UNIVERSIDADE FEDERAL

UFERSA
RURAL DO SEMI-RIDO

Aula 1 Mtodos e Tcnicas Gerais em Laboratrio (Biossegurana e Biologia Celular)

Disciplina Mtodos em Biotecnologia Professora: Anabelle Batista

Biossegurana
Resoluo 01 do Conselho Nacional de Sade 1988

Lei 8.974/95 + decreto 1.752/95 criou o CTNBio

O Que regulamenta as questes de biossegurana?

Objetivo: propor toda a poltica Nacional de Biossegurana, publicando normas e instrues normativas que devem ser acatadas em todos os nveis

Biossegurana ....
Regras que eliminam ou minimizam riscos inerentes s atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de servios, que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do meio ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos. Que voc faz em seu estgio para eliminar ou minimizar riscos a sua sade?

Smbolos diversos em biossegurana

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Bata: por que usar?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Os equipamentos esto posicionados corretamente?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Qual a importncia da touca e quando usar?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Por que guardar vidraria em cima da pratileira?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Qual a importncia da capela biolgica para sua segurana e para a dos seus colegas?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Qual a cadeira certa para sentar na bancada? Por que?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Est boa a disposio dos microscpios? E a Janela ao fundo?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Est correto o uso de suporte para aparar os tubos de ensaio?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Est correta a posio do banco para trabalhar na bancada?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Que vocs acham da posio da pia na parede e na bancada?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

O uso de prateleiras nas bancada est correto?

Algumas dicas de Biossegurana em laboratrio

Como utilizar de forma segura um autoclave?

Outros pontos de Biossegurana

Todos os frascos e garrafas devem ter tampas ou rolhas, que devero ser recolocadas imediatamente aps o seu uso;

Outros pontos de Biossegurana

Qualquer servio em utilizao (gua, gs, eletricidade, cmara de exausto) numa experincia temporariamente no vigiada, deve exibir uma mensagem identificando o responsvel pela experincia; Todo material do laboratrio deve ser devidamente identificado com um rtulo, onde constem: tipo de material armazenado, nome de quem e quando o armazenou e a sua validade;

Por que voc acha que deva ser importante rotular os seus frascos?

Outros pontos de Biossegurana

O material de vidro partido ou rachado deve ser de imediato posto fora envolto num jornal ou reparado;
No permitido fumar, beber ou comer no laboratrio, nomeadamente para evitar o risco de exploses de compostos inflamveis ou o contato com substncias txicas ou microorganismos patognicos;

Biossegurana
No evaporar solventes para a atmosfera. A evaporao deve ser feita numa cmara de exausto e, quando se usa uma bomba de vcuo, necessrio assegurar que a sada desta conduza ao exterior;
Antes de deixar o laboratrio no final de um dia de trabalho, a ltima pessoa a sair deve certificar-se de que todos os aparelhos eltricos se encontram desligados e que todas as torneiras de gs e de gua se encontram fechadas.

Biologia Celular
O Que estuda?
Quais equipamentos vocs conhecem?

Biologia Celular
Microscpio Luz
Como funciona? Que eu posso olhar com ele?

Biologia Celular
Microscpio Luz Aumenta at 1000x (h casos de 2000x) A ocular normalmente vale 10x (h casos em que vale 20x) Objetivas aumento varivel Resoluo mxima dependente da fonte de luz Poder de resoluo do microscpio o poder do mesmo de distinguir dois pontos Quanto menor adjacentes (lado a lado) melhor? Max. MO = 200 nanmetros Max. Olho = 100.000 nanmetros

Biologia Celular
Microscpio Unidades de medida 1 micrmetro = 10-6 metro = 10-3 milmetros 1 nanmetro = 10-9 metro = 10-6 milmetros 1 armstrong = 10-10 metro =10-7 milmetros

Biologia Celular
Cuidados com o uso: -Sempre colocar a capa de proteo aps uso. Essa capa deve ter microporos para inviabilizar a multiplicao de fungos. Manter a capa limpa.
-As objetivas devem ser limpas com papel filtro macio para que no risque a lente, embebido numa mistura de 70% etanol + 30% de ter, no inundar a lente!!!.

Biologia Celular
Cuidados: -Usar apenas ter para limpar o leo de imerso, o lcool criar um aspecto fosco na lente. Se necessrio usar benzina absoluta para limpar as lentes aps o uso do leo de imerso

Biologia Celular
Microscpio de Fluorescncia Para que serve?

Biologia Celular
Microscpio de Fluorescncia Mecanismo de uso: emisso de luz por lmpada apropriada; A imagem observada o resultado da radiao electromagntica emitida pelas molculas que absorveram a excitao primria e re-emitiram uma luz com maior comprimento de onda; Para deixar passar somente a emisso secundria desejada, devem-se colocar filtros apropriados debaixo do condensador e por cima do objectivo.

Biologia Celular
Microscpio de Fluorescncia Usa-se para detectar substncias com autofluorescncia (vitamina A) ou substncias marcadas com fluorocromos.

Exemplo?

Biologia Celular
Microscpio eletrnico de transmisso Os microscpios eletrnicos usam lentes magnticas (bobinas que criam campos magnticos) para focalizar o feixe de eltrons;
No microscpio eletrnico a ampliao conseguida variando-se a corrente eltrica das bobinas; Amplia ~ 1 milho de vezes Transmite em preto-branco;

Biologia Celular
Em que situaes eu posso usar?

Biologia Celular
Microscpio eletrnico de transmisso

Biologia Celular
Microscpio eletrnico de varredura

Biologia Celular
Microscpio eletrnico de varredura Pode ampliar ~ 500 mil

Em que situaes eu posso usar?

Biologia Celular
Centrfuga Em que situaes eu posso usar?

Biologia Celular
Pipetas Em que situaes eu posso usar?

Biologia Celular
Banhos termostticos
Em que situaes eu posso usar?

Biologia Celular
Fluxo laminar, capela biolgica, cabine Em que situaes eu posso usar?

Biologia Celular
Espectrometria de UV/visvel

Quando um fton se aproxima ocorrem trs eventos: ou ele passa direto, ou refletido, ou absorvido (se possui a frequncia necessria);

Em que situaes eu posso usar?

Biologia Celular
Para espectroscopia apenas no visvel usar cubeta de vidro; Para espectroscopia de ultravioleta usar cubetas de quartzo, pois no absorve luz no UV (por que isso importante?) Espectro de luz visvel: Comprimento de onda: 700 nm a 400 nm Espectro de luz ultravioleta: Comprimento de onda: 400 nm a 15 nm

Biologia Celular
pHmetro, medidor de oxignio e condutividade

Biologia Celular
Destilador

Biologia Celular
Destilador