1:
Tto en mielosupresin Tto a trombocitopenia secundaria a infeccin con VIH (infecta megacariocitos por interacin con CXCR4)

Sealizacin por receptores Gp130

GP130: anclada a membrana, activa va JAK/STAT y Ras/MAPK Activacin de Jak1, tambin Jak2 TyK2 Ratones Gp130 -/- : trombocitopenia moderada, sin reduccin de progenitores rol de maduracin de megacariocitos, no tanto en proliferacin de precursores

Sealizacin de receptores Gp130

IL11

LIF

Sealizacin por receptores Gp130

IL11 y LIF (de familia de IL6) promueven maduracin y proliferacin de megacariocitos in vitro, y aumentan efectos de IL3 y TPO. Modificaciones en el citoesqueleto del megacariocito liberacin de PLQ Neumega (IL11 recombinante): tto de trombocitopenia en quimioterapia

Sealizacin NOTCH
NOTCH y ligandos: Protenas transmembrana 4 tipos de NOTCH(1-4) y ligandos (Jagged 1,2 y Delta-like 1,3,4) N1,3 y 4, Jagged1 y Deltalike 1: en megacariocitos Promueve la megacariopoyesis sobre eritropoyesis
Activacin de transcripcin de genes

BMP4
BMP: protena morfogentica del hueso BMP4: generada por clulas del estroma de la M.sea, tambin por progenitores megacariocticos Regulan proliferacin, diferenciacin, migracin. Importante en hematopoyesis In vitro: regula todas las etapas de la megacariopoyesis (vas de TPO) Posible terapia para trombocitopenia

NMDA
Bloqueo: inhibicin en el aumento de tamao y disminucin de expresin CD41 Subtipos NR1 y NR2 activa Ca2+ (heterodmero) Calmodulina
Estimula maduracin, proliferacin, formacin de plaquetas, adhesin y agregacin

PKC

Estimula diferenciacin va PMA

Src
Ras/MAPK

Perspectivas
Poliploida: nicamente porque se requiere gran cantidad de citoplasma? Mecanismos de accin de protenas que regulan megacariopoyesis Regulacin por parte de clulas del estroma y endoteliales Nuevos tratamientos Estudio de relacin ambiente-salud

Gracias

SDF1/FGF4

SDF1: factor 1 derivado del estroma

VCAM1: Molcula de adhesin vascular 1

VLA4: Antgeno muy tardo 4