Fosforilación Oxidativa

Dr. Giuliano Bernal Dossetto

Departamento de Ciencias Biomédicas
Facultad de Medicina
Universidad Católica del Norte
 Fosforilación oxidativa
 Esla culminación del rendimiento energético en
el metabolismo de los organismos aeróbicos.
 Eneucariontes la fosforilación oxidativa ocurre
en la mitocondria e involucra la reducción de O2
a H2O, utilizando los electrones cedidos por
NADH y FADH2.
 La síntesis de ATP en la mitocondria se basa en
la teoría quimiosmótica (Peter Mitchell, 1961) e
involucra una gradiente de protones de
transmembrana.
• Eugene Kennedy y Albert Lehninger
(1948) describen la mitocondria como el
sitio donde ocurre la fosforilación oxidativa.
• La membrana interna mitocondrial podría
poseer sobre 10.000 complejos
transportadores de electrones y complejos
ATP-sintasa.
• Las mitocondrias de las células cardíacas
poseen 3 veces más complejos
transortadores de electrones que las
mitocondrias de hepatocitos.
 Nucleótidos de nicotinamida
 NADH y NADPH son transportadores de ē
solubles en agua que se asocian
reversiblemente con deshidrogenasas.
 Lasdeshidrogenasas dependientes de
NAD+ remueven 2 átomos de H de sus
sustratos.
 NADH transporta ē desde reacciones
catabólicas y NADPH suple ē a
reacciones anabólicas.
Transporte de electrones a través de aceptores universales
 Flavoproteínas

 Lasflavoproteínas contienen FMN o FAD

unido fuertemente o en algunos casos
unido covalentemente.
 Latransferencia de ē depende del potencial
de reducción standard de la flavoproteína y
no del FMN o FAD aislados.
 Sedebe considerar a esta coenzima como
parte del sitio activo.
 Otros transportadores de ē
 Ubiquinona:Llamada coenzima Q, es una
benzoquinona liposoluble con una larga
cadena isoprenoide.
 Puede aceptar un ē para formar el radical
semiquinona, o dos ē para generar
ubiquinol.
 Difundecon facilidad por la membrana
interna mitocondrial.
 Citocromos
 Ferroproteínas de la membrana interna
mitocondrial capaces de transportar ē.
 Poseen hem como grupo prostético.
 Existen 3 clases de citocromos de acuerdo a su
absorción de luz, los citocromos a, b y c.
 Citocromos a y b forman parte integral de la
membrana. El citocromo c mitocondrial (104 aa)
es hidrosoluble.
 Ferrosulfoproteínas
 En este caso la unión de Fe se lleva a cabo con
átomos de S inorgánico o de residuos de
cisteína.
 Se conocen 3 tipos de coordinación del Fe.
 Todas estas proteínas participan en la
transferencia de 1 ē en la que el Fe se oxida o
reduce.
 Poseen un potencial de reducción estándar
bajo, por lo que son buenos dadores de ē.
Potencial estándar de reducción
 Los ē son transferidos desde el transportador de
menor al de mayor potencial estándar de reducción.
 Mediante inhibidores específicos se ha determinado
la secuencia completa de los transportadores.
 El orden de acción de los transportadores de ē es
NADH, Q, cit b, cit c1, cit c, cit a y a3.
 El tratamiento suave de la membrana interna con
detergentes permite obtener 4 complejos
transportadores de ē, cada uno representando una
fracción de la cadena respiratoria completa.
Inhibidores de la cadena respiratoria
Purificación de los
complejos transportadores
de ē desde la membrana
mitocondrial
 Complejo I
 Complejo NADH deshidrogenasa.
 Recibe NADH generado por las diferentes
deshidrogenasas.
 En esta reacción se reduce la ubiquinona.
 Elcomplejo posee FMN y centros Fe-S como
grupos prostéticos.
 Es inhibida por amital (barbitúrico), rotenona
(insecticida) y piericidina A (antibiótico).
 Complejo II
 Complejo succinato deshidrogenasa.
 Posee 5 subunidades, una de las cuales
cataliza la oxidación de succinato a
fumarato.
 También participa en la reducción de
ubiquinona.
 Posee FAD y centros Fe-S como grupos
prostéticos.
 Complejo III
 Complejo citocromo c óxido-reductasa
 Posee citocromos b562 y b566 y c1, además de una
ferrosulfoproteína.
 El transporte de ē desde la coenzima Q a los
citocromos se realiza a través de una serie de
reacciones denominadas ciclo Q.
 AntimicinaA (antibiótico) bloquea la transferencia
de ē desde ubiquinol a citocromo c.
 Losprotones liberados cuando se oxida ubiquinol
aumentan la gradiente de protones de membrana.
 Complejo IV
 Complejo citocromo oxidasa.
 Atraviesala membrana mitocondrial y cataliza la
reducción del O2 para formar H2O.

 Posee los citocromos a y a3. La citocromo c

oxidasa también posee dos iones de cobre, Cua
y Cub que participan en la transferencia de ē al
O2.
 Cianuro y CO bloquean a esta enzima.
Cadena respiratoria
 Complejo ATP sintasa
 Posee dos complejos diferentes (F0 y F1) y
varias subunidades.
 F0 esun canal para el ingreso de protones hacia
la matriz. F1 posee actividad ATP sintasa.
 Oligomicina inhibe la síntesis de ATP uniéndose
a la subunidad F0.
 La síntesis de ATP se produce a medida que
reingresan protones a la matriz.
Complejo F1
Microfotografía que muestra el movimiento de
la ATP sintasa en el curso de una reacción.